T-2/HT-2毒素對(duì)肉雞毒性機(jī)理及其減控作用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-27 13:22
T-2毒素(T-2)與HT-2毒素(HT-2)均屬于A類單端孢霉烯族毒素,為梨孢鐮刀菌次級(jí)代謝產(chǎn)物。T-2/HT-2在自然界中廣泛分布,攝入體內(nèi)可對(duì)人畜健康造成損傷,在各組織器官中殘留,并導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)生氧化應(yīng)激與細(xì)胞凋亡。肉雞對(duì)T-2較敏感,低劑量毒素便可產(chǎn)生毒性作用,引起其采食量下降、口腔損傷、消化道潰瘍及體重減輕等。在肉雞飼喂過(guò)程中向飼料中添加物理性吸附劑可有效防止毒素對(duì)肉雞的損害。T-2可導(dǎo)致細(xì)胞活性降低、死亡率增高,發(fā)生氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡。目前,研究T-2/HT-2對(duì)動(dòng)物的毒性作用報(bào)道較少,而且尚無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道兩種毒素對(duì)肉雞體內(nèi)、體外的毒性作用。因此,本文主要從體內(nèi)、體外兩方面研究T-2/HT-2對(duì)肉雞的毒性機(jī)理及減控作用。首先建立了一種可檢測(cè)肉雞體內(nèi)T-2/HT-2的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)方法,隨后采用梨孢鐮刀菌接種玉米獲得發(fā)霉玉米作為毒素來(lái)源,研究肉雞自由采食發(fā)霉玉米后毒性作用及在體內(nèi)的殘留情況。由于肝是T-2產(chǎn)生毒性作用的靶器官,因此,體外試驗(yàn)選擇肝細(xì)胞作為研究對(duì)象。通過(guò)灌流法分離獲得原代雞肝細(xì)胞,研究T-2/HT-2對(duì)肝細(xì)胞的毒性與細(xì)胞凋亡相關(guān)機(jī)理。然后...
【文章來(lái)源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:197 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1氧化應(yīng)激造成細(xì)胞損傷的機(jī)制PS1??Fig.?2-1?Mechanisms?of?oxidative?cell?damage??2.3信號(hào)通路??
粒體膜中(Bak),當(dāng)發(fā)生刺激時(shí),可從線粒體膜中釋放出來(lái)tw’W。BH族的加入,增加了細(xì)胞調(diào)亡調(diào)控的復(fù)雜程度,送是因該蛋白在每個(gè)生化同,均可產(chǎn)生獨(dú)特的細(xì)胞器信號(hào)化;這些蛋白在刺激素作用下釋放激包括Bid蛋白、Bim蛋白及Bad蛋白等f78’79l細(xì)胞中BH3-only蛋白,從而促進(jìn)促調(diào)亡蛋白表達(dá),而送一類特殊形式的細(xì)胞調(diào)亡常是由細(xì)[6"。???P53蛋白??P53蛋白是一種腫瘤抑制因子,其首要功能是參與細(xì)胞周期調(diào)控與細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)、分化與擴(kuò)增182,831。P53在細(xì)胞調(diào)亡過(guò)程中扭任口控職能tM’時(shí)刻可根據(jù)細(xì)胞受到的應(yīng)激而誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡(園2-2)。目前,人們尚蛋白介導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡的生化機(jī)制,但己知P53蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞調(diào)亡存在是通過(guò)線粒體去極化誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞調(diào)亡,另一個(gè)途徑是調(diào)亡誘導(dǎo)物刺生細(xì)胞調(diào)亡1861。P53蛋白可促進(jìn)胞內(nèi)死亡受體表達(dá),并通過(guò)增加促淵亡因,誘導(dǎo)產(chǎn)生澗亡基本結(jié)構(gòu),其中促淵亡因子APAF-1是調(diào)亡體的重要組
