棉酚是一種從棉籽中提取出來的一種多酚類化合物,由于具有抗炎、抗病毒、抗寄生蟲、抗腫瘤等作用越來越受人們的重視,同時(shí)棉酚也具有毒性作用,特別是生殖毒性,然而近幾年對(duì)于生殖毒性的研究甚少,因此我們研究了棉酚生殖毒性的分子作用機(jī)制。為了探究不同濃度棉酚對(duì)小鼠睪丸組織抗氧化酶活性的影響,及對(duì)相關(guān)凋亡蛋白NF-κB（P65）,P53,Caspase-3表達(dá)的影響,旨在進(jìn)一步了解棉酚的生殖毒性作用機(jī)制。本試驗(yàn)將48只7周齡,體重為25.53±1.45 g的成年小鼠隨機(jī)分成4組,每組12只,分為對(duì)照組:CG（1%CMC-Na）、低劑量組:LG（40 mg·kg-1·d-1棉酚）、中劑量組:MG（80 mg·kg-1·d-1棉酚）和高劑量組:HG（120 mg·kg-1·d-1棉酚）,連續(xù)灌胃20 d后處死,取睪丸稱重并計(jì)算臟器指數(shù),睪丸組織SOD、GSH-Px活性及MDA含量采用分光光度法測(cè)定,用熒光定量PCR方法分析睪丸組織NF-κB（P65）,P53,Caspase-3 mRNA的表達(dá)水平。用western-blot方法分析睪丸組織NF-κB（P65）,P53,Caspase-3蛋白的表達(dá)水平。... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 棉酚的性質(zhì)
    1.2 棉酚的藥理作用
        1.2.1 棉酚的抗腫瘤作用
        1.2.2 棉酚的抗病毒作用
        1.2.3 棉酚的抗炎活性
        1.2.4 棉酚的抗寄生蟲活性
    1.3 棉酚毒性
        1.3.1 棉酚的生殖毒性
        1.3.2 棉酚的免疫毒性
    1.4 氧化應(yīng)激作用
        1.4.1 氧化應(yīng)激概述
        1.4.2 棉酚對(duì)氧化應(yīng)激的作用
    1.5 細(xì)胞凋亡
        1.5.1 細(xì)胞凋亡概述
        1.5.2 細(xì)胞凋亡途徑
        1.5.3 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白
        1.5.4 棉酚對(duì)線粒體能量代謝的影響
    1.6 試驗(yàn)研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 動(dòng)物分組及處理
    2.3 主要儀器與試劑
        2.3.1 主要儀器及設(shè)備
        2.3.2 主要試驗(yàn)試劑及其它
    2.4 試驗(yàn)內(nèi)容與方法
        2.4.1 動(dòng)物組織的采集
        2.4.2 組織勻漿的制備
        2.4.3 組織蛋白濃度的測(cè)定
        2.4.4 總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性測(cè)定
        2.4.5 谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性測(cè)定
        2.4.6 MDA含量測(cè)定
        2.4.7 采用QRT-PCR檢測(cè)睪丸中NF-κB,P53和Caspase-3 m RNA的表達(dá)
        2.4.8 采用western-blot檢測(cè)睪丸NF-κB,P53和Caspase-3 m RNA水平
    2.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理與分析
3 結(jié)果
    3.1 棉酚對(duì)小鼠體重及臟器指數(shù)的影響
        3.1.1 棉酚對(duì)小鼠體重的影響
        3.1.2 棉酚對(duì)小鼠睪丸臟器指數(shù)的影響
    3.2 棉酚對(duì)小鼠睪丸組織SOD,GSH-PX活性和MDA含量的影響
        3.2.1 棉酚對(duì)小鼠睪丸組織SOD活性的影響
        3.2.2 棉酚對(duì)小鼠睪丸組織GSH-Px活性的影響
        3.2.3 棉酚對(duì)小鼠睪丸組織MDA含量的影響
    3.3 小鼠睪丸組織中NF-ΚB,P53和CASPASE-3 MRNA表達(dá)情況
        3.3.1 小鼠睪丸組織總RNA的純度測(cè)定
        3.3.2 不同濃度棉酚對(duì)小鼠睪丸組織中NF-κB（P65）mRNA表達(dá)的影響
        3.3.3 不同濃度棉酚對(duì)小鼠睪丸組織中P53 mRNA表達(dá)的影響
        3.3.4 不同濃度棉酚對(duì)小鼠睪丸組織中Caspase-3 m RNA表達(dá)的影響
    3.4 小鼠睪丸組織中NF-ΚB,P53和CASPASE-3 蛋白表達(dá)情況
        3.4.1 睪丸組織中核蛋白NF-κB（P65）表達(dá)情況
        3.4.2 睪丸組織中全蛋白NF-κB（P65）表達(dá)的影響
        3.4.3 睪丸組織中核蛋白P53表達(dá)情況
        3.4.4 睪丸組織中全蛋白P53表達(dá)情況
        3.4.5 睪丸組織中蛋白Caspase-3 表達(dá)情況
    3.5 睪丸組織中抗氧化酶活性與相關(guān)基因MRNA表達(dá)的相關(guān)性分析
4 討論
    4.1 棉酚引起小鼠中毒的臨床及病理表現(xiàn)
    4.2 棉酚對(duì)小鼠體重及臟器指數(shù)的影響
    4.3 棉酚對(duì)小鼠睪丸組織抗氧化能力的影響
    4.4 棉酚對(duì)小鼠睪丸組織中P53,NF-ΚB和CASPASE-3 表達(dá)水平的影響
    4.5 對(duì)棉酚引起的氧化應(yīng)激作用和蛋白表達(dá)的深入分析
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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