T-2毒素（T-2）與HT-2毒素（HT-2）均屬于A類單端孢霉烯族毒素,為梨孢鐮刀菌次級代謝產(chǎn)物。T-2/HT-2在自然界中廣泛分布,攝入體內(nèi)可對人畜健康造成損傷,在各組織器官中殘留,并導(dǎo)致動物發(fā)生氧化應(yīng)激與細(xì)胞凋亡。肉雞對T-2較敏感,低劑量毒素便可產(chǎn)生毒性作用,引起其采食量下降、口腔損傷、消化道潰瘍及體重減輕等。在肉雞飼喂過程中向飼料中添加物理性吸附劑可有效防止毒素對肉雞的損害。T-2可導(dǎo)致細(xì)胞活性降低、死亡率增高,發(fā)生氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡。目前,研究T-2/HT-2對動物的毒性作用報道較少,而且尚無相關(guān)文獻(xiàn)報道兩種毒素對肉雞體內(nèi)、體外的毒性作用。因此,本文主要從體內(nèi)、體外兩方面研究T-2/HT-2對肉雞的毒性機(jī)理及減控作用。首先建立了一種可檢測肉雞體內(nèi)T-2/HT-2的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）方法,隨后采用梨孢鐮刀菌接種玉米獲得發(fā)霉玉米作為毒素來源,研究肉雞自由采食發(fā)霉玉米后毒性作用及在體內(nèi)的殘留情況。由于肝是T-2產(chǎn)生毒性作用的靶器官,因此,體外試驗選擇肝細(xì)胞作為研究對象。通過灌流法分離獲得原代雞肝細(xì)胞,研究T-2/HT-2對肝細(xì)胞的毒性與細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)理。然后... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：197 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１氧化應(yīng)激造成細(xì)胞損傷的機(jī)制ＰＳ１??Ｆｉｇ．?２－１?Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ?ｏｆ?ｏｘｉｄａｔｉｖｅ?ｃｅｌｌ?ｄａｍａｇｅ??２．３信號通路??

粒體膜中（Ｂａｋ），當(dāng)發(fā)生刺激時，可從線粒體膜中釋放出來ｔｗ’Ｗ。ＢＨ族的加入，增加了細(xì)胞調(diào)亡調(diào)控的復(fù)雜程度，送是因該蛋白在每個生化同，均可產(chǎn)生獨特的細(xì)胞器信號化；這些蛋白在刺激素作用下釋放激包括Ｂｉｄ蛋白、Ｂｉｍ蛋白及Ｂａｄ蛋白等ｆ７８’７９ｌ細(xì)胞中ＢＨ３－ｏｎｌｙ蛋白，從而促進(jìn)促調(diào)亡蛋白表達(dá)，而送一類特殊形式的細(xì)胞調(diào)亡常是由細(xì)［６＂。???Ｐ５３蛋白??Ｐ５３蛋白是一種腫瘤抑制因子，其首要功能是參與細(xì)胞周期調(diào)控與細(xì)胞細(xì)胞生長、分化與擴(kuò)增１８２，８３１。Ｐ５３在細(xì)胞調(diào)亡過程中扭任口控職能ｔＭ’時刻可根據(jù)細(xì)胞受到的應(yīng)激而誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡（園２－２）。目前，人們尚蛋白介導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡的生化機(jī)制，但己知Ｐ５３蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞調(diào)亡存在是通過線粒體去極化誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞調(diào)亡，另一個途徑是調(diào)亡誘導(dǎo)物刺生細(xì)胞調(diào)亡１８６１。Ｐ５３蛋白可促進(jìn)胞內(nèi)死亡受體表達(dá)，并通過增加促淵亡因，誘導(dǎo)產(chǎn)生澗亡基本結(jié)構(gòu)，其中促淵亡因子ＡＰＡＦ－１是調(diào)亡體的重要組

??２丄２流動相優(yōu)化選擇不同的流動相Ａ檢測Ｔ－２與ＨＴ－２的色譜峰面積見圖３－３。圖??中思示，在Ｔ－２的檢測結(jié)果中，Ｂｕｆｆｅｒ?Ａ色譜峰面積顯著大于其他３中緩沖液色譜峰??面積（／＊＜０．０５）。而在ＨＴ－２檢測結(jié)果中，Ｂｕｆｆｅｒ?Ａ和Ｂｕｆｆｅｒ?Ｄ峰面積顯著大于Ｂｕｆｆｅｒ?Ｂ??和Ｂｕｆｆｅｒ?Ｃ的峰面積（ｉＭ）．０５），而Ｂｕｆｆｅｒ?Ａ和Ｂｕｆｆｅｒ?Ｄ之間差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。??因化選擇Ｂｕｆｆｅｒ?Ａ最為本試驗的流動相，即５?ｍＭ醋酸按及化０５％甲酸溶液。??Ｉ?Ｉ?Ｂｕｆｆｅｒ?Ａ??福漏?４?Ｂ。瓶ｒ?Ｂ??．ｅ?１?ｍｍｍａ?Ｂｕｆｆｅｒ?Ｃ??ａ?Ｋｓｓｇｇ＆ｉａ?Ｂｕｆｆｅｒ?Ｄ??２．０ｅ＋５?－?丄?ｂ??ｄ?ｃ??ｇ?１．５ｅ＋５?－?Ｔ??益ＬＯｅ＋５?－?主國圍??注?ｈ?３??５．〇ｅ＋４?■?１＾９?巧廣義??０．０?，，品?Ｃ????Ｔ－２?ｔｏｘｉｎ?ＨＴ－２?ｔｏｘｉｎ??圖３－３不同流動相緩沖液下１０?Ｔ－２與ＨＴ－２的標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果比較??注：同一基因的不同字母（ａ－ｄ）之間表示差異顯著（戶＜０．０５）??Ｆｉｇ．?３－３?Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｄｅ化ｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｆｒｏｍ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ?ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ?１０?ｎｇ＾ｍＬ．ｉ??ｏｆ?ｔｈｅ?ｔａｒｇｅｔ?ａｎａｌｙｔｅｓ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｂｕｆｆｅｒｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｍｏｂｉｌｅ?ｐｈａｓｅ??Ｎｏ化：Ｉｎ?ｅａｃｈ?ｐａｎｅｌ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3366431