豬萎縮性鼻炎基因重組疫苗的比較研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-29 17:23
豬傳染性萎縮性鼻炎(Swine infectious atrophic rhinitis, AR)是一種豬的主要呼吸道傳染病,主要由D型產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌(Toxigenic Pasteurella multocida, T+Pm)和支氣管敗血波氏桿菌(Bordetella bronchiseptica, Bb)單獨(dú)或共同感染引起,可造成豬的慢性鼻炎、鼻甲骨萎縮甚至消失,降低豬只生產(chǎn)性能,嚴(yán)重者甚至死亡,給養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。Bb的絲狀血凝素FHA和百日咳桿菌粘附素PRN被認(rèn)為是該菌重要的粘附因子和抗原成分;而T+Pm toxA基因編碼的皮膚壞死毒素(DNT)是其主要致病毒力因子,研究表明ToxA基因C端和N端編碼的氨基酸結(jié)構(gòu)分別是DNT的催化位點(diǎn)和粘附位點(diǎn),兩者都具有良好的免疫原性。本實(shí)驗(yàn)室分別以減毒沙門氏菌和減毒波氏桿菌為載體,已構(gòu)建了表達(dá)支氣管敗血波氏桿菌FHA和PRN融合基因的重組沙門氏菌C501(PYA-F1P2).表達(dá)多殺性巴氏桿菌toxA基因的重組沙門氏菌C501(PYA-toxA)、分別表達(dá)多殺性巴氏桿菌toxA基因C端和N端的重組支氣管敗血波氏桿菌QH081...
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表(Abbreviation)
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 豬萎縮性鼻炎
1.1.1 病原學(xué)
1.1.2 流行病學(xué)
1.1.3 綜合防控
1.2 產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌主要毒力因子的研究進(jìn)展
1.2.1 PMT毒素的特性研究
1.2.2 PMT毒素的免疫原性片段研究
1.3 支氣管敗血波氏桿菌主要毒力因子研究進(jìn)展
1.3.1 毒力因子的特性研究
1.3.2 Bb免疫原性片段研究
1.4 豬萎縮性鼻炎疫苗研究進(jìn)展
1.4.1 滅活苗
1.4.2 弱毒苗、亞單位疫苗與基因工程苗
2 研究目的與意義
3 材料與方法
3.1 材料
3.1.1 菌株
3.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
3.1.3 酶和試劑
3.1.4 主要培養(yǎng)基及其配制
3.1.5 緩沖液及試劑配制
3.1.6 引物
3.2 方法
3.2.1 疫苗的制備
3.2.2 抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立
3.2.3 仔豬Bb和T~+Pm母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定
3.2.4 重組疫苗的安全性測(cè)定
3.2.5 重組疫苗菌株最佳免疫劑量的測(cè)定
3.2.6 重組疫苗間及與其它疫苗的免疫效果對(duì)比
4 結(jié)果與分析
4.1 疫苗的制備
4.1.1 重組疫苗菌株的鑒定
4.1.2 重組疫苗凍干條件的優(yōu)化
4.1.3 疫苗的制備
4.2 T~+Pm、Bb抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立
4.3 試驗(yàn)豬場(chǎng)仔豬免疫方案和母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律研究
4.4 重組疫苗對(duì)豬的安全性
4.4.1 重組疫苗對(duì)仔豬的安全性
4.4.2 重組疫苗對(duì)環(huán)境的安全性
4.5 重組疫苗對(duì)仔豬的最佳免疫劑量
4.5.1 斷奶仔豬的抗體水平檢測(cè)結(jié)果
4.5.2 免疫豬只健康狀況及體溫監(jiān)測(cè)
4.6 重組疫苗間及與其它疫苗的效果對(duì)比試驗(yàn)
4.6.1 不同疫苗對(duì)仔豬的免疫效力
4.6.2 仔豬免疫后觀察情況
4.6.3 仔豬生長(zhǎng)情況
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]廣東地區(qū)豬傳染性萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查[J]. 白挨泉,劉為民,徐蘇標(biāo),袁沖,王曉清. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(06)
[2]國(guó)內(nèi)獸用凍干疫苗的發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 鄧彥莉,李艷華,陳儉清. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2011(03)
[3]氟苯尼考對(duì)豬傳染性萎縮性鼻炎治療效果觀察[J]. 楊淵,和萬本,和本勤,和冠. 云南畜牧獸醫(yī). 2010(02)
