近年來(lái)在逆轉(zhuǎn)錄病毒研究中發(fā)現(xiàn)的一些細(xì)胞內(nèi)分子,包括Trim5a、Tetherin、 SAMHDI和APOBEC3等,均扮演對(duì)病毒感染的天然免疫限制角色,被稱為天然免疫限制因子。這些限制因子通過(guò)不同的機(jī)制抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)的有效復(fù)制：TRIM5a能損傷病毒DNA合成和限制病毒脫衣殼；Tetherin可以限制病毒的出芽和釋放；SAMHDI影響病毒DNA合成原料限制了病毒的復(fù)制；APOBEC3通過(guò)對(duì)病毒cDNA進(jìn)行超突變來(lái)影響病毒的復(fù)制。而作為應(yīng)對(duì)的策略,病毒也會(huì)進(jìn)化出相應(yīng)機(jī)制對(duì)這種天然的限制進(jìn)行拮抗。病毒與限制因子間相互作用機(jī)制的研究,對(duì)于深入了解慢病毒感染機(jī)理和研發(fā)抗慢病毒藥物有重要意義。馬傳染貧血病毒（equine infectious anemia virus, EIAV）是馬屬動(dòng)物感染的慢病毒,是用于慢病毒研究的重要病毒模型。而在馬屬動(dòng)物限制因子研究方面,多種馬屬動(dòng)物限制因子逐漸被發(fā)現(xiàn),并被證實(shí)具有限制EIAV復(fù)制的功能。本研究關(guān)注APOBEC3分子與EIAV間的相互作用機(jī)制,重點(diǎn)探討我們克隆獲得的一種馬APOBEC3新突變體與EIAV之間的相互作用。首先克隆獲得五種馬APOBEC3... 

【文章來(lái)源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 課題背景
    1.2 文獻(xiàn)綜述
        1.2.1 逆轉(zhuǎn)錄病毒進(jìn)化
        1.2.2 EIAV基因組結(jié)構(gòu)及病毒蛋白功能
        1.2.3 APOBEC3概述
    1.3 本研究的主要內(nèi)容及意義
2 馬APOBEC3分子與EIAV Rev蛋白的相互作用
    2.1 材料
        2.1.1 病毒和細(xì)胞
        2.1.2 質(zhì)粒和菌株
        2.1.3 引物
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 RNA的提取及其反轉(zhuǎn)錄
        2.2.2 馬APOBEC3和EIAV Rev真核表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.3 EIAV假病毒系統(tǒng)的構(gòu)建
        2.2.4 馬APOBEC3抗EIAV活性檢測(cè)
        2.2.5 EIAV Gag剪切以及釋放的Western Blot檢測(cè)
        2.2.6 EIAV Gag與Rev細(xì)胞內(nèi)定位的激光共聚焦檢測(cè)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 基因克隆鑒定
        2.3.2 馬APOBEC3分子對(duì)EIAV的限制作用
        2.3.3 馬A3Z3V2分子對(duì)Gag加工的限制作用
        2.3.4 EIAV完整型和截短型Rev功能不同
        2.3.5 完整型Rev對(duì)抗馬A3Z3V2分子
        2.3.6 完整型Rev N端基序的重要性
        2.3.7 馬A3Z3分子56位丙氨酸決定其對(duì)截短型Rev的限制作用
        2.3.8 Rev/RRE、Gag和eqA3Z3V2三者之間相互作用模式
    2.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號(hào)：3373960