發(fā)布時間：2021-08-20 23:18

　　十二指腸賈第蟲（Giardia duodenalis,簡稱賈第蟲）是一種常見的厭氧原生動物病原體,廣泛引起多種哺乳動物產(chǎn)生胃腸道疾病。賈第蟲能夠?qū)е赂篂a、脹氣、消瘦、大便油膩惡臭等癥狀,并且可能引發(fā)慢性疾病和腸道外并發(fā)癥。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷的創(chuàng)新發(fā)展,賈第蟲的基因疫苗（DNA疫苗）作為一種可能應(yīng)用于防治賈第蟲病的重要方式,其相關(guān)研究也受到了越來越多人的關(guān)注。DNA疫苗目前在動物模型上能夠成功地預(yù)防和治療各種疾病,具有穩(wěn)定,方便和安全的特點,并且能夠引發(fā)機體產(chǎn)生細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答反應(yīng),能夠完善嬰兒的抗體應(yīng)答。pcDNA3.1質(zhì)粒是一種哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體,在真核表達(dá)載體構(gòu)建中已被廣泛應(yīng)用,適用于DNA疫苗的開發(fā)。CpG序列可誘導(dǎo)強烈的Th1樣應(yīng)答,可作為疫苗的佐劑,抵抗各種目標(biāo),包括感染性物質(zhì),腫瘤抗原,過敏原等。賈第素（giardin）是組成賈第蟲細(xì)胞骨架蛋白的重要元素,目前確定的賈第素為α、β、γ和δ-giardin。有關(guān)研究表明α和β-giardin分子均具有較高的免疫原性,γ-giardin為38 kDa的蛋白質(zhì),也許是微絲帶的成分之一。δ-giardin在分子水平上的研究取... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

賈第蟲生活史[48]

arker D1000；1：γ-giardin 基因 PCR 產(chǎn)物；2：δ-giar1000; 1: The PCR product of γ-giardin gene; 2: The PC3-1 γ-giardin 和δ-giardin 基因 PCR 擴增產(chǎn)物電phoretic profile of PCR products of γ-giardin an粒的酶切鑒定結(jié)果GM-T-γ-giardin、pGM-T-δ-giardin1 和 pGM-T-giardin 基因大小為 429 bp，δ-giardin1 和δ-giar（見圖 3-2）。證明 pGM-T-γ-giardin、pGM-T成功。

圖 3-4 γ-giardin 和δ-giardin 在 Vero 細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的間接免疫熒光檢測Fig. 3-4 Indirect immunofluorescence analysis for expression of γ-giardin and δ-giardin in Vero為了進(jìn)一步確認(rèn)重組質(zhì)粒的體外表達(dá)情況，本研究還取轉(zhuǎn)染后的 Vero 細(xì)胞裂解液的上液進(jìn)行 Western Blot，并得到相應(yīng)的條帶，截短后的γ-giardin、δ-giardin 和γ-δ-giardin 表達(dá)分子量大小理論值分別是 16 kDa、15 kDa 和 32 kDa，實驗結(jié)果（見圖 3-5）和預(yù)期理論值符。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]隱孢子蟲和藍(lán)氏賈第鞭毛蟲分子流行病學(xué)研究進(jìn)展[J]. 徐寧,尹建海,沈玉娟,劉華,曹建平.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2018(06)
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[3]我國人體賈第蟲病流行病學(xué)及基因分型的研究進(jìn)展[J]. 劉晴,鄒揚,楊文彬,朱興全,李海龍.  中國病原生物學(xué)雜志. 2018(01)
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本文編號：3354399