目前尚缺乏研究山羊肉品質(zhì)基因的適宜模型，有關(guān)山羊肉分子機理的研究還相對落后。鑒于轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在一系列潛在危險且改變基因組難度較大，本論文借鑒人類基因治療的理念和原理構(gòu)建了適合攜帶外源基因的山羊骨骼肌特異表達載體。我們利用骨骼肌α-肌動蛋白的調(diào)控原件，肌肉鈣粘蛋白M-cadherin的信號肽以及EGFP基因共同構(gòu)建了可以直接在動物體肌肉細胞內(nèi)異位表達并分泌EGFP的表達質(zhì)粒pGEM-A5A3f-M-EGFP（pIMAU-EGFP）。該載體的構(gòu)建為研究山羊肉肉品質(zhì)基因奠定了重要的基礎(chǔ)。本研究得出的結(jié)論如下：1、成功獲得本研究中的轉(zhuǎn)錄起始單元：骨骼肌α-肌動蛋白啟動子5’-側(cè)翼區(qū)核苷酸序列，大小為2440bp以及大小為816bp的攜帶Ploy（A）尾的骨骼肌α-肌動蛋白啟動子3-’側(cè)翼區(qū)核苷酸序列。通過測序驗證，表明構(gòu)建的表達載體中這部分元件是正確可靠的，可以行使轉(zhuǎn)錄驅(qū)動功能。2、根據(jù)Genbank登錄號為：NM₀07662的參考序列，人工合成含有63bp的M-cadherin基因序列，限制性酶切位點，以及與EGFP基因有20bp重疊區(qū)的大引物M-m-cadherin，... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

啟動子的結(jié)構(gòu)

e）和鈣離子與水母發(fā)光蛋白結(jié)合后，水母發(fā)光蛋白發(fā)發(fā)綠色熒光[17]，馬丁沙爾菲進一步研究了綠色熒光蛋白蛋白的改造則使綠色熒光蛋白得到了更廣泛的應用，獻，上述3位學者共同獲得了2008年的諾貝爾化學獎所組成的單體蛋白，相對分子質(zhì)量為27kD，用 395nm的在508nm處自行發(fā)射綠色熒光。然而，人們對GFP的真正明它可以作為一種分子標記物以后[18]。隨后，形成了亮度進行篩選或者通過改變光譜（轉(zhuǎn)向紅色或藍色）染色體結(jié)構(gòu)上兩個單一氨基酸的改變（F64L, S65T）好的密碼子進行了優(yōu)化，這類突變體被命名為增強型的研究證明EGFP產(chǎn)生的綠色熒光強度比野生型的GFP究中EGFP作為一種報告基因用于載體的構(gòu)建，雖然基因

在骨骼肌的再生過程中，M-cadherin上調(diào)且可被再生肌原結(jié)構(gòu)所識別。圖4 基于鈣粘蛋白的細胞連接的結(jié)構(gòu)蛋白的主要相互作用Fig.4 The cadherin cell connected structural proteins interaction

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]國內(nèi)羊肉品質(zhì)分析研究進展[J]. 楊富民.  甘肅科技. 2003(02)
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碩士論文
[1]波爾山羊肌肉組織學性狀與肉品理化性狀的研究[D]. 劉建偉.河北農(nóng)業(yè)大學 2007



本文編號：3335845