[4]重組產(chǎn)毒多殺性巴氏桿菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物學(xué)活性及免疫原性[J]. 湯細(xì)彪,吳斌,趙戰(zhàn)勤,鄧永,何華,何啟蓋,陳煥春. 微生物學(xué)報(bào). 2008(02)
[5]豬萎縮性鼻炎的防治對(duì)策[J]. 范玉霞. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2006(05)
[6]豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 唐先春,吳斌,索緒峰,王大林,陳煥春,尹爭(zhēng)艷. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(06)
[7]豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及毒素檢測(cè)[J]. 索緒峰,王建新,姚德標(biāo),王大林,張嗣華,李碧思,王美燕. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2005(06)
[8]多重PCR在豬傳染性萎縮性鼻炎診斷中的應(yīng)用[J]. 魯承,金鑫,楊詠潔. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2003(12)
[9]中草藥防治豬傳染性萎縮性鼻炎[J]. 黃平. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2001(06)
[10]我國(guó)部分地區(qū)豬傳染性萎縮性鼻炎病原的調(diào)查[J]. 齊鐵英,張亞華,苑士祥,楊留戰(zhàn),張樹成,楊旭夫,劉杰. 中國(guó)獸醫(yī)科技. 1995(04)
博士論文
[1]支氣管敗血波氏桿菌的重組沙門氏菌基因工程疫苗研究[D]. 趙戰(zhàn)勤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]湖北規(guī);i場(chǎng)豬萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查與凈化研究[D]. 余騰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]豬多殺性巴氏桿菌分離鑒定及其PMT毒素免疫原性研究[D]. 張軍虎.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌重組沙門氏菌基因工程疫苗的研究[D]. 段龍川.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]多殺性巴氏桿菌毒素單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D]. 盧順.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[5]廣西豬萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查及豬多殺性巴氏桿菌OMPH基因的克隆與序列分析[D]. 鐘勤.廣西大學(xué) 2007
[6]貴州省豬萎縮性鼻炎病原的分離與鑒定[D]. 徐景峨.貴州大學(xué) 2007
[7]豬傳染性萎縮性鼻炎綜合防制的研究[D]. 申剛.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
本文編號(hào):3371064
【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略詞表(Abbreviation)
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 豬萎縮性鼻炎
1.1.1 病原學(xué)
1.1.2 流行病學(xué)
1.1.3 綜合防控
1.2 產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌主要毒力因子的研究進(jìn)展
1.2.1 PMT毒素的特性研究
1.2.2 PMT毒素的免疫原性片段研究
1.3 支氣管敗血波氏桿菌主要毒力因子研究進(jìn)展
1.3.1 毒力因子的特性研究
1.3.2 Bb免疫原性片段研究
1.4 豬萎縮性鼻炎疫苗研究進(jìn)展
1.4.1 滅活苗
1.4.2 弱毒苗、亞單位疫苗與基因工程苗
2 研究目的與意義
3 材料與方法
3.1 材料
3.1.1 菌株
3.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
3.1.3 酶和試劑
3.1.4 主要培養(yǎng)基及其配制
3.1.5 緩沖液及試劑配制
3.1.6 引物
3.2 方法
3.2.1 疫苗的制備
3.2.2 抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立
3.2.3 仔豬Bb和T~+Pm母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律的測(cè)定
3.2.4 重組疫苗的安全性測(cè)定
3.2.5 重組疫苗菌株最佳免疫劑量的測(cè)定
3.2.6 重組疫苗間及與其它疫苗的免疫效果對(duì)比
4 結(jié)果與分析
4.1 疫苗的制備
4.1.1 重組疫苗菌株的鑒定
4.1.2 重組疫苗凍干條件的優(yōu)化
