旨在探究腦心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus,EMCV）是否通過內(nèi)吞途徑以及通過何種內(nèi)吞途徑感染細(xì)胞,分別采用內(nèi)吞途徑抑制劑、網(wǎng)格蛋白抑制劑、巨胞飲途徑抑制劑和肌動(dòng)蛋白抑制劑作用于Hela細(xì)胞后接種EMCV,通過TCID₅₀、qRT-PCR和Western blot等方法檢測(cè)病毒感染是否受影響。結(jié)果顯示,內(nèi)吞途徑抑制劑和肌動(dòng)蛋白抑制劑作用于Hela細(xì)胞后,TCID₅₀、qRT-PCR和Western blot等檢測(cè)結(jié)果提示EMCV的感染受到抑制。表明EMCV可通過肌動(dòng)蛋白參與的內(nèi)吞途徑感染Hela細(xì)胞。 

【文章來源】：西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,29(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

抑制劑濃度篩選

用適宜濃度的內(nèi)吞途徑抑制劑NH4Cl和Bafilomycin A1分別作用于Hela細(xì)胞后接毒,收集感染后24 h的上清檢測(cè)病毒滴度和病毒拷貝數(shù),收集細(xì)胞檢測(cè)VP1含量,以未加抑制劑的細(xì)胞接毒作為對(duì)照組。如圖 2所示,經(jīng)20 mmol/L NH4Cl作用后,VP1相對(duì)蛋白含量和病毒滴度下降不顯著(P>0.05),但病毒拷貝數(shù)顯著降低 (P<0.05);經(jīng)40 mmol/L NH4Cl作用后,VP1相對(duì)蛋白含量、病毒滴度和病毒拷貝數(shù)顯著下降(P<0.01,P<0.001)。經(jīng)10 nmol/L Bafilomycin A1作用后,VP1相對(duì)蛋白含量、病毒滴度和病毒拷貝數(shù)均顯著下降(P<0.05,P<0.01);經(jīng)20 nmol/L Bafilomycin A1作用后,VP1相對(duì)蛋白含量、病毒滴度和病毒拷貝數(shù)下降更加明顯(P<0.001)。從總體趨勢(shì)來看,內(nèi)吞途徑抑制劑NH4Cl和Bafilomycin A1可以抑制EMCV感染Hela細(xì)胞。2.3 EMCV感染Hela細(xì)胞網(wǎng)格蛋白依賴型內(nèi)吞途徑檢測(cè)

使用適合濃度巨胞飲途徑抑制劑IPA-3和Wortmannin作用于Hela細(xì)胞后接種EMCV,收集上清檢測(cè)病毒滴度和病毒拷貝數(shù)。如圖4所示,經(jīng)過IPA-3和Wortmannin作用后病毒滴度和病毒拷貝數(shù)下降不顯著(P>0.05),提示巨胞飲途徑抑制劑IPA-3和Wortmannin不影響EMCV感染Hela細(xì)胞。圖4 巨胞飲途徑抑制劑作用于Hela細(xì)胞對(duì)EMCV感染細(xì)胞的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]口蹄疫病毒可視化RT-LAMP檢測(cè)方法的建立[J]. 王韋華,劉桂梅,吳奇強(qiáng),黃鵬波,白鴿,王國超.  西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(12)
[2]細(xì)胞內(nèi)吞的研究進(jìn)展[J]. 范真真,陳虹,黃秉仁.  生命的化學(xué). 2014(04)



本文編號(hào)：3347368