J亞群禽白血病病毒（Subgroup J Avian leukosis Virus,ALV-J）是上世紀(jì)90年代從肉用型雞群中分離的一種由反轉(zhuǎn)錄病毒引起的高度傳染性的新型禽白血病病毒,主要引起骨髓細(xì)胞瘤。1999年我國首次從白羽肉雞中分離出該病毒。目前已出現(xiàn)大量在我國地方品系雞群以及蛋雞中關(guān)于ALV-J感染的報道?ALV-J的廣泛傳播,已給我國養(yǎng)禽業(yè)造成了不可估量的潛在風(fēng)險和經(jīng)濟損失。為控制和預(yù)防ALV-J的流行,保護優(yōu)良地方品系雞,國家開始對地方種雞實施種群凈化的戰(zhàn)略決策?但由于我國種雞品系和種群數(shù)量大、飼養(yǎng)不規(guī)范和飼養(yǎng)密集等特點,需要繼續(xù)加強對ALV-J的研究,并探索更有效的防治措施以降低各雞群的ALV-J感染率和發(fā)病率?疫苗預(yù)防對于動物性傳染病的控制,一直是一種行之有效的方法,但針對ALV-J,至今仍無有效的疫苗可在生產(chǎn)中加以應(yīng)用。因此,ALV-J疫苗的研制顯得尤為迫切。本研究根據(jù)已發(fā)表的ALV-J囊膜蛋白gp85基因序列,設(shè)計一對特異性引物。從分離自我國肉雞樣品的ALV-J NX0101毒株cDNA中擴增得到目的基因,并通過PCR及測序鑒定。將gp85目的基因連接至Pet28a... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 J亞群禽白血病病毒概述
        1.1.1 ALV-J的一般生物學(xué)特性
        1.1.2 ALV-J的分子生物學(xué)特征
        1.1.3 ALV-J的診斷研究與防治現(xiàn)狀
    1.2 疫苗佐劑概述
        1.2.1 MF59佐劑研究進展
        1.2.2 R848研究進展
        1.2.3 MF59與R848的制備方法
    1.3 本研究目的意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要實驗儀器
        2.1.2 實驗材料
        2.1.3 實驗動物
        2.1.4 培養(yǎng)基的配制
        2.1.5 其他相關(guān)溶液的配制
    2.2 方法
        2.2.1 重組表達載體Pet28a-gp85的構(gòu)建
        2.2.2 ALV-J gp85蛋白的制備
        2.2.3 ALV-J gp85蛋白佐劑疫苗的制備
        2.2.4 佐劑疫苗免疫效果研究
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 重組表達載體Pet28a-gp85的鑒定
    3.2 gp85蛋白的制備
        3.2.1 gp85蛋白的誘導(dǎo)表達、純化及免疫原性分析結(jié)果
        3.2.2 蛋白濃度的測定結(jié)果
    3.3 重組gp85蛋白MF59/R848佐劑疫苗的制備
        3.3.1 MF59/R848佐劑疫苗穩(wěn)定性的測定結(jié)果
        3.3.2 MF59/R848佐劑疫苗安全性的檢驗結(jié)果
    3.4 ALV-J gp85重組蛋白與免疫佐劑聯(lián)合接種誘導(dǎo)免疫保護的研究
        3.4.1 血清中ALV-J特異性抗體的檢測
        3.4.2 病毒血癥的檢測
4 討論
    4.1 J亞群禽白血病病毒的流行現(xiàn)狀
    4.2 重組gp85蛋白MF59/R848佐劑疫苗的質(zhì)量檢驗
    4.3 重組gp85蛋白MF59/R848佐劑疫苗的免疫效果
    4.4 兩種佐劑疫苗效果對比研究
5 結(jié)論
參考文獻
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況及著作


【參考文獻】：
期刊論文
[1]ALV-Jgp85重組蛋白與免疫佐劑聯(lián)合接種雛雞誘導(dǎo)免疫保護的研究[J]. 竇文文,李宏梅,成子強,劉建柱,劉海港,井維芳,崔治中,郭慧君.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2013(03)
[2]禽白血病病毒研究的過去、現(xiàn)在和將來[J]. 崔治中.  生命科學(xué). 2012(04)
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博士論文
[1]J亞群禽白血病病毒Env蛋白分子生物學(xué)特性研究[D]. 葉建強.揚州大學(xué) 2005

碩士論文
[1]中國株J亞群禽白血病病毒全基因組序列的測定與分析[D]. 吳永平.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004
[2]雞新城疫基因工程亞單位疫苗的研究[D]. 劉長梅.山東師范大學(xué) 2001



本文編號：3340471