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新城疫La Sota C5株反向遺傳平臺(tái)建立及雞IFN-β單克隆抗體制備

發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 06:55
  新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)強(qiáng)毒株引起的一種極具傳染性的烈性傳染病,被國(guó)際獸疫局(OIE)列為法定報(bào)告疾病之一。NDV屬于副黏病毒科(Paramyxoviridae),副黏病毒亞科(Paramyxovirinae),禽腮腺炎病毒屬(Avuluvirus)中的成員,是單股、負(fù)鏈、不分節(jié)段、有囊膜的RNA病毒。本研究對(duì)一株NDV經(jīng)典弱毒疫苗株La Sota進(jìn)行了連續(xù)5輪的雞胚有限稀釋純化,篩選到一株血凝價(jià)高,致病力低的純化培養(yǎng)克隆株C5;重新測(cè)定了其全基因組序列后,還在此基礎(chǔ)上,成功構(gòu)建了La Sota C5株的全長(zhǎng)cDNA克隆和三個(gè)輔助質(zhì)粒。經(jīng)轉(zhuǎn)染BSR/T7-5細(xì)胞后,拯救出了帶有遺傳標(biāo)記的重組病毒。同時(shí),本研究還制備了抗雞β干擾素(Interferon-β)的單克隆抗體,為日后更好地研究NDV在感染時(shí)與雞先天性免疫系統(tǒng)之間的關(guān)系奠定了基礎(chǔ)。1.疫苗株La Sota的純化及全基因組序列分析La Sota是目前國(guó)內(nèi)使用最廣泛的弱毒疫苗株。但由于年代久遠(yuǎn),國(guó)內(nèi)保存的La Sota經(jīng)過反復(fù)傳代后,出... 

【文章來源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

新城疫La Sota C5株反向遺傳平臺(tái)建立及雞IFN-β單克隆抗體制備


新城疫病毒病毒粒子形態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖(Alexanderetal.,1999)

新城疫La Sota C5株反向遺傳平臺(tái)建立及雞IFN-β單克隆抗體制備


全基因組的RT-PCR產(chǎn)物電泳圖譜

新城疫La Sota C5株反向遺傳平臺(tái)建立及雞IFN-β單克隆抗體制備


LaSotaC5與GenBank發(fā)布的LaSota毒株三級(jí)結(jié)構(gòu)分析結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[8]反向遺傳學(xué)技術(shù)及其在FMDV研究中的應(yīng)用[J]. 劉光清,劉在新,謝慶閣.  生物技術(shù)通報(bào). 2003(03)
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[10]單克隆抗體在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用[J]. 陳榮.  上海農(nóng)業(yè)科技. 1987(03)



本文編號(hào):3413260

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