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豬傳染性胃腸炎病毒HQ2016毒株全基因組測(cè)序及半巢式RT-PCR檢測(cè)方法建立

發(fā)布時(shí)間:2021-08-20 10:49
  豬傳染性胃腸炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)作為豬傳染性胃腸炎病原,是一種急性、高度接觸性傳染病,該病以嘔吐、水樣腹瀉、脫水和對(duì)兩周齡內(nèi)死亡率較高(通常為100%)為特征。TGEV常在每年冬季和春季呈暴發(fā)流行,給養(yǎng)豬業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。為了獲得臨床分離毒株TGEV HQ2016全基因組序列,本研究利用Illumina二代測(cè)序法對(duì)TGEV HQ2016毒株進(jìn)行全基因組測(cè)序,該毒株全序列長(zhǎng)度為28 585 nt,全序列由5’端到3’端符合ORF(1a/1b)-S-3a-3b-sM-M-N-ORF7’的順序。全序列分析顯示TGEV HQ2016毒株核苷酸序列與AYU、HX、WH-1、PUR46-MAD、Purdue毒株同源性最高(100%)。全基因組進(jìn)化樹顯示TGEV HQ2016毒株與Purdue普系毒株親緣關(guān)系較近,與Miller譜系毒株的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。重組性分析結(jié)果顯示,TGEV HQ2016毒株中不存在重組區(qū)域。為建立一種檢測(cè)豬傳染性胃腸炎病毒的半巢式RT-PCR方法,本研究利用TGEV HQ2016與已發(fā)表于GenBank... 

【文章來源】:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

豬傳染性胃腸炎病毒HQ2016毒株全基因組測(cè)序及半巢式RT-PCR檢測(cè)方法建立


TGEVS基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

基因,毒株,核苷酸,缺失


豬傳染性胃腸炎病毒HQ2016毒株全基因組測(cè)序及半巢式RT-PCT檢測(cè)方法建立14AHHF、H16為丙氨酸,JS2012、attentuatedH、MillerM6、TS、PUR46-MAD為絲氨酸(圖2-3)。序列分析表明TGEVHQ2016毒株在E、M和N中均沒有缺失或者插入,核苷酸與Purdue群的毒株比較也沒有發(fā)現(xiàn)突變。圖2-1TGEVS基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)Fig.2-1ThepropertyofTGEVSgene在1123nt-1128nt的位置TGEVHQ2016毒株與AYU、SC-Y、SHS、HX、WH-1、PUR46-MAD、HE-1、PurdueP115、Z、HB、Mex-145、Purdue相同,缺失6nt的核苷酸(圖2-1)The6ntdeletioninSgeneofAYU,SC-Y,SHSB,HX,WH-1,PUR46-MAD、HE-1,PurdueP115,Z,HB,Mex-145andPurduewasfoundintheTGEVHQ2016stain(Fig.2-1).GroupPurdueGroupMiller圖2-2TGEVS基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)Fig.2-2ThepropertyofTGEVSgeneTGEVHQ2016毒株在2387-2389nt位置不存在連續(xù)3nt的核苷酸缺失現(xiàn)象與attentuatedH、H16、AHHF不同(圖2-2)。The3ntdeletioninSgenewasnotfountintheTGEVHQ2016strain,WhichhasfoundinstrainvirulentPurdue、AHHF、JS2012(Fig.2-2).GroupPurdueGroupMiller

譜系,基因,毒株,氨基酸


TGEVHQ2016的全基因組分析15GroupPurdueGroupMiller圖2-3TGEVS基因結(jié)構(gòu)特點(diǎn)Fig.2-3ThepropertyofTGEVSgene在585位氨基酸,HQ2016、AYU、SC-Y、SHSB、HX、WH-1、HE-1、PurdueP115、Z、HB、Mex-145、Purdue、Virulent-Purdue、AHHF、H16為丙氨酸,JS2012、attentuatedH、MillerM6、TS、PUR46-MAD為絲氨酸(圖2-3)。TGEVHQ2016strainhadaalaineresidueatacide585ofSprotein,whichwasaslobeenfoundintheAYU,SC-Y,SHSB,HX,WH-1,PUR46-MAD,HE-1,PurdueP115,Z,HB,Mex-145,Purdue,Virulent-Purdue,AHHF,H16,whilethevirulentpurdue,JS2012,attentuatedH,MillerM6,TShadaserineresidue(Fig.2-3).2.3.3非結(jié)構(gòu)基因分析TGEVHQ2016毒株的ORF1a基因分別編碼4017個(gè)氨基酸和ORF1b編碼2068個(gè)氨基酸,序列分析結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)毒株ORF3a編碼71個(gè)氨基酸,ORF3b編碼244個(gè)氨基酸,Miller譜系毒株attenuatedH,H16,MillerM6,TS和JS2012在ORF3a的起始密碼子“ATG”前有16nt的缺失,在終止密碼子“TAA”前和29nt的缺失,而TGEVHQ2016毒株與Purdue群相同不存在這兩個(gè)位置的缺失(圖2-4)。GroupPurduedGroupMiller

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[5]豬瘟病毒巢式RT-PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 劉梅芬,王淑娟,閆若潛,王東方,曹偉偉,趙雪麗,李勤楠,李寧.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2016(09)
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碩士論文
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本文編號(hào):3353360

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