發(fā)布時間：2021-08-21 06:55

　　乙型腦炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）屬于黃病毒科黃病毒屬,是一種危害嚴重的人獸共患蟲媒性傳染病病原,感染人和動物后可以引起乙型腦炎（簡稱乙腦）。該病是人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的蟲媒病之一,對人類健康造成巨大威脅,同時乙腦也是危害我國養(yǎng)豬業(yè)的重大疫病之一。JEV感染引起機體中樞神經(jīng)系統(tǒng)過度炎癥反應是其致病的主要原因,但目前,具體的致病機制尚不太清楚。近年研究表明,JEV蛋白與宿主細胞蛋白的相互作用對病毒入侵、復制、神經(jīng)毒力、神經(jīng)炎癥反應、天然免疫逃逸及誘導宿主保護性免疫等方面可產(chǎn)生重要影響。JEV非結構蛋白NS5具有甲基轉(zhuǎn)移酶和RNA依賴的RNA聚合酶活性,在病毒基因組的復制以及病毒的致病中發(fā)揮重要作用。因此,研究JEV NS5蛋白與宿主蛋白相互作用對于揭示該病毒的復制與致病機理以及抗病毒藥物的開發(fā)具有重要科學意義。另外,由于JEV致病機制的復雜性,臨床中針對該病的有效治療方法也十分缺乏,因此探索針對乙腦的治療藥物,對該疾病的臨床防治具有重要意義。本論文主要圍繞JEV NS5蛋白與宿主蛋白相互作用對病毒復制、病毒逃避宿主抗病毒反應的影響,以及藥物... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表(Abbreviation)
第1章 文獻綜述
    1.1 乙型腦炎病毒簡介
    1.2 乙型腦炎的流行病學特性
        1.2.1 乙型腦炎的流行特征
        1.2.2 乙型腦炎的傳播特征
    1.3 乙型腦炎的致病機制
        1.3.1 JEV在機體內(nèi)的增殖與擴散
        1.3.2 JEV引起神經(jīng)炎癥反應的分子機制
    1.4 乙型腦炎病毒的分子生物學特性
        1.4.1 基因組結構與功能
        1.4.2 蛋白質(zhì)功能
        1.4.3 病毒的入侵和復制過程
    1.5 乙型腦炎臨床癥狀與病理變化
        1.5.1 乙型腦炎的臨床癥狀
        1.5.2 乙型腦炎的病理變化
    1.6 乙型腦炎的防治
    1.7 乙腦病毒蛋白與宿主蛋白相互作用的研究進展
        1.7.1 JEV蛋白與宿主蛋白的相互作用對病毒入侵的影響
        1.7.2 JEV蛋白與宿主蛋白的相互作用對病毒復制的影響
        1.7.3 JEV蛋白與宿主蛋白的相互作用對神經(jīng)炎癥反應的影響
        1.7.4 JEV蛋白與宿主蛋白的相互作用對天然免疫的影響
    1.8 病毒蛋白與宿主蛋白相互作用的研究方法
        1.8.1 酵母雙雜交系統(tǒng)
        1.8.2 串聯(lián)親和純化(TAP)
第2章 乙型腦炎病毒NS5蛋白與HSP70相互作用的研究
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結果與分析
        2.3.1 利用串聯(lián)親和純化與質(zhì)譜分析結合法篩選與JEV NS5蛋白相互作用的宿主蛋白
        2.3.2 JEV NS5與宿主蛋白相互作用的驗證
        2.3.3 HSP70蛋白可以與JEV NS5的RdRp結構域直接相互作用
        2.3.4 HSP70與JEV復制復合體組成成分相互作用
        2.3.5 HSP70正調(diào)控JEV基因組的復制
        2.3.6 HSP70可穩(wěn)定JEV復制復合體的組成成分
        2.3.7 JEV感染刺激HSP70蛋白的表達
    2.4 討論
    2.5 小結
第3章 JEV NS5蛋白抑制宿主蛋白入核運輸?shù)难芯?br>    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結果與分析
        3.3.1 JEV抑制含經(jīng)典NLS的報告蛋白入核
        3.3.2 JEV NS5蛋白抑制3×SV40NLS-2×EGFP的入核
        3.3.3 JEV NS5與核運輸?shù)鞍譑PNA2、KPNA3、KPNA4相互作用
        3.3.4 JEV NS5抑制p50與p65的核定位
        3.3.5 JEV NS5抑制NF-κB的活性
        3.3.6 JEV NS5通過直接靶向p50/p65來抑制NF-κB的活性
        3.3.7 JEV NS5抑制p50/p65與KPNA3、KPNA4的相互作用
        3.3.8 JEV NS5通過靶向KPNA2、KPNA3、KPNA4抑制Ⅰ型干擾素的分泌
        3.3.9 KPNA2、KPNA3、KPNA4的過表達抑制JEV的復制
    3.4 討論
    3.5 小結
第4章 依那西普對乙型腦炎的治療作用的研究
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗方法
    4.3 結果與分析
        4.3.1 依那西普降低JEV感染神經(jīng)元/膠質(zhì)細胞引起的炎癥反應
        4.3.2 依那西普減輕JEV感染小鼠腦組織的病理癥狀
        4.3.3 依那西普降低JEV感染小鼠腦部炎癥因子的分泌
        4.3.4 依那西普對JEV感染小鼠腦組織中膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元形態(tài)和數(shù)量的影響
        4.3.5 依那西普減少JEV感染小鼠腦組織中神經(jīng)元的凋亡
        4.3.6 依那西普抑制JEV感染引起的炎癥與凋亡信號通路的激活
        4.3.7 依那西普可緩解JEV感染所引起的血腦屏障通透性的改變
        4.3.8 依那西普可降低小鼠腦組織中的病毒載量
        4.3.9 依那西普可減輕JEV感染小鼠的臨床癥狀并降低其致死率
    4.4 討論
    4.5 小結
結論
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]豬源乙型腦炎病毒SXBJ07株全長基因組克隆分析及ELISA檢測方法的建立[D]. 王（韋華）.西北農(nóng)林科技大學 2009



本文編號：3355109