狂犬病是由狂犬病病毒（Rabies virus，RABV）感染引起的疾病，能夠?qū)е麓蠖鄶?shù)哺乳動物的急性致死性腦脊髓炎。全球每年至少有五萬五千人死于狂犬病，中國每年有約有2000人因感染狂犬病病毒死亡。我國的狂犬病病毒傳染源主要是犬，每年也有少量家畜和野生動物感染狂犬病死亡。目前，狂犬病尚無有效的治療方法，接種疫苗是最有效的預(yù)防狂犬病的途徑。為進一步了解狂犬病病毒生物學特性，本實驗對12株狂犬病病毒街毒株的增殖特性進行分析，篩選出6株能夠在動物體內(nèi)外穩(wěn)定增殖的病毒。根據(jù)這6株病毒對動物的致病能力不同，篩選出一株毒力最高的RABV街毒株進行小鼠和犬的感染實驗。主要研究內(nèi)容包括：1．我國狂犬病病毒街毒株的培養(yǎng)和增殖特性比較研究12株我國不同地區(qū)來源的狂犬病病毒街毒株在細胞上和乳鼠腦內(nèi)的增殖特性，分別通過細胞培養(yǎng)和乳鼠顱內(nèi)接種法進行連續(xù)傳代，測定病毒不同代次的TCID50。其中6株病毒在經(jīng)過細胞連續(xù)傳代培養(yǎng)20代和乳鼠腦內(nèi)接種傳代10代后，病毒滴度穩(wěn)定升高并趨于穩(wěn)定，HuNPB3株毒力最高也最穩(wěn)定，病毒滴度可達105.97TCID50/g和107.97TCID50/mL。另外6株病毒經(jīng)過三次細... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

病毒在乳鼠腦內(nèi)的增殖Figure1.3Rabiesvirusproliferationinsucklingmicebraintissue

程中病毒滴度最穩(wěn)定。YN01，GDMMD57，SXYQ，SDJN02，TJD05 5 株病毒滴度隨細胞傳代次數(shù)增加而升高，細胞傳代至第 15 代后病毒滴度趨于穩(wěn)定，不再增長（圖 1.5）。HuNPB3 株病毒滴度由第一代的 105.80TCID50/mL 上升并穩(wěn)定于 107.97TCID50/mL，YN01 株病毒滴度由第一代的 101.97TCID50/mL 上升并穩(wěn)定于 107.30TCID50/mL，GDMMD57 株病毒滴度由第一代的 102.50TCID50/mL 上升并穩(wěn)定于 107.30TCID50/mL，SXYQ 株病毒滴度由第一代的 101.67TCID50/mL 上升并穩(wěn)定于 106.80TCID50/mL，SDJN02 株病毒滴度由第一代的 102.90TCID50/mL 上升并穩(wěn)定于 105.97TCID50/mL，TJD05 株病毒滴度由第一代的 102.30TCID50/mL上升并穩(wěn)定于 105.97TCID50/mL。

圖 1.6 第 20 代病毒在 N2a 細胞上的生長曲線Figure 1.6 The growth curve on N2a cell of the twentieth generation rabies virus4 討論狂犬病病毒的體內(nèi)外培養(yǎng)是狂犬病病毒疫苗研究和致病機理研究的基礎(chǔ)，雖然大多數(shù)的細胞系都對狂犬病病毒易感，但由于狂犬病病毒的嗜神經(jīng)性，N2a細胞是觀察病毒的細胞感染和研究病毒體外致病性的最佳模型。病毒在 BHK 等細胞系上傳代可能會造成病毒的毒力下降和基因的改變。相對于成鼠，乳鼠對RABV 的敏感性更高，乳鼠腦組織研磨液注射其他動物引起的過敏反應(yīng)也更小。在馴化 RABV 街毒株過程中，為降低病毒的毒力，減小病毒的動物致死性，可能選取 BHK 細胞或兔腦內(nèi)傳代法進行病毒培養(yǎng)，最終篩選出符合要求的固定毒。國內(nèi)流行毒株 JX08-45 在經(jīng)過 BHK 細胞適應(yīng)性培養(yǎng)后[57]，病毒對成鼠的致死率大大降低。本實驗為盡量減小對街毒株生物學特性的影響，選用了 N2a 細胞

【參考文獻】：
期刊論文
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