社會經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活水平的提高使人們更加注重畜產(chǎn)品的安全、美味和健康。在快速生長型肉雞帶來的負面影響的背景下，地方品種肉雞以其肉質(zhì)味道可口、營養(yǎng)健康受到廣大消費者的偏愛。肝臟作為家禽代謝、免疫的重要器官，參與蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪代謝等各種生理生化反應(yīng)。因此，肝臟可作為研究物質(zhì)代謝合適的靶器官，肝臟表達所有蛋白質(zhì)的整體研究對了解其代謝變化具有積極的意義。本試驗采用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，建立14日齡、28日齡、42日齡AA肉雞（公雞）和莊河大骨雞（公雞）肝臟發(fā)育變化的蛋白質(zhì)組圖譜，通過不同品種、不同階段蛋白質(zhì)圖譜差異研究，找出AA肉雞和莊河大骨雞肝臟不同發(fā)育階段差異表達的蛋白質(zhì)，并對差異表達的蛋白進行鑒定、分類、表達量聚類和蛋白質(zhì)相互作用關(guān)系的網(wǎng)絡(luò)分析，為揭示AA肉雞和莊河大骨雞生長發(fā)育及代謝調(diào)控等生命活動的分子機理奠定基礎(chǔ)，為肉雞選育起到積極的推動作用。試驗結(jié)果顯示AA肉雞肝臟發(fā)育的三個階段分別檢測到了364個、442個、475個蛋白，大骨雞肝臟發(fā)育三個階段分別檢測到了363個、435個、400個蛋白，說明AA肉雞肝臟蛋白表達呈逐漸增多的趨勢，在42日齡達到最高峰，而大骨雞在28日齡達... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

脂肪酸的生物合成過程

圖 1.1 蛋白質(zhì)濃度測定標準曲線Figure 1.1 Standard curve1.7 雙向電泳（2-DE）分析1.7.1 肉仔雞肝臟蛋白質(zhì) 2-DE 條件的優(yōu)化為得到較滿意的 2-DE 圖譜，蛋白點分離較好且清晰可見，本研究對肉仔雞肝臟蛋白質(zhì) 2-DE條件進行了摸索、調(diào)整和優(yōu)化。最終得出 IPG 膠條選擇 17cm 非線性膠條為最佳膠條，考馬斯亮藍 G-250 染色蛋白質(zhì)最佳上樣量為 500ug。1.7.2 肉仔雞肝臟蛋白質(zhì) 2-DE 分析(l) 從冰箱中取出蛋白樣品，超聲處理 30sec/次×4 次，充分溶解蛋白，超聲后在冰浴中冷卻 30sec，4℃，15000g 離心 10min。17cm IPG 膠條于室溫解凍 20min。取水化上樣液，室溫融化后，加入2.5ul 40%Bio-lyte(pH3-10)，漩渦混勻。取水化上樣液與蛋白樣品溶液以 4:1 混勻為上樣液。(2) 不斷摸索條件后，確定 17cm 膠條上樣體積為 420ul，蛋白含量為 500ug，吸取樣品，緩緩加入聚焦槽中，注意樣品內(nèi)不能存有氣泡，小心用鑷子揭開膠條的保護膜，膠面朝下，膠條的+、﹣級應(yīng)與聚焦盤的+、﹣級保持一致，使膠條與上樣液充分接觸，滴加礦物油覆蓋膠條，蓋好聚

圖 2.1 不同日齡 AA 肉雞肝臟 2-DE 蛋白質(zhì)表達圖譜。14 days，28 days，42 days 分別對應(yīng) 14 日齡、28 日齡、42日齡。肝臟 3 個日齡分別檢測到 364 個、442 個、475 個蛋白。每個樣品上樣量 500μg，CBBG-250 染色。圖中數(shù)字標出的點為鑒定蛋白點。Figure 2.1 Profile of the 2-DE analysis of the liver of AA broiler at different developmental time Points.14 days,28days,42 days are the protein Profile corresponding to 14 days,28 days,42 days,respectively.There are 364, 442, and 475proteins to have been detected on 14 days,28 days,42 days. 500μg per each sample were subjected to 2-DE and stained byCBB G·250. The marked spots are identifed.

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3344795