??2丄2流動(dòng)相優(yōu)化選擇不同的流動(dòng)相A檢測(cè)T-2與HT-2的色譜峰面積見(jiàn)圖3-3。圖??中思示,在T-2的檢測(cè)結(jié)果中,Buffer?A色譜峰面積顯著大于其他3中緩沖液色譜峰??面積(/*<0.05)。而在HT-2檢測(cè)結(jié)果中,Buffer?A和Buffer?D峰面積顯著大于Buffer?B??和Buffer?C的峰面積(iM).05),而Buffer?A和Buffer?D之間差異不顯著(P>0.05)。??因化選擇Buffer?A最為本試驗(yàn)的流動(dòng)相,即5?mM醋酸按及化05%甲酸溶液。??I?I?Buffer?A??福漏?4?B。瓶r?B??.e?1?mmma?Buffer?C??a?Kssgg&ia?Buffer?D??2.0e+5?-?丄?b??d?c??g?1.5e+5?-?T??益LOe+5?-?主國(guó)圍??注?h?3??5.〇e+4?■?1^9?巧廣義??0.0?,,品?C????T-2?toxin?HT-2?toxin??圖3-3不同流動(dòng)相緩沖液下10?T-2與HT-2的標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果比較??注:同一基因的不同字母(a-d)之間表示差異顯著(戶<0.05)??Fig.?3-3?Comparison?of?the?de化rmination?results?from?standard?solutions?containing?10?ng^mL.i??of?the?target?analytes?with?different?buffers?in?the?mobile?phase??No化:In?each?panel
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]T-2毒素的毒性效應(yīng)及致毒機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 鄒廣迅,張紅霞,花日茂. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2011(02)
[2]T-2毒素研究進(jìn)展[J]. 王敏輝,李呂木,丁小玲. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2011(01)
[3]T-2 toxin-induced apoptosis involving Fas,p53,Bcl-xL,Bcl-2,Bax and caspase-3 signaling pathways in human chondrocytes[J]. Jing-hong CHEN Jun-ling CAO,Yong-lie CHU,Zhi-lun WANG,Zhan-tian YANG,Hong-lin WANG (Ministry of Education Key Laboratory of Environment and Genes related to Diseases,Institute of Endemic Diseases,School of Medicine,Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061,China). Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal). 2008(06)
[4]Berbamine induces apoptosis in human hepatoma cell line SMMC7721 by loss in mitochondrial transmembrane potential and caspase activation[J]. WANG Guan-yu 1,ZHANG Jia-wei2,Lü Qing-hua2,XU Rong-zhen2,DONG Qing-hua2(1Department of Surgery,Sir Run Run Shaw Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310016,China)(2Cancer Institute,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310009,China). Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal). 2007(04)
[5]T-2毒素代謝研究近況[J]. 李群偉. 中國(guó)地方病學(xué)雜志. 1997(03)
[6]變溫培養(yǎng)和培養(yǎng)基對(duì)三線鐮刀菌M-20產(chǎn)毒性的影響[J]. 匡開(kāi)源,陸仕華,史士英,張樹(shù)榮,黃敬堅(jiān). 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 1986(01)
本文編號(hào):3366431
【文章來(lái)源】:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:197 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【部分圖文】:
圖2-1氧化應(yīng)激造成細(xì)胞損傷的機(jī)制PS1??Fig.?2-1?Mechanisms?of?oxidative?cell?damage??2.3信號(hào)通路??
