由牛支原體和多殺性巴氏桿菌混合感染引起的犢牛肺炎和關(guān)節(jié)炎，可導(dǎo)致大量犢牛的死亡及嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因國(guó)內(nèi)尚無(wú)理想的疫苗對(duì)其進(jìn)行有效的預(yù)防，抗菌藥物易產(chǎn)生耐藥性及效果不穩(wěn)定。本研究旨在制備抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌的卵黃抗體并進(jìn)行臨床應(yīng)用觀察，為本病提供新的防治方法。研究結(jié)果如下：1、抗牛支原體高免卵黃抗體的制備：首免采用弗氏完全佐劑滅活苗免疫蛋雞，劑量為0.5mg/只，首免后第15、30、45d采用弗氏不完全佐劑滅活苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫，劑量分別為1mg/只、1.5mg/只、2mg/只。通過(guò)間接ELISA的方法檢測(cè)卵黃抗體效價(jià)，結(jié)果表明：在首免后第15d卵黃抗體效價(jià)不斷增高，免疫后第60d達(dá)到高峰，效價(jià)為1:128000，并維持30d以上效價(jià)開(kāi)始下降。2、抗牛多殺性巴氏桿菌高免卵黃抗體的制備：首免采用弗氏完全佐劑滅活苗免疫蛋雞，劑量為15億/只，首免后第10、20、30d采用弗氏不完全佐劑滅活苗加強(qiáng)免疫，劑量為30億/只。采用已建立的IHA方法檢測(cè)卵黃抗體效價(jià)，結(jié)果表明：在首免后第3周出現(xiàn)抗體并且效價(jià)不斷增高，免疫后第7周抗體效價(jià)達(dá)到高峰，效價(jià)為1:1024，持續(xù)5周開(kāi)始下降。3、抗牛支原體及... 

【文章來(lái)源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要縮略詞
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 牛支原體的研究進(jìn)展
        1.1 支原體的研究概述
        1.2 牛支原體的研究概述
    2 多殺性巴氏桿菌的研究進(jìn)展
        2.1 多殺性巴氏桿菌的研究概述
        2.2 病原
        2.3 流行病學(xué)
        2.4 致病性
        2.5 牛多殺性巴氏桿菌的臨床癥狀與病理變化
        2.6 診斷
        2.7 預(yù)防與治療措施
    3 卵黃抗體的研究進(jìn)展
        3.1 IgY 的形成
        3.2 IgY 的結(jié)構(gòu)
        3.3 IgY 的穩(wěn)定性
        3.4 IgY 的制備
        3.5 IgY 的展望
第二章 試驗(yàn)研究
    試驗(yàn)一 抗牛支原體高免卵黃抗體的制備
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 試驗(yàn)菌株及藥品試劑
            1.3 主要設(shè)備
            1.4 佐劑的制備
            1.5 間接 ELISA 檢測(cè)所需試劑及其配置
            1.6 牛支原體培養(yǎng)基的配制
        2 方法
            2.1 牛支原體抗原的制備
            2.2 牛支原體疫苗的制備
            2.3 疫苗質(zhì)量檢測(cè)
            2.4 蛋雞的免疫
            2.5 間接 ELISA 檢測(cè)卵黃中抗體效價(jià)
            2.6 最佳包被抗原和卵黃上清的最佳稀釋倍數(shù)的確定
            2.7 確定酶標(biāo)二抗的最佳工作濃度
            2.8 臨界值的確定
            2.9 免疫后卵黃抗體效價(jià)的變化規(guī)律
            2.10 分離卵黃抗體
            2.11 卵黃抗體的無(wú)菌與安全性檢測(cè)
        3 結(jié)果
            3.1 疫苗質(zhì)量檢測(cè)
            3.2 最佳包被抗原濃度和卵黃上清的稀釋倍數(shù)的確定
            3.3 酶標(biāo)二抗最佳濃度的確定
            3.4 臨界值的確定
            3.5 免疫后卵黃抗體水平的變化規(guī)律
            3.6 卵黃抗體的無(wú)菌及安全性檢測(cè)
        4 討論
    試驗(yàn)二 抗牛多殺性巴氏桿菌高免卵黃抗體的制備
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 試驗(yàn)菌株及藥品試劑
            1.3 主要設(shè)備
            1.4 佐劑的制備
            1.5 主要試劑溶液的配置
            1.6 牛多殺性巴氏桿菌液體培養(yǎng)基的制備
        2 方法
            2.1 抗原的制備
            2.2 牛多殺性巴氏桿菌疫苗的制備
            2.3 疫苗質(zhì)量檢測(cè)
            2.4 蛋雞的免疫
            2.5 綿羊紅細(xì)胞的制備
            2.6 綿羊紅細(xì)胞的醛化
            2.7 醛化紅細(xì)胞的鞣酸化
            2.8 抗原致敏醛化-鞣酸化紅細(xì)胞
            2.9 IHA 檢測(cè)卵黃中抗體效價(jià)
            2.10 免疫后卵黃抗體效價(jià)的變化規(guī)律
