牛微小隱孢子蟲感染ELISA和膠體金層析試紙條檢測(cè)方法的建立
發(fā)布時(shí)間:2021-08-20 19:15
隱孢子蟲病是一種呈全球分布的人獸共患寄生蟲病,?筛腥径喾N類型隱孢子蟲,主要包括安氏隱孢子蟲、微小隱孢子蟲、牛隱孢子蟲和瑞氏隱孢子蟲等,其中微小隱孢子蟲感染最為廣泛,犢牛感染后出現(xiàn)腹瀉、營(yíng)養(yǎng)不良等癥狀,且對(duì)人類健康危害最為嚴(yán)重。近年來隨著養(yǎng)牛業(yè)的迅速發(fā)展,牛成為人患微小隱孢子蟲病的主要來源,且目前尚無微小隱孢子蟲的特效藥物和疫苗,所以建立快速準(zhǔn)確的牛微小隱孢子蟲診斷方法,對(duì)畜牧業(yè)的發(fā)展和人類健康安全意義重大。近年來發(fā)現(xiàn)在微小隱孢子蟲的卵囊中存在一種病毒,即為微小隱孢子蟲病毒(Cryptosporidium parvum virus,CSpV1),其在卵囊中存在穩(wěn)定,且數(shù)量較多,可作為牛感染微小隱孢子蟲的重要檢測(cè)指標(biāo)。本研究選用實(shí)驗(yàn)室制備保存的微小隱孢子蟲病毒單克隆抗體作為捕獲抗體,本實(shí)驗(yàn)制備的兔抗微小隱孢子蟲病毒衣殼蛋白多克隆抗體作為檢測(cè)抗體,建立三種檢測(cè)牛糞便樣品的微小隱孢子蟲感染免疫學(xué)診斷方法并進(jìn)行對(duì)比分析,為今后牛微小隱孢子蟲的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)提供參考。雙抗夾心ELISA檢測(cè)方法的建立:首先表達(dá)微小隱孢子蟲病毒衣殼蛋白,制備并純化出兔抗微小隱孢子蟲病毒衣殼蛋白多克隆抗體,以微小隱孢子蟲病...
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
CSpV1PCR產(chǎn)物Fig.1.1PCRproductionofCSpV1
1.2 pMD18-T-CSpV1 雙酶onuclease digestion identifiL15000);1:pMD18-T-CSSalⅠ)L15000);1:Identification ofBamHⅠand SalⅠdigestio子蟲病毒衣殼蛋白表達(dá)載%瓊脂糖凝膠電泳分析,建成功,如圖 1.3。
3 pET-28a-CSpV1-S 雙酶clease digestion identificat0);1:pET-28a-CSpV1-S 雙2:pET-28a-CSpV1-S2000);1:Identification of p SalⅠdigestion;2:pET-28a備誘導(dǎo)、未誘導(dǎo)、空載析,可見誘導(dǎo)的菌液樣表達(dá),且呈沉淀形式表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金壇市農(nóng)村集中式供水隱孢子蟲污染及兒童感染現(xiàn)狀[J]. 樂海華. 江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué). 2016(02)
[2]基于微小隱孢子蟲重組CP15/60蛋白的間接ELISA檢測(cè)方法的建立及上海市豬隱孢子蟲感染情況調(diào)查[J]. 劉宇軒,米榮升,黃燕,于慧珠,胡盼,詹婷婷,周金林,陳兆國(guó). 中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2015(04)
[3]免疫層析納米金試紙研究方法進(jìn)展[J]. 華川,府偉靈. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2013(17)
[4]寄生蟲性腹瀉[J]. 許熾熛. 傳染病信息. 2007(04)
碩士論文
[1]貓弓形蟲感染ELISA和膠體金試紙檢測(cè)方法建立與初步應(yīng)用[D]. 劉維建.吉林大學(xué) 2017
[2]犬細(xì)粒棘球絳蟲感染Dot-ELISA和膠體金試紙條檢測(cè)方法建立[D]. 高珺珊.吉林大學(xué) 2016
[3]微小隱孢子蟲cDNA文庫的構(gòu)建、篩選與間接ELISA檢測(cè)方法的建立[D]. 高依然.吉林大學(xué) 2014
[4]鄭州和開封病人胃腸道主要寄生蟲感染情況調(diào)查及蔬菜表面隱孢子蟲卵囊洗脫方法的建立[D]. 李廷文.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[5]野生動(dòng)物隱孢子蟲的鑒定及隱孢子蟲鈣調(diào)蛋白基因的擴(kuò)增[D]. 王小龍.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]小球隱孢子蟲病毒的鑒定及其特性研究[D]. 陳建寶.中國(guó)人民解放軍軍需大學(xué) 2001
本文編號(hào):3354077
【文章來源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
CSpV1PCR產(chǎn)物Fig.1.1PCRproductionofCSpV1
1.2 pMD18-T-CSpV1 雙酶onuclease digestion identifiL15000);1:pMD18-T-CSSalⅠ)L15000);1:Identification ofBamHⅠand SalⅠdigestio子蟲病毒衣殼蛋白表達(dá)載%瓊脂糖凝膠電泳分析,建成功,如圖 1.3。
3 pET-28a-CSpV1-S 雙酶clease digestion identificat0);1:pET-28a-CSpV1-S 雙2:pET-28a-CSpV1-S2000);1:Identification of p SalⅠdigestion;2:pET-28a備誘導(dǎo)、未誘導(dǎo)、空載析,可見誘導(dǎo)的菌液樣表達(dá),且呈沉淀形式表
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金壇市農(nóng)村集中式供水隱孢子蟲污染及兒童感染現(xiàn)狀[J]. 樂海華. 江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué). 2016(02)
[2]基于微小隱孢子蟲重組CP15/60蛋白的間接ELISA檢測(cè)方法的建立及上海市豬隱孢子蟲感染情況調(diào)查[J]. 劉宇軒,米榮升,黃燕,于慧珠,胡盼,詹婷婷,周金林,陳兆國(guó). 中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào). 2015(04)
[3]免疫層析納米金試紙研究方法進(jìn)展[J]. 華川,府偉靈. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2013(17)
[4]寄生蟲性腹瀉[J]. 許熾熛. 傳染病信息. 2007(04)
碩士論文
[1]貓弓形蟲感染ELISA和膠體金試紙檢測(cè)方法建立與初步應(yīng)用[D]. 劉維建.吉林大學(xué) 2017
[2]犬細(xì)粒棘球絳蟲感染Dot-ELISA和膠體金試紙條檢測(cè)方法建立[D]. 高珺珊.吉林大學(xué) 2016
[3]微小隱孢子蟲cDNA文庫的構(gòu)建、篩選與間接ELISA檢測(cè)方法的建立[D]. 高依然.吉林大學(xué) 2014
[4]鄭州和開封病人胃腸道主要寄生蟲感染情況調(diào)查及蔬菜表面隱孢子蟲卵囊洗脫方法的建立[D]. 李廷文.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[5]野生動(dòng)物隱孢子蟲的鑒定及隱孢子蟲鈣調(diào)蛋白基因的擴(kuò)增[D]. 王小龍.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[6]小球隱孢子蟲病毒的鑒定及其特性研究[D]. 陳建寶.中國(guó)人民解放軍軍需大學(xué) 2001
本文編號(hào):3354077
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