發(fā)布時(shí)間：2021-08-23 17:43

　　研究氧化型低密度脂蛋白受體1（oxidized low-density lipoprotein receptor1,OLR1）基因在豬前脂肪細(xì)胞分化過程中的作用,為深入研究OLR1基因在脂肪沉積中的功能奠定基礎(chǔ)。根據(jù)GenBank中豬OLR1基因序列（登錄號(hào):NM₂13805）,構(gòu)建OLR1基因過表達(dá)載體OLR1-pcDNA3.1,同時(shí)合成干擾OLR1表達(dá)的siRNA。從恩施黑豬背最長(zhǎng)肌中分離前脂肪細(xì)胞,分別將OLR1-pcDNA3.1和OLR1-siRNA轉(zhuǎn)染前脂肪細(xì)胞,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)分化,至第6天,通過油紅O染色、甘油三酯含量測(cè)定和熒光定量PCR檢測(cè)OLR1基因?qū)η爸炯?xì)胞分化的影響。結(jié)果顯示,OLR1過表達(dá)組脂滴明顯多于對(duì)照組,甘油三酯含量顯著（P<0.05）增加,成脂分化標(biāo)志基因PPARγ的表達(dá)量極顯著（P<0.01）升高、C/EBPα和FAS的表達(dá)量顯著（P<0.05）升高;干擾OLR1后,細(xì)胞內(nèi)脂滴減少,甘油三酯含量顯著（P<0.05）下降,成脂分化標(biāo)志基因PPARγ的表達(dá)量極顯著（P<0.01）下降,C/EBPα和FA... 

【文章來源】：浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,32(12)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

OLR1基因擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果

圖1 OLR1基因擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果收集轉(zhuǎn)染OLR1-siRNA和對(duì)照NC 24 h后的細(xì)胞,用Trizol法提取總RNA。按照Takara公司試劑盒PrimeScriptTM RT說明進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,用引物pOLQF和pOLQR(表1)檢測(cè)各處理中OLR1基因的表達(dá)量。結(jié)果顯示,siRNA1的干擾效果最好,其OLR1基因表達(dá)量下降了86%(P<0.01)(圖3)。因此,選擇siRNA1用于后續(xù)試驗(yàn)。

熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果表明:過表達(dá)組(OLR1-pcDNA3.1)中OLR1、PPARγ、C/EBPα和FAS基因的mRNA表達(dá)量顯著(P<0.05)或者極顯著(P<0.01)高于對(duì)照組(pcDNA3.1)(圖4-A)。干擾組(OLR1-siRNA)與對(duì)照組(NC)相比,OLR1、PPARγ、C/EBPα和FAS基因的mRNA表達(dá)量顯著(P<0.05)或者極顯著(P<0.01)下降(圖4-B)。2.4 油紅O染色和甘油三酯含量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]屯昌豬PDK4基因克隆及其組織表達(dá)分析[J]. 孫瑞萍,王峰,晁哲,劉海隆,邢漫萍,劉圈煒,黃麗麗,鄭心力,魏立民.  浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020(06)
[2]Leptin過表達(dá)對(duì)豬前脂肪細(xì)胞脂滴形成的研究[J]. 胡瀕月,胡楊,成文敏,趙素梅,趙紅業(yè),魏紅江.  生物技術(shù)通報(bào). 2020(08)
[3]氧化型低密度脂蛋白受體1（OLR1）基因在家畜經(jīng)濟(jì)性狀中的研究進(jìn)展[J]. 李托,李隴平.  榆林學(xué)院學(xué)報(bào). 2020(02)
[4]影響豬脂肪沉積主要候選基因的研究進(jìn)展[J]. 瞿秋紅,黃葉,蔣欽楊,黃艷娜.  動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2019(07)
[5]Krüppel-Like Factor 3（KLF3）基因?qū)εＶ境练e的作用[J]. 郭紅芳,寧越,成功,昝林森.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(07)
[6]牛ACOX1基因過表達(dá)載體構(gòu)建及對(duì)脂肪沉積的初步研究[J]. 張鳳,曾倩暉,陶虎,熊琪,張年,劉洋,蔣思文,陳明新.  中國畜牧雜志. 2017(11)
[7]豬OLR1基因克隆及其與生產(chǎn)性狀的關(guān)聯(lián)、表達(dá)分析[J]. 郭咪咪,喬木,吳俊靜,李良華,梅書棋,李助南.  華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(03)
[8]脂肪酸對(duì)小鼠前體脂肪細(xì)胞增殖分化及OLR1基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)的作用[J]. 孫超,劉春偉.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(03)
[9]豬肌內(nèi)脂肪前體細(xì)胞與皮下脂肪前體細(xì)胞分化過程中基因差異表達(dá)分析[J]. 張罕星,朱曉彤,束剛,周桂炫,高萍,高淑靜,張常明,江青艷,陳瑤生.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(11)

博士論文
[1]豬骨骼肌和脂肪組織microRNA調(diào)控元件鑒定及成肌細(xì)胞誘導(dǎo)成脂機(jī)理研究[D]. 候曄.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]脂肪細(xì)胞分化相關(guān)因子基因表達(dá)在豬生長(zhǎng)過程中的變化規(guī)律研究[D]. 姜俊芳.浙江大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3358312