            2.11 分離卵黃抗體
            2.12 卵黃抗體的無(wú)菌與安全性檢測(cè)
        3 結(jié)果
            3.1 疫苗質(zhì)量檢測(cè)
            3.2 最佳抗原濃度的選擇
            3.3 免疫后卵黃抗體效價(jià)的變化規(guī)律
            3.4 卵黃抗體的無(wú)菌及安全性檢測(cè)
        4 討論
    試驗(yàn)三 抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌二聯(lián) IgY 的制備
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 試驗(yàn)藥品及試劑
            1.3 主要設(shè)備
            1.4 主要溶液的配置
        2 方法
            2.1 水稀釋法提取 IgY
            2.2 氯仿法提取 IgY
            2.3 卡拉膠法提取 IgY
            2.4 透析袋的預(yù)處理
            2.5 透析
            2.6 透析后 IgY 的無(wú)菌與安全性檢測(cè)
                2.6.1 無(wú)菌檢測(cè)
                2.6.2 安全性檢測(cè)
            2.7 效價(jià)的檢測(cè)
        3 結(jié)果
            3.1 效價(jià)的檢測(cè)
            3.2 透析后 IgY 的無(wú)菌與安全性檢測(cè)
        4 討論
    試驗(yàn)四 抗牛支原體及多殺性巴氏桿菌二聯(lián) IgY 的臨床應(yīng)用效果觀察
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇
            1.2 實(shí)驗(yàn)藥品
        2 方法
            2.1 預(yù)防及治療最佳量的確定
            2.2 臨床治療效果判定指標(biāo)
        3 結(jié)果
            3.1 最佳預(yù)防量的確定和預(yù)防結(jié)果
            3.2 最佳治療量的確定和治療結(jié)果
        4 討論
第三章 全文結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
在學(xué)校期間主要參與的研究課題
在學(xué)期間發(fā)表文章情況
導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]牛巴氏桿菌病的研究進(jìn)展[J]. 朱戰(zhàn)波.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2012(08)
[2]牛巴氏桿菌病的診斷方法[J]. 李金嶺,郭宏軍,宋艷華.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2012(08)
[3]牛巴氏桿菌病的防制[J]. 樸范澤.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2012(08)
[4]肉牛牛支原體肺炎感染的細(xì)菌學(xué)研究[J]. 肖淦文,彭清潔,崔朋,胡長(zhǎng)敏,陳穎鈺,巴曉亮,陳煥春,郭愛(ài)珍.  中國(guó)牛業(yè)科學(xué). 2012(03)
[5]致?tīng)倥７窝缀完P(guān)節(jié)炎牛支原體新疆株的分離與鑒定[J]. 姚永進(jìn),剡根強(qiáng),王靜梅,范偉興,李巖.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2011(12)
[6]一起多發(fā)性牛巴氏桿菌病的診治報(bào)告[J]. 李旭蓉,何彥春.  中國(guó)牛業(yè)科學(xué). 2011(05)
[7]3種ELISA試劑盒檢測(cè)抗牛支原體抗體的比較[J]. 劉洋,陳維,宋志強(qiáng),孫文靜,李媛,鄒小輝,辛九慶.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]卵黃球蛋白Y的制備及應(yīng)用[J]. 祝貴新.  養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn). 2011(05)
[9]牛巴氏桿菌病的流行及診治[J]. 鄭再成,閆文廣.  養(yǎng)殖技術(shù)顧問(wèn). 2011(03)
[10]淺析牛巴氏桿菌病的流行特點(diǎn)和預(yù)防[J]. 羅永鋒.  中國(guó)畜禽種業(yè). 2011(01)

碩士論文
[1]豬肺炎支原體MY-99株的培養(yǎng)特性、致病性及免疫原性研究[D]. 張莉.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[2]綿羊肺炎支原體山東株的分離鑒定和標(biāo)準(zhǔn)株外膜蛋白特性研究[D]. 王建昌.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[3]牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）抗原捕獲ELISA檢測(cè)試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)化研究[D]. 鄧宇.石河子大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3413773