鉛（lead,Pb）是一種有毒重金屬,可損害人和動(dòng)物的健康。硒（selenium,Se）是人和動(dòng)物必需的微量元素之一,能夠緩解重金屬的毒性作用。國內(nèi)外已經(jīng)有關(guān)于動(dòng)物鉛中毒的研究,但是,硒緩解鉛引起的雞心臟氧化應(yīng)激和免疫毒性的機(jī)制尚不清楚。因此,本研究建立了雞鉛硒模型。通過對雞心臟組織顯微結(jié)構(gòu)觀察和超微結(jié)構(gòu)觀察,以及對氧化應(yīng)激相關(guān)因子、NO、iNOS、細(xì)胞因子和熱休克蛋白水平的檢測,探討硒緩解鉛引起的雞心臟氧化應(yīng)激和免疫毒性的機(jī)制。180只7日齡海蘭蛋公雞被隨機(jī)分成對照組、Se組、Pb+Se組和Pb組,每組45只雞。對照組飼喂標(biāo)準(zhǔn)商品日糧（Se含量為0.49 mg/kg）和飲用水;Se組飼喂添加亞硒酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)商品日糧（Se含量為1 mg/kg）和飲用水;Pb+Se組飼喂添加亞硒酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)商品日糧（Se含量為1 mg/kg）和添加醋酸鉛的飲用水（Pb含量為350 mg/L）;Pb組飼喂標(biāo)準(zhǔn)商品日糧和添加醋酸鉛的飲用水（Pb含量為350 mg/L）。在試驗(yàn)的第30天、60天和90天,分別從每組隨機(jī)取15只雞處死,并采集心臟組織樣品。檢測指標(biāo)如下:顯微結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu),氧化應(yīng)激相關(guān)因子（GPx、... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

雞心臟顯微結(jié)構(gòu)（蘇木精和伊紅染色×400）

圖 3-2 雞心臟的超微結(jié)構(gòu)Fig. 3-2 Ultrastructure of chicken hearts3.3 總 RNA 和 PCR 產(chǎn)物的鑒定總 RNA 的 OD260/OD280 比值在 1.9-2.1。結(jié)果說明總 RNA 的純度合格。且總 RNA 瓊脂糖凝膠電泳條帶清晰見附錄 B（圖 B1）。溶解曲線單峰，引物具有特異性，沒有出現(xiàn)二聚體。Ct 值滿足 20 到 30 之間見附錄 C。PCR 產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳分析，沒有多余條帶，與預(yù)期大小一致見附錄 B（圖 B2 和圖 B3）。3.4 氧化應(yīng)激相關(guān)因子的結(jié)果我們檢測了試驗(yàn)第 30 天、60 天和 90 天 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)的雞心臟 GPx（圖 3-3（a））、GST（圖 3-3（b））和 SOD（圖 3-3（c））活性，GSH（圖 3-3（d））和 MDA（圖 3-3（e））含量如圖 3-3 所示。在試驗(yàn)的 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，GPx、GST 和 SOD 活性，以及 GSH 和 MDA 含量在對照組和 Se 組之間差異不顯著（P > 0.05）。在試驗(yàn)的 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，Pb+Se 組 GPx、GST和 SOD 活性，以及 GSH 含量顯著低于（P < 0.05）對照組和 Se 組。在試驗(yàn)的 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，Pb+Se 組 MDA 含量顯著高于（P < 0.05）對照組和 Se 組。在試驗(yàn)的 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，Pb 組 GPx、

圖 3-3 雞心臟 GPx、GST 和 SOD 活性，GSH 和 MDA 含量Fig. 3-3 GPx, GST, and SOD activities, GSH and MDA contents in chicken hearts.3.5 NO 含量、iNOS 活性、iNOS mRNA 和蛋白表達(dá)我們檢測了試驗(yàn)第 30 天、60 天和 90 天這 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)的雞心臟 NO 含量（圖 3-4（a））、iNOS 活性（圖 3-4（b））和 iNOS mRNA 表達(dá)（圖 3-4（c）），以及試驗(yàn)第 90 天的 iNOS的蛋白表達(dá)（圖 3-4（d））見圖 3-4。在試驗(yàn)的 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA表達(dá)在對照組和 Se 組之間差異不顯著（P > 0.05）。在試驗(yàn)的 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，Pb+Se 組 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表達(dá)顯著高于（P < 0.05）對照組和 Se 組。在試驗(yàn) 3 個(gè)時(shí)間點(diǎn)，Pb 組 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表達(dá)顯著高于（P < 0.05）對照組、Se 組和 Pb+Se組。在試驗(yàn)第 90 天的 iNOS 蛋白表達(dá)在對照組和 Se 組之間差異不顯著（P > 0.05）。在試驗(yàn)第 90 天，Pb+Se 組的 iNOS 蛋白表達(dá)顯著高于（P < 0.05）對照組和 Se 組。在試驗(yàn)第 90 天，Pb 組的 iNOS 蛋白表達(dá)顯著高于（P < 0.05）對照組、Se 組和 Pb+Se 組。對照組和 Se 組 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表達(dá)在試驗(yàn)的第 30 天、60 天和 90天之間差異不顯著（P > 0.05）。Pb+Se 組 NO 含量和 iNOS 活性在 90 天顯著高于（P < 0.05）30 天和 60 天。Pb+Se 組 iNOS mRNA 表達(dá)隨著時(shí)間增加而顯著增加(P < 0.05)。Pb 組的 NO含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表達(dá)隨著時(shí)間增加而顯著增加(P < 0.05)。


本文編號：3410802