為建立同時(shí)快速鑒別檢測塞內(nèi)卡病毒A（SVA）和腦心肌炎病毒（EMCV）的方法,根據(jù)SVA和EMCV高度保守的3D基因區(qū)域,分別設(shè)計(jì)了2對(duì)特異性引物和帶2種不同發(fā)光基團(tuán)標(biāo)記的TaqMan探針,建立同時(shí)檢測這2種病毒核酸的雙重TaqMan熒光定量PCR方法,并對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果顯示,該檢測方法對(duì)SVA和EMCV的最低檢測量分別為760 copies/μL和98 copies/μL,并且能夠特異性檢測出SVA和EMCV,而對(duì)豬繁殖和呼吸障礙綜合征病毒（PRRSV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬瘟病毒（CSFV）等檢測結(jié)果均為陰性。本方法中所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系,重復(fù)性試驗(yàn)組內(nèi)和組間變異系數(shù)均低于5%,說明該檢測方法重復(fù)性高。本研究所建立的雙重?zé)晒舛縋CR具有方便、快速、特異性好、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),能夠用于SVA和EMCV的同時(shí)檢測。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

SVA與EMCV重組質(zhì)粒的標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 雙重?zé)晒舛縋CR方法的特異性試驗(yàn)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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