研究旨在探討促分裂原活化蛋白激酶激酶激酶（Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1）基因對體外培養(yǎng)長江三角洲白山羊毛囊干細胞（HFSCs）增殖和凋亡的影響。針對MAP3K1基因設計3個干擾靶點,構建pDNA316-ZsGreen-ShRNA腺病毒干擾載體。轉染HFSCs,以空載體細胞為對照,RT-qPCR技術檢測干擾MAP3K1效果及增殖相關基因（PCNA、CDK1、CCND2）、凋亡相關基因（Bax、Bcl-2）表達水平,CCK-8和EdU法檢測細胞增殖,流式細胞儀檢測細胞周期和細胞凋亡。結果表明,shRNA（MAP3K1-sh）轉染HFSCs后,MAP3K1基因相當表達量極顯著下降（P<0.01）;增殖相關基因mRNA表達水平顯著下降,促凋亡基因Bax的mRNA表達水平顯著提高,相反,抗凋亡基因Bcl-2的mRNA表達顯著降低;CCK-8和EdU結果發(fā)現(xiàn)細胞增殖受抑制,S期細胞數(shù)量顯著上升;細胞總凋亡量顯著上升。綜上,干擾MAP3K1基因表達顯著抑制HFSCs增殖并促進其凋亡,研究為闡明調控長江三角洲白山羊... 

【文章來源】：東北農業(yè)大學學報. 2020,51(10)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

干擾MAP3K1基因對HFSCs增殖和細胞周期的影響

干擾MAP3K1基因對HFSCs凋亡的影響

以GAPDH為內參基因，運用RT-q PCR技術研究sh RNA干擾MAP3K1基因對增殖和凋亡相關基因m RNA表達量的影響。由圖2可知，與對照組相比，MAP3K1-sh2組增殖相關基因PCNA、CDK1、CCND2相對表達量顯著降低（P<0.05），促凋亡基因Bax相對表達量顯著上升（P<0.05），抗凋亡基因Bcl-2相對表達量極顯著降低（P<0.01）。由此推測，干擾MAP3K1基因表達，顯著抑制HFSCs增殖，促進HFSCs凋亡。2.3 干擾MAP3K1基因抑制山羊HFSCs增殖


本文編號：3359192