水皰性口炎（VS）是由水皰性口炎病毒（VSV）感染而引起的一類急性、高度接觸性傳染病。水皰性口炎病毒作為彈狀病毒科、水皰病毒屬成員之一,能夠感染牛、馬、豬等家畜,同時(shí)也可以感染嚙齒類動(dòng)物。VSV感染后可以在口唇等部位形成水泡。該病本身雖然很少直接導(dǎo)致患畜死亡,但由此引發(fā)的繼發(fā)性感染會(huì)給畜牧經(jīng)濟(jì)帶來嚴(yán)重的損失。此外,水皰性口炎也是一類人獸共患性傳染病,VSV可在人群中傳播,患者一般具有流感樣癥狀。鑒于水皰性口炎的公共衛(wèi)生學(xué)意義而開展對(duì)VSV致病機(jī)制的研究將有助于該疫病的防控與治療。篩選與VSV侵染進(jìn)程相關(guān)的宿主因子是探索VSV致病機(jī)理的重要研究方向。組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）是一類表觀修飾酶,主要參與細(xì)胞內(nèi)染色體的結(jié)構(gòu)修飾和基因的表達(dá)調(diào)控等進(jìn)程。HDAC3的主要功能是催化組蛋白發(fā)生去乙酰化,維持細(xì)胞的表觀遺傳修飾譜;也可以修飾非組蛋白,調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的炎性信號(hào)通路。本研究發(fā)現(xiàn),以小分子抑制劑RGFP966對(duì)HDAC3進(jìn)行功能性阻斷可抑制VSV的復(fù)制增殖,通過小RNA干擾的方法對(duì)Hdac3進(jìn)行基因沉默亦可限制病毒復(fù)制增殖。不僅如此,在細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)H... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

RGFP966處理細(xì)胞TCID50結(jié)果

RGFP966處理細(xì)胞熒光定量 PCR結(jié)果

根據(jù)1.2.4所述方法成功構(gòu)建Hdac3過表達(dá)重組質(zhì)粒,測(cè)序正確后提取質(zhì)粒進(jìn)行慢病毒包裝。以慢病毒感染細(xì)胞72h后用3μg/mL嘌呤霉素進(jìn)行篩選收獲抗性細(xì)胞。提取RNA、反轉(zhuǎn)錄成cDNA,進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)。以空穿梭質(zhì)粒包裝的病毒所感染、篩選的細(xì)胞作為對(duì)照組細(xì)胞系。結(jié)果顯示與對(duì)照組相比,Hdac3的mRNA水平顯著上調(diào)（圖1.3）。同時(shí)收取細(xì)胞制備蛋白樣品進(jìn)行Western Blotting檢測(cè),發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組比較HDAC3蛋白水平上調(diào)（圖1.4）。以上結(jié)果證實(shí)成功獲得Hdac3基因過表達(dá)細(xì)胞系。（* p < 0.05）圖1.4 Hdac3過表達(dá)細(xì)胞系Western Blotting結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]國(guó)內(nèi)三維動(dòng)畫技能培訓(xùn)現(xiàn)狀分析——以Q動(dòng)畫公司三維動(dòng)畫技能培訓(xùn)現(xiàn)狀為例[J]. 何敏.  科技信息. 2010(17)



本文編號(hào)：3335498