發(fā)布時(shí)間：2021-09-09 17:32

　　犬是藥物安全性評價(jià)常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之一,控制與評價(jià)實(shí)驗(yàn)犬的質(zhì)量,對保證臨床前藥物安全性評價(jià)十分重要。犬瘟熱（Canine distemper,CD）作為危害實(shí)驗(yàn)犬的一種疾病,其致病源犬瘟熱病毒（Canine distemper virus,CDV）一直是實(shí)驗(yàn)犬必須控制的一項(xiàng)指標(biāo)。目前主要采用注射疫苗等免疫學(xué)方法控制。由于疫苗質(zhì)量、免疫程序、動(dòng)物個(gè)體差異、以及檢測時(shí)機(jī)的問題,往往會(huì)出現(xiàn)免疫后抗體效價(jià)降低、全體免疫不合格等問題。而且,目前國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的血清學(xué)方法,檢測出的是血清抗體,并不是針對抵抗病毒感染的中和抗體。因而,對實(shí)驗(yàn)犬質(zhì)量的評價(jià)存在一定問題。CDV中和抗體的檢測方法主要有CDV中和實(shí)驗(yàn),間接免疫酶染色法、ELISA檢測方法等。目前CDV中和抗體的檢測方法存在著一些弊端,例如結(jié)果的判定一般是通過觀察,而未能量化;操作過程繁雜,周期較長;結(jié)果不易判斷,容易誤判;CDV對理化因素敏感,難以通過常規(guī)病毒純化的方法獲得包被抗原。為此,本研究建立了犬瘟熱的假病毒系統(tǒng),病毒顆粒高度模擬原病毒,生物安全高,為CD的病毒學(xué)研究及其疫苗效力評價(jià)等提供了新的方法。本研究首先構(gòu)建具有不同長度胞質(zhì)區(qū)的H、... 

【文章來源】：中國食品藥品檢定研究院北京市

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同胞質(zhì)區(qū)長度的H、F基因擴(kuò)增結(jié)果

圖 3 SDS-PAGE 鑒定含 CDV 不同胞質(zhì)區(qū)長度的 F、H 重組蛋同胞質(zhì)區(qū)長度的糖蛋白 H 電泳結(jié)果，其中野生型 H 蛋白大小為長度的糖蛋白 F 電泳后裂解為 F1 類片段的電泳結(jié)果，其中野生 F1 大小為 40 kDa；3：表示不同胞質(zhì)區(qū)長度的糖蛋白 F 電泳后野生型糖蛋白 F 基因的裂解片段 F2 大小為 23 kDa）病毒包裝體系的優(yōu)化質(zhì)粒的選擇、膜蛋白基因的修飾和骨架質(zhì)粒、囊膜質(zhì)粒共時(shí)間四個(gè)方面優(yōu)化包裝系統(tǒng)，最終達(dá)到假病毒的最高滴與 F 30 的組合有效的抑制了細(xì)胞融合，提高假示，表達(dá)麻疹病毒糖蛋白 H 和 F 的細(xì)胞會(huì)發(fā)生融合現(xiàn)象染初始 T 細(xì)胞的慢病毒轉(zhuǎn)染體系通過改變糖蛋白 H 和 細(xì)胞融合的現(xiàn)象[48]。而在本研究中，以 H 和 F 為囊膜蛋

24/F 20 、 H 24/F 24 、 H 24/F 26 、 H 24/F 30 ； 26/F 20 、 H 26/F 24 、 H 26/F 26 、 H 26/F 30 、 30/F 20、H 30/F 24、H 30/F 26、H 30/F 30）包被。研究發(fā)現(xiàn)，以 H 和 F 30 組合為囊膜糖蛋白包被出的犬以確定了以 H 和 F 30 為最佳組合，結(jié)果見圖 4。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]犬瘟熱免疫預(yù)防研究進(jìn)展[J]. 孔慶波.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2007(06)
[4]狐貉犬瘟熱、細(xì)小病毒性腸炎和腦(肝)炎流行病學(xué)調(diào)查[J]. 叢麗,閆新華,閆喜軍,吳威.  特產(chǎn)研究. 2000(02)
[5]犬實(shí)驗(yàn)感染CDV的病理學(xué)研究[J]. 遇秀玲,田克恭,吳娜,隋麗華,李俊梅,劉永梅,渠川玫.  中國畜禽傳染病. 1998(02)
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[7]犬瘟熱病毒野毒株融合蛋白主要功能區(qū)基因的變異研究[J]. 李金中,夏咸柱,殷震,李佑民,涂長春,金寧一.  中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1996(06)

碩士論文
[1]犬瘟熱病毒核蛋白基因的原核表達(dá)及檢測CDV抗體間接ELISA方法的建立[D]. 王琛.吉林大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3392499