目的：本實(shí)驗(yàn)以豬為研究對(duì)象設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),為進(jìn)一步研究豬紅細(xì)胞免疫功能,我們從分子水平上克隆豬CRl-like基因序列,并且分析該基因的特征。方法：運(yùn)用RT-PCR （Reverse transcription-polymerase chain reaction）和RACE （Rapid-amplification of cDNA ends）技術(shù)克隆豬CR1-like基因全長(zhǎng)cDNA,運(yùn)用普通PCR克隆豬CR1-like基因的啟動(dòng)子區(qū)域,結(jié)合生物信息學(xué)方法分析克隆的序列。結(jié)果：豬CR1-like基因全長(zhǎng)cDNA為4391bp,包含3996bp的ORF（Open reading frame）,37bp的5’UTR （Untranslated regions）和358bp的3’UTR,該基因位于豬第九號(hào)染色體；通過(guò)對(duì)豬全血基因組DNA的PCR擴(kuò)增,得到了4872bp的豬CR1-like基因的富含轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的啟動(dòng)子區(qū)域序列。此外,生物信息學(xué)分析表明：預(yù)測(cè)豬的CR1-like蛋白分子質(zhì)量為146.6kD,理論等電點(diǎn)為7.95；該蛋白共編碼1331個(gè)氨基酸,由包含19個(gè)SCR （Short co... 

【文章來(lái)源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１人Ａ型Ｅ－Ｃ民１示意圖：Ｓｉｔｅｌ所示ｓｃ民位置（ＳＣＲｓ?１－３）結(jié)合Ｃ４ｂ，?Ｓｉｔｅ２所示ＳＣＲ位置（ＳＣＲｓ??８－１０、１５－１７）結(jié)合Ｃ３ｂ／Ｃ４ｂ；?ＳＣ民２５血

ｃｏｍｐｅｍｅｎａｒｙ，為１組，其內(nèi)部序列具有高度的同源性，因此形成了?４個(gè)長(zhǎng)同源重復(fù)序列（Ｌｏｎｇ??ｏｕｓ?ｒｅｐｅａｔ，?ＬＨＲ），僅ＳＣＲ?２９與ＳＣＲ?３０不是ＬＨＲ的組成部分，從Ｎ端巧始，??為ＬＨＲ－Ａ，ＬＨＲ－Ｂ，ＬＨＲ－Ｃ，ＬＨＲ－Ｄ，ＬＨＲ是ＣＲ１的獨(dú)特標(biāo)志［１〇］。相關(guān)試驗(yàn)??ＬＨＲ－Ａ中有一個(gè)Ｃ４ｂ結(jié)合位點(diǎn)并具有補(bǔ)體轉(zhuǎn)化酶衰變加速活性，ＬＨ民－Ｂ和??有一個(gè)Ｃ３ｂ／Ｃ４ｂ結(jié)合位點(diǎn)并具有因子Ｉ輔助因子活性，該試驗(yàn)中利用點(diǎn)巧變研??證實(shí)了?Ｃ３ｂ的結(jié)合位晉在ＳＣＲＳ８－１０和１５－１７，Ｃ４ｂ的結(jié)合位賈在ＳＣＲ１－３［Ｗ??ＬＨ民－Ｄ有ＭＢＬ［口］（Ｍａｎｎａｎ－ｂｉｎｇｄｉｎｇ?ｌｅｃｔｉｎ）和?Ｃｌｑ［＂喃結(jié)合位點(diǎn)，并且在?ＳＣ民－２５??（Ｓｗａｉｎ－ｌａｎｇｌｅｙ）和ＭｃＣ?（ＭｃＣｏｙ）的結(jié)合位點(diǎn)［Ｗ。在Ａ型Ｅ－ＣＲ１中，由７個(gè)??序列分隔形成的ＳＣＲ彼此具有同源性（例如ＳＣＲ?３、１０及１７），僅Ｎ－端的ＳＣ民???２是例外的，這種同源性模式在ＳＣ民１８和ＳＣＲ?２８之后略有變化。因此，在??８?Ｗ及ＳＣＲｓｌ９－２８的堿基序列內(nèi)，每對(duì)由７個(gè)重復(fù)序列間隔形成的ＳＣ艮之間存??上的同源性（例如ＳＣ民Ｓ３－９和ＳＣ民ｓｌＯ－１６，?ＳＣＲｓｌＯ－１１和ＳＣＲＳ１７－１８之間的同??９９〇／〇）。正是Ｗ上所化的ＳＣＲ特征的存在，導(dǎo)致ＣＲ１各個(gè)ＬＨ民之間同源性為??不等［１５３。??＾?ＵｉＨ?Ａ?＂?ＬＨＲＢ?■【?ＬＨＲＣ?■?，?ＬＨＲ?Ｄ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]紅細(xì)胞免疫分子、T細(xì)胞亞群水平及相關(guān)基因單核苷酸多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肝細(xì)胞癌的關(guān)聯(lián)研究[D]. 胡金川.中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院 2009

碩士論文
[1]不同發(fā)育階段WHBE兔紅細(xì)胞免疫特性研究[D]. 潘永明.浙江大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3392207