發(fā)布時間：2021-09-09 09:41

　　奶牛乳房炎是奶牛養(yǎng)殖中常見的多發(fā)性疾病，是造成奶牛養(yǎng)殖業(yè)嚴重經(jīng)濟損失的疾病之一，同時危害人類健康和公共衛(wèi)生，金黃色葡萄球菌是其主要病原之一。防治上由于藥物殘留和細菌耐藥性的不斷增強和蔓延，疫苗被認為是最有效的手段。黏附素存在金黃色葡萄球菌表面，是一類識別并特異性結(jié)合細胞和組織特殊結(jié)構(gòu)及相關(guān)蛋白，莢膜多糖是細菌在宿主及環(huán)境生存的重要表面結(jié)構(gòu)，與載體蛋白結(jié)合可轉(zhuǎn)變?yōu)門細胞依賴性抗原。纖黏蛋白（FnBP）和纖黏蛋白原凝集素A（ClfA）存在于幾乎所有的金黃色葡萄球菌，ClfA的黏附作用位于其蛋白的A區(qū)域（221～550aa）內(nèi)，5型莢膜多糖是臨床分離的主要血清型。本研究以ClfAA、FnBPA及CP5為研究對象，旨在開展金黃色葡萄球菌亞單位疫苗的研制。目的：奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌亞單位疫苗的構(gòu)建方法：采用PCR技術(shù)對引起奶牛乳腺炎的金黃色葡萄球菌分離株SHZ1的ClfAA和FnBPA基因進行擴增，利用載體pMD19-T分別構(gòu)建克隆質(zhì)粒，再運用酶切技術(shù)成功構(gòu)建雙基因表達質(zhì)粒pET-32a（+）-ClfAA-FnBPA。用不同濃度的IPTG進行4h誘導，過Ni柱使蛋白得到進一步純化；莢膜多糖提... 

【文章來源】：石河子大學新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
導師評閱表
摘要
Abstract
英文縮略表
引言
第一章 文獻綜述 奶牛乳房炎研究進展
    1 奶牛乳房炎診斷與防治
        1.1 奶牛乳房炎危害
        1.2 奶牛乳房炎分類
        1.3 奶牛乳房炎的病因
        1.4 奶牛乳房炎診斷
        1.5 奶牛乳房炎的防治
    2 致奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌
        2.1 金黃色葡萄球菌生物學特性
        2.2 金黃色葡萄球菌致病性
        2.3 黃色葡萄球菌疫苗研究
        2.4 黃色葡萄球菌莢膜多糖的提純
        2.5 蛋白質(zhì)-多糖偶聯(lián)方法研究
第二章 實驗研究
    實驗一 金黃色葡萄球菌 CLFAA、FNBPA 基因的克隆與串聯(lián)表達
        摘要
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
    實驗二 5 型莢膜多糖的提取純化及生物學特性研究
        摘要
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
    實驗三 CLFA A-FNBPA 與 CP5 偶聯(lián)抗原的制備及生物學特性分析
        摘要
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
結(jié)論
創(chuàng)新點
全文參考文獻
附錄
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]奶牛乳房炎的危害及其防治措施[J]. 米耀榮,郭生泉,張勇,徐啟華,馬啟才,劉建鵬,竇鵬勛.  畜牧與飼料科學. 2009(10)
[2]多糖的研究開發(fā)中值得注意的一些問題[J]. 方積年,丁侃.  食品與藥品. 2007(12)
[3]多重PCR檢測奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌和酵母菌方法的建立與應(yīng)用[J]. 馬保臣,秦卓明,蔡玉梅,董玉蘭,柴同杰.  畜牧獸醫(yī)學報. 2006(11)
[4]奶牛乳腺炎防治研究進展[J]. 李英俊,藏麗,郭順元,張乃生,韋旭斌.  中國奶牛. 2006(03)
[5]奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌TH-16S 733330株莢膜多糖免疫原性研究[J]. 馬文戈,李建軍,喻昌盛,徐志光.  中國獸藥雜志. 2006(02)
[6]奶牛乳腺炎的細菌學研究[J]. 馬保臣,牛家華,高玉君,秦卓明,柴同杰,李建基,王春璈.  家畜生態(tài)學報. 2005(06)
[7]奶牛金黃色葡萄球菌乳房炎菌苗佐劑研究現(xiàn)狀[J]. 林鋒強,胡松華,胡奇林,陳少鶯.  動物醫(yī)學進展. 2004(06)
[8]克侖特羅偶聯(lián)物的鑒定[J]. 谷峰,薛飛群,張麗芳.  中國獸藥雜志. 2004(03)
[9]奶牛乳腺炎研究進展[J]. 劉佩紅,黃忠,李維功,徐鋒.  上海畜牧獸醫(yī)通訊. 2003(06)
[10]奶牛乳房炎的病因分析[J]. 聶愛琴,鄭明學,古少鵬,韓克光.  科技情報開發(fā)與經(jīng)濟. 2003(03)

博士論文
[1]以肺炎球菌溶血素為載體的中耳炎肺炎球菌結(jié)合疫苗的制備及免疫原性研究[D]. 陳澤宇.復(fù)旦大學 2007

碩士論文
[1]金黃色葡萄球菌血清5型莢膜多糖的提取純化及鑒定[D]. 劉慶濤.吉林大學 2007



本文編號：3391867