豬附紅細胞體（M.suis）引起豬附紅細胞體病,臨床上表現(xiàn)為發(fā)熱、貧血、黃疸等癥狀,給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來較為嚴重的隱患與危害。近年來,報道了一些臨床上豬附紅細胞體與豬傳染性胸膜肺炎、豬圓環(huán)病毒、巴氏桿菌等混合感染的病例,這大大增加了該病的治療難度。為了減少因該病的發(fā)生和流行給養(yǎng)豬業(yè)帶來的損失,應(yīng)加強對該病的預防。本研究對豬附紅細胞體免疫原性進行了初步研究,制備出了豬附紅細胞體白油佐劑疫苗和蜂膠佐劑疫苗,對豬附紅細胞體病的預防有一定應(yīng)用價值。本研究分為3個部分,1)：本實驗室保存的豬附紅細胞體抗原通過姬姆薩染色方法和分子生物學的方法進行檢測,根據(jù)豬附紅細胞體特異序列（AJ504999）設(shè)計引物,PCR擴增,在靠近780bp的位置出現(xiàn)一條片段,與設(shè)計的引物所在片段大小一致,而陰性對照未出現(xiàn)條帶,經(jīng)測序分析,與AJ504999序列的同源性達99.4%。2)豬附紅細胞體疫苗制備與檢測。通過滅活時間、滅活劑甲醛的濃度、滅活的溫度等方面進行豬附紅細胞體滅活條件的摸索,選擇出最好的滅活時間和溫度分別為24h、37℃,甲醛的濃度為0.4%,采用乳化法分別添加白油和蜂膠佐劑獲得豬附紅細胞體滅活疫苗,檢測了白... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學湖南省

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 豬附紅細胞體
        1.1.1 豬附紅細胞體的分類
        1.1.2 豬附紅細胞體致病機理
        1.1.3 附紅細胞體病的流行病學
        1.1.4 豬附紅細胞體診斷
        1.1.5 附紅細胞體的預防和治療
        1.1.6 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
    1.2 附紅細胞體免疫原性研究
        1.2.1 佐劑和疫苗
        1.2.2 附紅細胞體免疫學研究
    1.3 研究的目的和意義
第二章 豬附紅細胞體抗原檢測
    2.1 試劑和材料
        2.1.1 試劑
        2.1.2 材料
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
        2.1.4 試驗用溶液及其配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 豬附紅細胞體體外培養(yǎng)與純化
        2.2.2 豬附紅細胞體顯微鏡檢查
        2.2.3 豬附紅細胞體PCR檢測
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 豬附紅細胞體顯微鏡檢查結(jié)果
        2.3.2 豬附紅細胞體PCR產(chǎn)物
    2.4 分析與討論
第三章 豬附紅細胞體滅活疫苗的制備與檢測
    3.1 實驗材料
        3.1.1 試劑
        3.1.2 材料
        3.1.3 試驗儀器
        3.1.4 主要試劑的配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 豬附紅細胞體滅活
        3.2.2 佐劑的制備
        3.2.3 滅活疫苗的檢驗
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 滅活條件
        3.3.2 佐劑的性狀
        3.3.3 白油佐劑滅活疫苗檢測
        3.3.4 疫苗無菌檢測
        3.3.5 疫苗的安全性
    3.4 分析與討論
第四章 豬附紅細胞體滅活疫苗免疫以及免疫原性檢測
    4.1 實驗材料
        4.1.1 試劑
        4.1.2 材料
        4.1.3 試驗儀器
        4.1.4 主要試劑的配制
    4.2 實驗方法
        4.2.1 豬附紅細胞體免疫原性研究
        4.2.2 動物免疫
        4.2.3 實驗室檢測
        4.2.4 數(shù)據(jù)處理
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 豬附紅細胞體免疫后體溫變化
        4.3.2 間接ELISA最佳抗原和血清稀釋倍數(shù)
        4.3.3 抗體水平消長
        4.3.4 小鼠脾臟和胸腺指數(shù)
        4.3.5 淋巴細胞的分離
        4.3.6 淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗
        4.3.7 豬血清的抗體水平
        4.3.8 血清中生化指標
        4.3.9 血清中的SOD活性和MDA檢測結(jié)果
    4.4 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 豬附紅細胞體抗原檢測
        5.1.2 豬附紅細胞體滅活的疫苗制備與檢測
        5.1.3 豬附紅細胞體滅活疫苗免疫以及免疫原性檢測
    5.2 展望
參考文獻
縮略詞(Abbreaviation)
致謝
作者簡歷



本文編號：3334040