新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的危害最嚴(yán)重的禽類傳染病之一,具有高熱、呼吸困難、接觸性傳播、敗血經(jīng)過等特點,給我國及世界養(yǎng)禽業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。目前,免疫接種是預(yù)防和控制新城疫的主要途徑,但有些時候得不到理想的效果,因此需要探索新的防制策略。本實驗室前期通過RNA-Seq技術(shù),篩選出NDV感染機體后與免疫相關(guān)的多個差異表達(dá)基因,從中挑選出干擾素刺激基因12（1）和12（2）（ISG12（1）/（2））進(jìn)行抗病毒研究。本論文的主要研究結(jié)果如下:（1）NDV感染可誘導(dǎo)ISG12（1）和ISG12（2）表達(dá)。在NDV F48E9感染的10日齡SPF雞胚和4周齡SPF雞的法氏囊中,利用RT-qPCR對前期轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行驗證,結(jié)果表明ISG12（1）/（2）表達(dá)顯著上調(diào)。在不同毒力NDV感染的CEF和DF-1細(xì)胞中,也顯示ISG12（1）上調(diào),在NDV F48E9感染的DF-1細(xì)胞中,ISG12（2）表達(dá)也上調(diào)。提示ISG12可能在NDV感染中發(fā)揮一定的作用。（2）ISG12（1）和ISG12（2... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

NDV粒子結(jié)構(gòu)模式圖(Ganaretal.2014)

所用一抗為 1:500 稀釋 H&L (Alexa Fluor 488)。行至少 3 次生物學(xué)重復(fù)后得出計分析，P < 0.05 代表差異表差異極顯著（***）。行擴增，得到 300bp 的 ISG1到 pCA-ISG12(1)-Flag（ISG1切鑒定正確的質(zhì)粒送擎科生明載體構(gòu)建成功。將其轉(zhuǎn)染，通過 Western blot（圖 2-3況，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染 ISG12(1)質(zhì)

圖 2-2 ISG12(1)克隆載體的雙酶切鑒 D2000 plus；1.重組質(zhì)粒 pCA-ISG12A-ISG12(1)-Flag 雙酶切（EcoRI, Bgnzyme-digested identification of ISG1NAMaker D2000 plus; 1. Negative c digestion of pCA-ISG12(1)-Flag (Eco

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]新城疫病毒感染雞胚miRNAs和mRNAs表達(dá)譜分析與抗病毒基因的篩選[D]. 賈燕青.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]不同宿主來源新城疫病毒全基因組特征及其V蛋白對DF-1細(xì)胞IFN-β生成的影響[D]. 陳勝利.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013

碩士論文
[1]新城疫病毒Yulin株V蛋白對Ⅰ型IFN信號通路相關(guān)因子的影響及Yulin株全長cDNA的構(gòu)建[D]. 王燕平.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[2]雛鴨感染Ⅰ型鴨肝炎病毒相關(guān)基因的篩選[D]. 王紅.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號：3359809