為了檢測(cè)奶牛乳腺炎無(wú)乳鏈球菌GapC1-150抗原相關(guān)疫苗免疫血清抗體,我們用重組蛋白GapC1-150作為包被抗原建立了間接ELISA牛血清抗體檢測(cè)方法。通過(guò)方陣法確定包被抗原濃度和血清稀釋度;通過(guò)對(duì)陰性牛血清和免疫牛血清的OD450值檢測(cè)分析確定cut-off值;通過(guò)與多種抗原免疫血清和病原感染血清進(jìn)行檢測(cè)確定該方法具有良好的特異性;通過(guò)對(duì)陽(yáng)性和陰性血清倍比稀釋檢測(cè)確定該檢測(cè)方法靈敏性較好,并對(duì)臨床收集的牛血清樣本進(jìn)行了檢測(cè)。以上結(jié)果表明,所建立的間接ELISA檢測(cè)方法可用于GapC1-150抗原相關(guān)疫苗免疫血清抗體檢測(cè)。 

【文章來(lái)源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,32(06)

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

ELISA的cut-off值確定

用方陣法以不同濃度的包被抗原與不同稀釋度的陰、陽(yáng)血清做間接ELISA，測(cè)定OD450值，求P/N值。當(dāng)抗原包被濃度為2.5μg·m L-1、血清稀釋1/1 000時(shí)，P/N值最大。結(jié)果詳見(jiàn)表1。2.3 間接ELISA反應(yīng)條件優(yōu)化

用建立的ELISA檢測(cè)方法分別對(duì)重組e Gap C1-150、GIT、Isd B、Trap、p ET32a、金葡菌Wood46、無(wú)乳鏈球菌HLJ57、大腸桿菌腹瀉牛血清、牛副結(jié)核陽(yáng)性血清、牛布氏桿菌陽(yáng)性血清進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，g Gap C1-150作為包被抗原所建立的間接ELISA檢測(cè)方法，檢測(cè)到e Gap C1-150蛋白免疫血清、GIT免疫血清陽(yáng)性，其他血清均呈陰性，說(shuō)明與其他血清無(wú)交叉反應(yīng)。結(jié)果詳見(jiàn)圖4。圖3 ELISA的cut-off值確定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]乳房鏈球菌GapC蛋白的表達(dá)及免疫保護(hù)研究[D]. 夏春雷.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3413231