【目的】研究副豬嗜血桿菌脂寡糖合成相關(guān)基因lpxM對其生長、生物被膜形成能力、抗50%豬血清殺菌能力、對巨噬細(xì)胞毒力和抗生素敏感性部分生物特性的影響,為揭示HPS致病機(jī)制,lpxM基因缺失疫苗的構(gòu)建奠定理論基礎(chǔ),為豬場防治HPS進(jìn)行藥物選擇時提供依據(jù)�！痉椒ā恳愿咧虏⌒匝�5型HPS地方分離株H45為研究對象,自殺性質(zhì)粒PK18mobsacB為載體,通過自然轉(zhuǎn)化法將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)進(jìn)H45,使其在抗生素的壓力下發(fā)生同源重組,最終經(jīng)過抗生素篩選并通過PCR和測序驗證得到lpxM基因缺失株H45-△lpxM,比較兩者之間部分生物學(xué)特性的差異。測定兩者的OD₆₀₀-t關(guān)系曲線比較生長情況;用結(jié)晶紫染色法比較兩者在培養(yǎng)24h后生物被膜形成的能力;測定兩者在50%豬血清中存活率,比較兩者的抗血清補(bǔ)體殺菌能力;將兩者同時刺激小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞,作用時間為6、12和24h,檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH的釋放量,比較兩者對巨噬細(xì)胞毒力影響;利用K-B紙片擴(kuò)散法研究兩者對氨芐西林等臨床上常用13種抗生素和多粘菌素B抗生素敏感性,通過測定抑菌圈直徑來并參照耐藥標(biāo)準(zhǔn)判... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,53(16)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒PKM-UKD雙酶切鑒定

生物被膜OD630值

血清存活能力


本文編號：3379993