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羊口瘡病毒威海株和昆明株的分離鑒定及毒力致弱研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-11 19:47
  羊口瘡(Contagious ecthyma),又名羊接觸傳染性膿皰。羊口瘡是由羊口瘡病毒引起,羊口瘡病毒屬于痘病毒科副痘病毒屬。通常病毒不會(huì)出現(xiàn)由發(fā)病點(diǎn)系統(tǒng)性的傳播,相反,是由結(jié)痂病料引起環(huán)境污染來(lái)傳播病毒。此病的發(fā)病率高,死亡率低,通常情況下,羔羊的死亡率較高。本研究通過(guò)采集山東威海地區(qū)與云南昆明地區(qū)奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng)病羊發(fā)病部位結(jié)痂,進(jìn)行分離鑒定兩株羊口瘡病毒。并將羊口瘡病毒威海株與昆明株強(qiáng)毒株分別傳代,制備其弱毒株,將弱毒株進(jìn)行了動(dòng)物安全性試驗(yàn)和動(dòng)物抗體效價(jià)的測(cè)定。研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1.羊口瘡病毒威海株與昆明株的分離鑒定在培養(yǎng)的犢牛睪丸原代細(xì)胞上對(duì)山東威海市和云南昆明市某奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng)疑似羊口瘡(Orf)奶山羊病料進(jìn)行分離,通過(guò)觀察細(xì)胞病變形態(tài)、測(cè)定病毒滴度和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等方法對(duì)分離的毒株進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明,研磨處理后的病毒液接種于犢牛睪丸原代細(xì)胞后盲傳至第5代出現(xiàn)病變;測(cè)得威海株與昆明株第6代分離株病毒滴度分別為106.5TCID50/mL和106.7TCID50/mL;擴(kuò)增出羊口瘡病毒特異性B2L基因。2.羊口瘡病毒威海株與昆明株的弱毒株的制備將已鑒定的羊口瘡病毒威海... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

羊口瘡病毒威海株和昆明株的分離鑒定及毒力致弱研究


威海某奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng)疑似患羊口瘡羔羊口唇部結(jié)痂

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Fig 2-1 Scab of Suspected ORF lamb lipsin a farm of Weihai圖2-2 昆明某奶山羊養(yǎng)殖場(chǎng)疑似患羊口瘡羔羊口唇部結(jié)痂Fig 2-2 Scab of Suspected of ORFlamb lips in a farm of Weihai14

原代細(xì)胞培養(yǎng),犢牛,睪丸


2.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)與病毒增殖結(jié)果將采集的結(jié)痂病料研磨處理得到的病毒液接種于犢牛睪丸原代細(xì)胞上,前 4 代無(wú)明顯病變,每隔 72h 收集病毒液,盲傳至第 5 代時(shí),產(chǎn)生病變,病變主要特點(diǎn)表現(xiàn)為:產(chǎn)生空泡,細(xì)胞變圓,聚縮破裂,脫落。如圖 2-3 和圖 2-4;而正常犢牛睪丸原代細(xì)胞培養(yǎng)72h 時(shí),細(xì)胞鋪滿 80%左右,細(xì)胞形態(tài)呈梭型平鋪于細(xì)胞瓶底部,如圖 2-5。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羊口瘡病毒滅活疫苗的制備及免疫效果觀察[J]. 田婷婷,李杰,姚運(yùn)亮,李前瑞,許君艷,趙燕青,陳德坤.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(06)
[2]中西醫(yī)結(jié)合治療羊傳染性膿瘡皮炎[J]. 何宏英,田永平.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2012(06)
[3]羊口瘡的研究[J]. 沈正達(dá),靳誠(chéng),沈斌元,王錫禎,羅德英,盧洪英,潘光炎,滕振文,陳燕軍,宋勇,白吉榮,左玉婷,胡永浩,王蒲,汪清,常澤生.  甘肅農(nóng)大學(xué)報(bào). 1989(01)



本文編號(hào):3336782

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