副豬嗜血桿菌病是一種由副豬嗜血桿菌引起的以致病豬發(fā)生咳嗽、呼吸困難、跛行等癥狀為主的一類呼吸道疾病,隨著養(yǎng)豬業(yè)規(guī)模的擴大,副豬嗜血桿菌病已經(jīng)嚴重危害到養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。蛋白酶激活受體2（proteinase-activated receptor-2, PAR-2）是G蛋白偶聯(lián)受體家族成員之一,在生物體的多個組織器官都有表達,尤其是容易發(fā)生變態(tài)反應的組織如呼吸道組織、胃腸道組織等,PAR-2激活后可以刺激細胞分泌多種炎性介質(zhì)和細胞因子,參與多種生理病理反應過程,并發(fā)揮調(diào)控作用。目前關于PAR-2的研究大多是采用人和大鼠的疾病模型,在豬尤其是自然感染病原的致病豬方面的研究還不多,本實驗通過（疑似感染副豬嗜血桿菌的病豬）采集病豬呼吸道組織,進行細菌革蘭氏染色及PCR鑒定確診感染病原為副豬嗜血桿菌,HE染色觀察病豬呼吸道的病理變化,免疫組織化學和實時熒光定量檢測PCR-2在病豬呼吸道的定位與表達變化,從而研究副豬嗜血桿菌致病豬呼吸道蛋白酶激活受體2的分布、表達及意義。結(jié)果分析顯示：（1）通過鑒定,確定所感染的病原為副豬嗜血桿菌。（2）HE染色觀察致病豬：部分氣道粘膜上皮細胞變性、脫落并且氣道的完整... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞匯表
第一部分 文獻綜述
    1 蛋白酶激活受體研究進展
        1.1 概述
        1.2 蛋白酶激活受體2研究概述
            1.2.1 結(jié)構及激活方式
            1.2.2 蛋白酶激活受體2的分布及生物學意義
    2 副豬嗜血桿菌病概述
        2.1 概述
        2.2 副豬嗜血桿菌病的診斷
        2.3 副豬嗜血桿菌病的免疫及藥物防治
    3 免疫組織化學技術在科學研究中的應用
第二部分 實驗部分
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑及耗材
        1.3 其他試劑及耗材
        1.4 主要溶液的配制
        1.5 主要儀器設備
    2 試驗方法
        2.1 取材
        2.2 副豬嗜血桿菌的鑒定
            2.2.1 細菌的革蘭氏染色
            2.2.2 細菌的PCR鑒定
        2.3 病理組織學觀察
            2.3.1 組織蠟塊制作
            2.3.2 組織切片制作
            2.3.3 HE染色
            2.3.4 免疫組織化學檢測
            2.3.5 觀察與拍照
        2.4 基因水平的表達研究
            2.4.1 總RNA的提取
            2.4.2 總RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應
            2.4.3 熒光定量PCR反應
    3 實驗結(jié)果
        3.1 副豬嗜血桿菌病的病理學觀察
        3.2 副豬嗜血桿菌的鑒定
            3.2.1 革蘭氏染色
            3.2.2 細菌的PCR鑒定
        3.3 副豬嗜血桿菌致病豬呼吸道的病理組織學結(jié)果觀察
            3.3.1 HE染色
            3.3.2 免疫組織化學染色結(jié)果
        3.4 基因表達水平結(jié)果
            3.4.1 總RNA提取
            3.4.2 PAR-2的RT-PCR擴增
            3.4.3 熒光定量檢測結(jié)果
第三部分 討論與小結(jié)
    1 討論
        1.1 副豬嗜血桿菌與呼吸道疾病
        1.2 PAR-2在呼吸道的定位分析
        1.3 PAR-2在呼吸道中的作用
        1.4 實驗技術方法的討論
    2 小結(jié)
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]副豬嗜血桿菌病的危害與防治[J]. 蔡旭旺,陳煥春,吳斌,劉正飛.  養(yǎng)殖與飼料. 2003(05)

博士論文
[1]蛋白酶激活受體2在早期斷奶仔豬胃腸黏膜屏障中作用研究[D]. 裴小英.華中農(nóng)業(yè)大學 2010
[2]副豬嗜血桿菌的分離鑒定及診斷方法與滅活疫苗的研究[D]. 蔡旭旺.華中農(nóng)業(yè)大學 2006
[3]蛋白酶激活受體2活化對呼吸和循環(huán)功能的影響[D]. 蘇梟.復旦大學 2004

碩士論文
[1]豬氣管上皮細胞的永生化及副豬嗜血桿菌對其黏附能力的研究[D]. 王津津.西北農(nóng)林科技大學 2010



本文編號：3390247