粒體膜中(Bak),當(dāng)發(fā)生刺激時(shí),可從線粒體膜中釋放出來(lái)tw’W。BH族的加入,增加了細(xì)胞調(diào)亡調(diào)控的復(fù)雜程度,送是因該蛋白在每個(gè)生化同,均可產(chǎn)生獨(dú)特的細(xì)胞器信號(hào)化;這些蛋白在刺激素作用下釋放激包括Bid蛋白、Bim蛋白及Bad蛋白等f78’79l細(xì)胞中BH3-only蛋白,從而促進(jìn)促調(diào)亡蛋白表達(dá),而送一類特殊形式的細(xì)胞調(diào)亡常是由細(xì)[6"。???P53蛋白??P53蛋白是一種腫瘤抑制因子,其首要功能是參與細(xì)胞周期調(diào)控與細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)、分化與擴(kuò)增182,831。P53在細(xì)胞調(diào)亡過(guò)程中扭任口控職能tM’時(shí)刻可根據(jù)細(xì)胞受到的應(yīng)激而誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡(園2-2)。目前,人們尚蛋白介導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡的生化機(jī)制,但己知P53蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞調(diào)亡存在是通過(guò)線粒體去極化誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞調(diào)亡,另一個(gè)途徑是調(diào)亡誘導(dǎo)物刺生細(xì)胞調(diào)亡1861。P53蛋白可促進(jìn)胞內(nèi)死亡受體表達(dá),并通過(guò)增加促淵亡因,誘導(dǎo)產(chǎn)生澗亡基本結(jié)構(gòu),其中促淵亡因子APAF-1是調(diào)亡體的重要組
??2丄2流動(dòng)相優(yōu)化選擇不同的流動(dòng)相A檢測(cè)T-2與HT-2的色譜峰面積見(jiàn)圖3-3。圖??中思示,在T-2的檢測(cè)結(jié)果中,Buffer?A色譜峰面積顯著大于其他3中緩沖液色譜峰??面積(/*<0.05)。而在HT-2檢測(cè)結(jié)果中,Buffer?A和Buffer?D峰面積顯著大于Buffer?B??和Buffer?C的峰面積(iM).05),而Buffer?A和Buffer?D之間差異不顯著(P>0.05)。??因化選擇Buffer?A最為本試驗(yàn)的流動(dòng)相,即5?mM醋酸按及化05%甲酸溶液。??I?I?Buffer?A??福漏?4?B。瓶r?B??.e?1?mmma?Buffer?C??a?Kssgg&ia?Buffer?D??2.0e+5?-?丄?b??d?c??g?1.5e+5?-?T??益LOe+5?-?主國(guó)圍??注?h?3??5.〇e+4?■?1^9?巧廣義??0.0?,,品?C????T-2?toxin?HT-2?toxin??圖3-3不同流動(dòng)相緩沖液下10?T-2與HT-2的標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果比較??注:同一基因的不同字母(a-d)之間表示差異顯著(戶<0.05)??Fig.?3-3?Comparison?of?the?de化rmination?results?from?standard?solutions?containing?10?ng^mL.i??of?the?target?analytes?with?different?buffers?in?the?mobile?phase??No化:In?each?panel
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]T-2毒素的毒性效應(yīng)及致毒機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 鄒廣迅,張紅霞,花日茂. 生態(tài)毒理學(xué)報(bào). 2011(02)
[2]T-2毒素研究進(jìn)展[J]. 王敏輝,李呂木,丁小玲. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2011(01)
[3]T-2 toxin-induced apoptosis involving Fas,p53,Bcl-xL,Bcl-2,Bax and caspase-3 signaling pathways in human chondrocytes[J]. Jing-hong CHEN Jun-ling CAO,Yong-lie CHU,Zhi-lun WANG,Zhan-tian YANG,Hong-lin WANG (Ministry of Education Key Laboratory of Environment and Genes related to Diseases,Institute of Endemic Diseases,School of Medicine,Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061,China). Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal). 2008(06)
[4]Berbamine induces apoptosis in human hepatoma cell line SMMC7721 by loss in mitochondrial transmembrane potential and caspase activation[J]. WANG Guan-yu 1,ZHANG Jia-wei2,Lü Qing-hua2,XU Rong-zhen2,DONG Qing-hua2(1Department of Surgery,Sir Run Run Shaw Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310016,China)(2Cancer Institute,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,Hangzhou 310009,China). Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine & Biotechnology Journal). 2007(04)
[5]T-2毒素代謝研究近況[J]. 李群偉. 中國(guó)地方病學(xué)雜志. 1997(03)
[6]變溫培養(yǎng)和培養(yǎng)基對(duì)三線鐮刀菌M-20產(chǎn)毒性的影響[J]. 匡開(kāi)源,陸仕華,史士英,張樹(shù)榮,黃敬堅(jiān). 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 1986(01)
本文編號(hào):3366431
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