日本血吸蟲病是流行廣泛、危害嚴重的人畜共患寄生蟲病。肺期童蟲體小且結(jié)構(gòu)簡單,是血吸蟲在終末宿主體內(nèi)發(fā)育的早期階段,和在移行過程中蟲體數(shù)量減少的最主要階段。因此,肺期童蟲被視作宿主免疫系統(tǒng)攻擊的重要靶標。1.日本血吸蟲3d肺期童蟲蛋白質(zhì)組分析利用非標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)比較分析了日本血吸蟲3 d童蟲與42 d成蟲的蛋白組成和表達差異,結(jié)果顯示3d蟲體上調(diào)差異表達蛋白194個、下調(diào)差異435個。選取C1LVH1、Q86E32等19個差異表達蛋白進行PRM驗證,結(jié)果與非標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果一致。GO分析顯示,差異表達蛋白主要參與大分子復(fù)合物組裝、ATP依賴性微管馬達的調(diào)節(jié)、ATP活性的正調(diào)節(jié)及ATP依賴性微管正調(diào)控等生物學(xué)過程。2.日本血吸蟲Prohibitin 1（SjPHB1）和Prohibitin 2（SjPHB2）的克隆表達及動物免疫保護效果評估利用PCR和RACE分別擴增獲得SjPHB1和SjPHB2的基因片段。序列分析表明,SjPHB1含825bp的ORF,編碼274個氨基酸,無信號肽和跨膜區(qū);SjPHB2含900bp的ORF,編碼299個氨基酸,無信號肽,具有1個跨膜結(jié)構(gòu)區(qū)。成功... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

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【學(xué)位級別】：碩士

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d肺期童蟲的觀察Figure2-1Observationof3dlung-stageschistosomula

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章日本血吸蟲3d肺期童蟲蛋白質(zhì)組學(xué)分析11圖2-13d肺期童蟲的觀察Figure2-1Observationof3dlung-stageschistosomula2.4.23d童蟲和42d成蟲蛋白PAGE比較和質(zhì)譜分析SDS-PAGE電泳（圖2-2）結(jié)果顯示3d童蟲和42d成蟲提取的蛋白樣品正常且兩組樣品間存在明顯差異。3d童蟲蛋白濃度為3.81μg/μL,42d成蟲蛋白濃度為8.10μg/μL，樣品可以滿足進行后續(xù)labelfree和PRM實驗的要求。利用Label-free非標記定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)共鑒定到3121個蛋白質(zhì)，鑒定到的肽段總數(shù)為16593，鑒定到的唯一肽段總數(shù)是14374個，對鑒定到蛋白質(zhì)進行篩選后，其中3d肺期童蟲蛋白有2102個，42d成蟲蛋白有3102個。圖2-2SDS-PAGE分析3d童蟲和42d成蟲蛋白Figure2-2SDS-PAGEanalysisofproteinsamplesof3dlung-stageschistosomulaand42dadultworms2.4.3篩選3d童蟲和42d成蟲差異表達蛋白3d童蟲與42d成蟲的差異表達蛋白質(zhì)總數(shù)為629個，其中上調(diào)差異表達蛋白有194個，下調(diào)差異表達蛋白有435個，見表2-3。特殊差異蛋白質(zhì)結(jié)果見表2-4，其中3d童蟲鑒定到

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章日本血吸蟲3d肺期童蟲蛋白質(zhì)組學(xué)分析12而42d成蟲未鑒定到的蛋白質(zhì)有19個，而42d成蟲鑒定到3d童蟲卻未鑒定到的蛋白有751個。比較組3dVS42d倍數(shù)差異表達蛋白質(zhì)篩選結(jié)果如圖2-3所示。表2-3各比較組差異表達蛋白質(zhì)數(shù)量Table2-3NumberofdifferentiallyexpressedproteinsineachcomparisongroupComparisonsUpDownAll3dVS42d194435629表2-43d與42d特殊差異蛋白質(zhì)分析結(jié)果統(tǒng)計Table2-4Specialstatisticaldifferencesinproteinanalysisresults類別蛋白質(zhì)數(shù)量3d+42d-193d-42d+751“+”表示在對應(yīng)的組中有鑒定到；“-”表示在對應(yīng)的組中沒有鑒定到圖2-3比較組3dVS42d火山圖Figure2-3Comparisonof3dvs42dvolcano2.4.43d童蟲和42d成蟲差異表達蛋白聚類分析采用層次聚類算法對3d童蟲和42d成蟲的差異表達蛋白質(zhì)采取聚類分析，數(shù)據(jù)采用熱圖(Heatmap)形式展示，如圖2-4表明。

【參考文獻】：
期刊論文
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[9]血吸蟲對吡喹酮抗藥性的研究 Ⅶ曼氏血吸蟲吡喹酮抗性株與敏感株某些生物學(xué)特性[J]. 梁幼生,戴建榮,朱蔭昌,李洪軍,徐明,司進,許永良,杭盤宇,G.C.Coles,M.J.Doenhoff.  中國血吸蟲病防治雜志. 2003(06)
[10]血吸蟲對吡喹酮抗藥性的研究 Ⅵ 吡喹酮對曼氏血吸蟲吡喹酮抗性株和敏感株蟲卵肉芽腫形成的影響[J]. 梁幼生,戴建榮,朱蔭昌,李洪軍,徐明,司進,許永良,杭盤宇,G.C.Coles,M.J.Doenhoff.  中國血吸蟲病防治雜志. 2003(05)



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