4.1.3 疫苗的制備
4.2 T~+Pm、Bb抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立
4.3 試驗(yàn)豬場(chǎng)仔豬免疫方案和母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律研究
4.4 重組疫苗對(duì)豬的安全性
4.4.1 重組疫苗對(duì)仔豬的安全性
4.4.2 重組疫苗對(duì)環(huán)境的安全性
4.5 重組疫苗對(duì)仔豬的最佳免疫劑量
4.5.1 斷奶仔豬的抗體水平檢測(cè)結(jié)果
4.5.2 免疫豬只健康狀況及體溫監(jiān)測(cè)
4.6 重組疫苗間及與其它疫苗的效果對(duì)比試驗(yàn)
4.6.1 不同疫苗對(duì)仔豬的免疫效力
4.6.2 仔豬免疫后觀察情況
4.6.3 仔豬生長(zhǎng)情況
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]廣東地區(qū)豬傳染性萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查[J]. 白挨泉,劉為民,徐蘇標(biāo),袁沖,王曉清. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(06)
[2]國(guó)內(nèi)獸用凍干疫苗的發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 鄧彥莉,李艷華,陳儉清. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2011(03)
[3]氟苯尼考對(duì)豬傳染性萎縮性鼻炎治療效果觀察[J]. 楊淵,和萬本,和本勤,和冠. 云南畜牧獸醫(yī). 2010(02)
[4]重組產(chǎn)毒多殺性巴氏桿菌毒素PMT的N-端和C-端蛋白的生物學(xué)活性及免疫原性[J]. 湯細(xì)彪,吳斌,趙戰(zhàn)勤,鄧永,何華,何啟蓋,陳煥春. 微生物學(xué)報(bào). 2008(02)
[5]豬萎縮性鼻炎的防治對(duì)策[J]. 范玉霞. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2006(05)
[6]豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 唐先春,吳斌,索緒峰,王大林,陳煥春,尹爭(zhēng)艷. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2005(06)
[7]豬多殺性巴氏桿菌的分離鑒定及毒素檢測(cè)[J]. 索緒峰,王建新,姚德標(biāo),王大林,張嗣華,李碧思,王美燕. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2005(06)
[8]多重PCR在豬傳染性萎縮性鼻炎診斷中的應(yīng)用[J]. 魯承,金鑫,楊詠潔. 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2003(12)
[9]中草藥防治豬傳染性萎縮性鼻炎[J]. 黃平. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志. 2001(06)
[10]我國(guó)部分地區(qū)豬傳染性萎縮性鼻炎病原的調(diào)查[J]. 齊鐵英,張亞華,苑士祥,楊留戰(zhàn),張樹成,楊旭夫,劉杰. 中國(guó)獸醫(yī)科技. 1995(04)
博士論文
[1]支氣管敗血波氏桿菌的重組沙門氏菌基因工程疫苗研究[D]. 趙戰(zhàn)勤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]湖北規(guī);i場(chǎng)豬萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查與凈化研究[D]. 余騰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]豬多殺性巴氏桿菌分離鑒定及其PMT毒素免疫原性研究[D]. 張軍虎.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]產(chǎn)毒素多殺性巴氏桿菌重組沙門氏菌基因工程疫苗的研究[D]. 段龍川.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]多殺性巴氏桿菌毒素單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D]. 盧順.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[5]廣西豬萎縮性鼻炎流行病學(xué)調(diào)查及豬多殺性巴氏桿菌OMPH基因的克隆與序列分析[D]. 鐘勤.廣西大學(xué) 2007
[6]貴州省豬萎縮性鼻炎病原的分離與鑒定[D]. 徐景峨.貴州大學(xué) 2007
[7]豬傳染性萎縮性鼻炎綜合防制的研究[D]. 申剛.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
本文編號(hào):3371064
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