發(fā)布時間：2021-08-31 02:08

　　近年來在逆轉錄病毒研究中發(fā)現(xiàn)的一些細胞內分子,包括Trim5a、Tetherin、 SAMHDI和APOBEC3等,均扮演對病毒感染的天然免疫限制角色,被稱為天然免疫限制因子。這些限制因子通過不同的機制抑制病毒在細胞內的有效復制：TRIM5a能損傷病毒DNA合成和限制病毒脫衣殼；Tetherin可以限制病毒的出芽和釋放；SAMHDI影響病毒DNA合成原料限制了病毒的復制；APOBEC3通過對病毒cDNA進行超突變來影響病毒的復制。而作為應對的策略,病毒也會進化出相應機制對這種天然的限制進行拮抗。病毒與限制因子間相互作用機制的研究,對于深入了解慢病毒感染機理和研發(fā)抗慢病毒藥物有重要意義。馬傳染貧血病毒（equine infectious anemia virus, EIAV）是馬屬動物感染的慢病毒,是用于慢病毒研究的重要病毒模型。而在馬屬動物限制因子研究方面,多種馬屬動物限制因子逐漸被發(fā)現(xiàn),并被證實具有限制EIAV復制的功能。本研究關注APOBEC3分子與EIAV間的相互作用機制,重點探討我們克隆獲得的一種馬APOBEC3新突變體與EIAV之間的相互作用。首先克隆獲得五種馬APOBEC3... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 課題背景
    1.2 文獻綜述
        1.2.1 逆轉錄病毒進化
        1.2.2 EIAV基因組結構及病毒蛋白功能
        1.2.3 APOBEC3概述
    1.3 本研究的主要內容及意義
2 馬APOBEC3分子與EIAV Rev蛋白的相互作用
    2.1 材料
        2.1.1 病毒和細胞
        2.1.2 質粒和菌株
        2.1.3 引物
        2.1.4 主要試劑
        2.1.5 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 RNA的提取及其反轉錄
        2.2.2 馬APOBEC3和EIAV Rev真核表達載體的構建
        2.2.3 EIAV假病毒系統(tǒng)的構建
        2.2.4 馬APOBEC3抗EIAV活性檢測
        2.2.5 EIAV Gag剪切以及釋放的Western Blot檢測
        2.2.6 EIAV Gag與Rev細胞內定位的激光共聚焦檢測
    2.3 實驗結果
        2.3.1 基因克隆鑒定
        2.3.2 馬APOBEC3分子對EIAV的限制作用
        2.3.3 馬A3Z3V2分子對Gag加工的限制作用
        2.3.4 EIAV完整型和截短型Rev功能不同
        2.3.5 完整型Rev對抗馬A3Z3V2分子
        2.3.6 完整型Rev N端基序的重要性
        2.3.7 馬A3Z3分子56位丙氨酸決定其對截短型Rev的限制作用
        2.3.8 Rev/RRE、Gag和eqA3Z3V2三者之間相互作用模式
    2.4 討論
結論
參考文獻
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝



本文編號：3373960