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十二指腸賈第蟲γ和δ賈第素DNA疫苗免疫保護力評價

發(fā)布時間:2021-08-20 23:18
  十二指腸賈第蟲(Giardia duodenalis,簡稱賈第蟲)是一種常見的厭氧原生動物病原體,廣泛引起多種哺乳動物產生胃腸道疾病。賈第蟲能夠導致腹瀉、脹氣、消瘦、大便油膩惡臭等癥狀,并且可能引發(fā)慢性疾病和腸道外并發(fā)癥。隨著現(xiàn)代生物技術的不斷的創(chuàng)新發(fā)展,賈第蟲的基因疫苗(DNA疫苗)作為一種可能應用于防治賈第蟲病的重要方式,其相關研究也受到了越來越多人的關注。DNA疫苗目前在動物模型上能夠成功地預防和治療各種疾病,具有穩(wěn)定,方便和安全的特點,并且能夠引發(fā)機體產生細胞和體液免疫應答反應,能夠完善嬰兒的抗體應答。pcDNA3.1質粒是一種哺乳動物細胞表達載體,在真核表達載體構建中已被廣泛應用,適用于DNA疫苗的開發(fā)。CpG序列可誘導強烈的Th1樣應答,可作為疫苗的佐劑,抵抗各種目標,包括感染性物質,腫瘤抗原,過敏原等。賈第素(giardin)是組成賈第蟲細胞骨架蛋白的重要元素,目前確定的賈第素為α、β、γ和δ-giardin。有關研究表明α和β-giardin分子均具有較高的免疫原性,γ-giardin為38 kDa的蛋白質,也許是微絲帶的成分之一。δ-giardin在分子水平上的研究取... 

【文章來源】:東北農業(yè)大學黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

十二指腸賈第蟲γ和δ賈第素DNA疫苗免疫保護力評價


賈第蟲生活史[48]

電泳圖,基因,PCR擴增產物,電泳圖


arker D1000;1:γ-giardin 基因 PCR 產物;2:δ-giar1000; 1: The PCR product of γ-giardin gene; 2: The PC3-1 γ-giardin 和δ-giardin 基因 PCR 擴增產物電phoretic profile of PCR products of γ-giardin an粒的酶切鑒定結果GM-T-γ-giardin、pGM-T-δ-giardin1 和 pGM-T-giardin 基因大小為 429 bp,δ-giardin1 和δ-giar(見圖 3-2)。證明 pGM-T-γ-giardin、pGM-T成功。

間接免疫熒光,轉染,重組質粒,預期理論


圖 3-4 γ-giardin 和δ-giardin 在 Vero 細胞內表達的間接免疫熒光檢測Fig. 3-4 Indirect immunofluorescence analysis for expression of γ-giardin and δ-giardin in Vero為了進一步確認重組質粒的體外表達情況,本研究還取轉染后的 Vero 細胞裂解液的上液進行 Western Blot,并得到相應的條帶,截短后的γ-giardin、δ-giardin 和γ-δ-giardin 表達分子量大小理論值分別是 16 kDa、15 kDa 和 32 kDa,實驗結果(見圖 3-5)和預期理論值符。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]隱孢子蟲和藍氏賈第鞭毛蟲分子流行病學研究進展[J]. 徐寧,尹建海,沈玉娟,劉華,曹建平.  中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2018(06)
[2]十二指腸賈第蟲α-6賈第素的原核表達及純化[J]. 李顯赫,梁金龍,吳娜,宮鵬濤,李建華,楊舉,李赫,張西臣.  中國生物制品學雜志. 2018(05)
[3]我國人體賈第蟲病流行病學及基因分型的研究進展[J]. 劉晴,鄒揚,楊文彬,朱興全,李海龍.  中國病原生物學雜志. 2018(01)
[4]Extra-intestinal and long term consequences of Giardia duodenalis infections[J]. Marie CM Halliez,André G Buret.  World Journal of Gastroenterology. 2013(47)



本文編號:3354399

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