血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）被發(fā)現(xiàn)以來(lái),其病理生理功能,特別是作為SARS、COVID-19等冠狀病毒侵入細(xì)胞的功能性受體,顯示了巨大的潛能,明確其在不同物種的基因序列及結(jié)構(gòu)可為冠狀病毒感染機(jī)制研究提供依據(jù)。本研究以中國(guó)麻鴨為研究對(duì)象,利用RT-PCR和Western blot檢測(cè)ACE2在中國(guó)麻鴨各組織中的表達(dá),然后用PCR技術(shù),擴(kuò)增出中國(guó)麻鴨ACE2基因的完整ORF序列,再TA克隆至pMD-19T載體中進(jìn)行測(cè)序,對(duì)所得序列進(jìn)行生物信息學(xué)解析。結(jié)果證實(shí),ACE2在中國(guó)麻鴨心、肝、肺、腎等組織中均有表達(dá)�；蚩寺〗Y(jié)果顯示,該中國(guó)麻鴨ACE2基因的CDS序列全長(zhǎng)為2 435 bp,編碼805個(gè)氨基酸殘基,與人ACE2核苷酸序列和氨基酸序列同源性分別為66.2%和66.4%,且處在不同進(jìn)化樹(shù)分支上。通過(guò)對(duì)與SARS病毒S蛋白結(jié)合有關(guān)的18個(gè)關(guān)鍵氨基酸殘基分析發(fā)現(xiàn),中國(guó)麻鴨除第330和353位氨基酸外,其余均與人不相同。結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),中國(guó)麻鴨ACE2為Ⅰ型跨膜蛋白,有多處N-糖基化位點(diǎn)。研究首次獲得中國(guó)麻鴨ACE2基因的完整ORF序列及相關(guān)基礎(chǔ)資料,所得序列已上傳GenBank并被成功收錄... 

【文章來(lái)源】：畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,51(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

中國(guó)麻鴨ACE2基因CDS區(qū)和編碼氨基酸序列

采用RT-PCR檢測(cè)ACE2基因在中國(guó)麻鴨體內(nèi)各組織的分布,檢測(cè)結(jié)果如圖1A。由圖1A可知,在中國(guó)麻鴨心、肝、肺、腎組織中均有ACE2基因的單一條帶(泳道1、2、3、4),條帶大小為395 bp左右,與預(yù)期(395 bp)一致。取檢測(cè)到ACE2基因分布的心、肝、肺、腎組織進(jìn)行Western blot,由試驗(yàn)結(jié)果(圖1B)可知,在這些組織中有ACE2蛋白表達(dá),說(shuō)明ACE2在中國(guó)麻鴨體內(nèi)存在并有蛋白表達(dá)。2.2 中國(guó)麻鴨ACE2目的基因PCR擴(kuò)增

酶切驗(yàn)證結(jié)果如圖3B所示。HindⅢ單酶切后發(fā)現(xiàn)有1條5 127 bp左右的條帶(泳道2和5),大小與pMD-19T載體(2 692 bp)和目的基因(2 435 bp) 總和一致。因此本研究成功克隆了中國(guó)麻鴨ACE2基因的CDS序列。2.4 中國(guó)鴨ACE2基因陽(yáng)性質(zhì)粒測(cè)序

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3394017