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多殺性巴氏桿菌OmpH與溶血性曼氏桿菌lktA蛋白的融合表達(dá)與免疫原性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-14 22:55
  牛呼吸道疾病綜合癥(Bovine respiratory disease complex,BRDC)是牛的一種急性呼吸道疾病,目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者普遍認(rèn)為它是由于環(huán)境的突然變化、應(yīng)激、運(yùn)輸?shù)榷喾N因素引發(fā)的,每年給養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)巨大損失。多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multocida)和溶血性曼氏桿菌(Mannheimia haemolytica)是引起牛呼吸道疾病綜合癥(BRDC)的重要病原,還可引起牛的出血性敗血癥(Haemorrhagic Septicaemia)和纖維素性肺炎(Fibrinouspneumonia),給養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)巨大損失。臨床抗生素的濫用使得耐藥菌株不斷的出現(xiàn),給臨床治療帶來(lái)巨大困難。因此,疫苗接種有望成為預(yù)防和控制這兩種病原感染的主要措施。研究表明OmpH是多殺性巴氏桿菌最主要的免疫原,可以刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體,能抵抗病原菌的挑戰(zhàn),白細(xì)胞毒素(LKT)是溶血性曼氏桿菌最重要的毒力因子,LKT的多克隆抗體能夠?qū)ν吹钠渌逍吞峁┙徊姹Wo(hù)。本研究擬通過(guò)大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)出具有生物學(xué)活性的M.haemolytica白細(xì)胞毒素蛋白(lktA)及l(fā)ktA與P.mu... 

【文章來(lái)源】:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】:72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

多殺性巴氏桿菌OmpH與溶血性曼氏桿菌lktA蛋白的融合表達(dá)與免疫原性研究


lktA的PCR產(chǎn)物的電泳分析

重組質(zhì)粒,克隆載體,產(chǎn)物,PCR鑒定


圖 2-1 lktA 的 PCR 產(chǎn)物的電泳分析A 的 PCR 產(chǎn)物,744bp;2:陰性對(duì)照;M:DNA Marker Fig. 2-1 Agarose gel electrophoresis of the PCR product of lkt product of lktA, 744 bp; 2: Negative control; M: DNA Marker質(zhì)粒為模板,對(duì)重組克隆 lktA -pMD1片段大小相符的條帶;將 lktA-pMD凝膠電泳,出現(xiàn)大小分別為 2662 bp2-2 所示:

重組質(zhì)粒,表達(dá)載體,酶切鑒定,樣品處理


ktA-pET-28a 表達(dá)載體重組質(zhì)粒的酶切鑒定和 PCRpET-28a 重組質(zhì)粒酶切結(jié)果;2:lktA-pET-28a 重組質(zhì)粒 PC of lktA-pET-28a plasmid by nucleate endonuclease dtA-pET-28a plasmids digested; 2: lktA-pET-28a PCR product, 7表達(dá)及純化結(jié)果 的樣品處理后進(jìn)行 SDS-PAGE,結(jié)果純化后的蛋白在約 34 kDa 處有表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]細(xì)菌性牛呼吸道疾病的研究進(jìn)展[J]. 韓猛立,康立超,鐘發(fā)剛,黃新,譚鵬飛.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2013(05)
[2]牛呼吸道疾病綜合征的主要病原[J]. 劉志鵬,董秀梅,師東方,王宇.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2012(12)
[3]溶血性曼氏桿菌致病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 陳艷紅,顏忠,查振林,姚晶,蓋新娜.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(12)
[4]多殺性巴氏桿菌毒力因子、免疫原及重要基因研究進(jìn)展[J]. 王帥濤,宮強(qiáng),秦翠麗.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(03)
[5]溶血性曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒的研制及初步應(yīng)用[J]. 徐慧,韋莉,佟瑞平,龔玉梅,王宏俊,孫惠玲,張培君.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(01)
[6]曼氏桿菌。∕annheimiosis)[J]. 王萍萍,高銳,張偉,黃艷.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2007(10)
[7]溶血性曼氏桿菌毒素的作用及其分子致病機(jī)理[J]. 張永久,王萍萍,武廣文.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2007(07)

碩士論文
[1]App菌影裝載多殺性巴氏桿菌OmpH外膜蛋白DNA疫苗的研究[D]. 孫穎.天津農(nóng)學(xué)院 2011
[2]綿羊溶血性曼氏桿菌滅活疫苗的制作及其免疫效力的檢測(cè)[D]. 毛東風(fēng).西北民族大學(xué) 2007



本文編號(hào):3343328

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