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牛微小隱孢子蟲感染ELISA和膠體金層析試紙條檢測方法的建立

發(fā)布時間:2021-08-20 19:15
  隱孢子蟲病是一種呈全球分布的人獸共患寄生蟲病,?筛腥径喾N類型隱孢子蟲,主要包括安氏隱孢子蟲、微小隱孢子蟲、牛隱孢子蟲和瑞氏隱孢子蟲等,其中微小隱孢子蟲感染最為廣泛,犢牛感染后出現腹瀉、營養(yǎng)不良等癥狀,且對人類健康危害最為嚴重。近年來隨著養(yǎng)牛業(yè)的迅速發(fā)展,牛成為人患微小隱孢子蟲病的主要來源,且目前尚無微小隱孢子蟲的特效藥物和疫苗,所以建立快速準確的牛微小隱孢子蟲診斷方法,對畜牧業(yè)的發(fā)展和人類健康安全意義重大。近年來發(fā)現在微小隱孢子蟲的卵囊中存在一種病毒,即為微小隱孢子蟲病毒(Cryptosporidium parvum virus,CSpV1),其在卵囊中存在穩(wěn)定,且數量較多,可作為牛感染微小隱孢子蟲的重要檢測指標。本研究選用實驗室制備保存的微小隱孢子蟲病毒單克隆抗體作為捕獲抗體,本實驗制備的兔抗微小隱孢子蟲病毒衣殼蛋白多克隆抗體作為檢測抗體,建立三種檢測牛糞便樣品的微小隱孢子蟲感染免疫學診斷方法并進行對比分析,為今后牛微小隱孢子蟲的動態(tài)監(jiān)測提供參考。雙抗夾心ELISA檢測方法的建立:首先表達微小隱孢子蟲病毒衣殼蛋白,制備并純化出兔抗微小隱孢子蟲病毒衣殼蛋白多克隆抗體,以微小隱孢子蟲病... 

【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】:77 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

牛微小隱孢子蟲感染ELISA和膠體金層析試紙條檢測方法的建立


CSpV1PCR產物Fig.1.1PCRproductionofCSpV1

蟲病,衣殼蛋白,雙酶,瓊脂糖凝膠電泳


1.2 pMD18-T-CSpV1 雙酶onuclease digestion identifiL15000);1:pMD18-T-CSSalⅠ)L15000);1:Identification ofBamHⅠand SalⅠdigestio子蟲病毒衣殼蛋白表達載%瓊脂糖凝膠電泳分析,建成功,如圖 1.3。

雙酶,菌液


3 pET-28a-CSpV1-S 雙酶clease digestion identificat0);1:pET-28a-CSpV1-S 雙2:pET-28a-CSpV1-S2000);1:Identification of p SalⅠdigestion;2:pET-28a備誘導、未誘導、空載析,可見誘導的菌液樣表達,且呈沉淀形式表

【參考文獻】:
期刊論文
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[2]基于微小隱孢子蟲重組CP15/60蛋白的間接ELISA檢測方法的建立及上海市豬隱孢子蟲感染情況調查[J]. 劉宇軒,米榮升,黃燕,于慧珠,胡盼,詹婷婷,周金林,陳兆國.  中國動物傳染病學報. 2015(04)
[3]免疫層析納米金試紙研究方法進展[J]. 華川,府偉靈.  國際檢驗醫(yī)學雜志. 2013(17)
[4]寄生蟲性腹瀉[J]. 許熾熛.  傳染病信息. 2007(04)

碩士論文
[1]貓弓形蟲感染ELISA和膠體金試紙檢測方法建立與初步應用[D]. 劉維建.吉林大學 2017
[2]犬細粒棘球絳蟲感染Dot-ELISA和膠體金試紙條檢測方法建立[D]. 高珺珊.吉林大學 2016
[3]微小隱孢子蟲cDNA文庫的構建、篩選與間接ELISA檢測方法的建立[D]. 高依然.吉林大學 2014
[4]鄭州和開封病人胃腸道主要寄生蟲感染情況調查及蔬菜表面隱孢子蟲卵囊洗脫方法的建立[D]. 李廷文.河南農業(yè)大學 2013
[5]野生動物隱孢子蟲的鑒定及隱孢子蟲鈣調蛋白基因的擴增[D]. 王小龍.安徽農業(yè)大學 2010
[6]小球隱孢子蟲病毒的鑒定及其特性研究[D]. 陳建寶.中國人民解放軍軍需大學 2001



本文編號:3354077

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