食欲素A（Orexin A）是近年來發(fā)現(xiàn)的—種由下丘腦分泌的神經(jīng)肽,參與機體生殖、神經(jīng)內(nèi)分泌、能量代謝、攝食及內(nèi)臟等生命活動中。目前已證實外加OrexinA可以影響綿羊卵巢黃體化顆粒細胞分泌孕酮,且這種影響是通過上調(diào)細胞內(nèi)cAMP濃度達到的,但是否經(jīng)由PKA-CREB信號通路則未見報道,因此本試驗應(yīng)用ELISA、Western blot、免疫熒光、免疫組化的方法對OrexinA影響綿羊卵巢黃體化顆粒細胞分泌孕酮的過程是否經(jīng)由PKA-CREB信號通路進行研究,以期為Orexin A調(diào)節(jié)綿羊生殖功能提供理論參考。參照本實驗室已經(jīng)建立的綿羊卵巢顆粒細胞培養(yǎng)體系培養(yǎng)細胞,對細胞進行吉姆薩染色及顆粒細胞特有的卵泡刺激素（FSHR）免疫熒光鑒定;CREB特異性抗體免疫組化染色確定及定位CREB;聯(lián)合添加卵泡刺激素（FSH）、促黃體素（LH）、雌二醇（E2）使顆粒細胞黃體化,并進行鑒定;黃體化顆粒細胞和外加Orexin A的黃體化顆粒細胞經(jīng)不同濃度（100 nmol/L、1 μLmol/L、10 μLmol/L）CREB 抑制劑（666-15）（HY-101120）處理后ELISA測定其孕酮分泌量,... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１綿羊卵巢顆粒細胞??Ｆｉｇｕｒｅ．?１?Ｏｖｉａｎ?ｇｒａｎ＾ｉＬｏｓａ?ｃｅｌｌｓ??

圖３綿羊卵巢黃體化顆粒細胞鑒定??Ｆｉｇｕｒｅ．?３?Ｉｄｅｎｌｉｆｉｃａｌｉｏｎ?ｏｆｌｕｔｃｉｎｉ／．ａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｏｖａｒｉａｎ?ｇｒａｎ｜．ｉＬｏｓａ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎ?ｓｈｅｅｐ??

圖５不同濃度６６６－１５對黃體化綿羊卵巢顆粒細胞分泌孕酮的影響??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3345551