豬瘟（CSF）是一種具有高度傳染性和致死性的傳染病，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經濟損失。目前我國控制豬瘟的方法主要是疫苗預防和撲殺患病動物，雖然收到了明顯的防疫效果，但慢性豬瘟和非典型豬瘟在我國仍不斷發(fā)生，給豬瘟的防疫帶來了困難和新的問題。因此，探究豬瘟病毒復制增殖機制及其與宿主細胞的相互作用關系，將會為揭示豬瘟病毒的致病機制和探索有效防控方法提供理論依據。本研究圍繞豬瘟病毒的非結構蛋白NS5B（依賴RNA的RNA聚合酶）和膜受體蛋白整合素β3展開研究，主要探究兩者在豬瘟病毒感染及增殖中的作用及其調控機制，獲得了以下幾結果：1.豬瘟病毒NS5B在人293T細胞中表達并表現(xiàn)出RNA聚合酶活性。在沒有其他豬瘟病毒蛋白和豬瘟病毒基因組存在的前提下，利用宿主細胞的模板RNA合成了RNA，該RNA可被RIG-I識別并致使細胞產生內源性免疫反應。體外表達的NS5B蛋白可以利用人工合成的異源RNA模板從頭起始合成RNA。根據預測的豬瘟病毒NS5B的二級和三級結構，設計了8個豬瘟病毒活性區(qū)域的突變體，體外RNA合成試驗證明，突變體K282R的RNA聚合酶活性增強，其他突變體K283R、R285K、I287V... 

【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

整合素的結構模式圖

B CA 合成所用的模板 RNA；（B）CSFV NS5B 與 HCV1b 株 NS5B 活CSFV NS5B^24 的聚合酶活性梯度鑒定late RNAused in the in vitro RNAsynthesis assay; （B）The compariB from HCV and CSFV; （C） CSFV NS5B^24 titration to find the apconcentration for in vitro RNA synthesis assay圖 2-8 體外 RNA 合成試驗檢測豬瘟病毒 NS5B^24 的聚合酶活性-8 In vitro RNA synthesis to detect the polymerase activity of CSFV NS

C（A）先轉染豬瘟病毒 NS5B 后加入藥物和先加入藥物再轉染 NS5B 質粒對 CSFV NS5B 功能的影響檢測；（B）vx222 梯度稀釋后檢測對豬瘟病毒 NS5B 的抑制效果；（C）HCV796 梯度稀釋后檢測對豬瘟病毒 NS5B 的抑制效果（A）the difference of the inhibition to CSFV NS5B activity when first transfect the plasmids or first addthe drugs;（B）Titration of vx222 in inhibiting CSFV NS5B;（C）Titration of HCV796 in inhibiting CSFNS5B圖 2-10 抑制豬瘟病毒 NS5B 的藥物篩選Fig. 2-10 Screen for the inhibitors of CSFV NS5B26

【參考文獻】：
期刊論文
[1]αV integrin:A new gastrin target in human pancreatic cancer cells[J]. Celine Cayrol,Claudine Bertrand,Aline Kowalski-Chauvel,Laurence Daulhac,Elizabeth Cohen-Jonathan-Moyal,Audrey Ferrand,Catherine Seva.  World Journal of Gastroenterology. 2011(40)



本文編號：3343554