豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus-2，PCV-2）是目前為止發(fā)現(xiàn)最小的動(dòng)物致病性病毒，是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的主要病因之一，除此之外還能夠引起母豬繁殖障礙、腸炎、斷奶仔豬與育肥豬的呼吸道疾病等，這類疾病統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒�。≒CVAD）。目前，該病在世界各養(yǎng)豬國(guó)家都有分布，是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成重大危害的三大疫病之一。本研究針對(duì)從廣東多個(gè)豬場(chǎng)采集的病料進(jìn)行病毒分離并接種到PK-15細(xì)胞系傳代培養(yǎng)，通過(guò)間接免疫熒光技術(shù)初步鑒定分離的毒株為PCV-2。采用RT-PCR，將已同步接種該病毒PK-15細(xì)胞總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，根據(jù)GenBank中PCV-2序列（登錄號(hào)：JQ809462.1）設(shè)計(jì)編碼PCV-2結(jié)構(gòu)蛋白全長(zhǎng)的特異性引物，利用PCR技術(shù)，成功擴(kuò)增出PCV-2ORF2基因，確定分離到的病毒為PCV-2。利用分子生物學(xué)技術(shù)將本實(shí)驗(yàn)室保存的PCV-2GD10-01毒株的ORF2基因連接到pMD-18T克隆載體上，根據(jù)限制性核酸內(nèi)切酶酶切分析得重組質(zhì)粒PCV2-Cap-T。經(jīng)序列測(cè)定驗(yàn)證正確后，將目的基因連接到原核表達(dá)載體pET-28a-c（+），獲得重組質(zhì)粒p... 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：42 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 豬圓環(huán)病毒病的研究進(jìn)展
        1.1 圓環(huán)病毒感染相關(guān)疾病的病原學(xué)
        1.2 圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)
        1.3 圓環(huán)病毒病的臨床癥狀
        1.4 圓環(huán)病毒病的診斷技術(shù)
    第二章 圓環(huán)病毒的分子生物學(xué)研究進(jìn)展
        2.1 圓環(huán)病毒的病原學(xué)研究
        2.2 圓環(huán)病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)
        2.3 圓環(huán)病毒的基因組結(jié)構(gòu)
        2.4 圓環(huán)病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白及其功能特點(diǎn)
    第三章 圓環(huán)病毒疫苗的研究進(jìn)展
        3.1 傳統(tǒng)疫苗的研究進(jìn)展
        3.2 新型疫苗的研究進(jìn)展
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 PCV-2 病毒的分離與鑒定
        1.1 材料和方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 豬圓環(huán)病毒 2 型 ORF2 基因的原核表達(dá)及 Cap 蛋白的純化
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
    第三章 純化的 Cap 與間接免疫熒光染色檢測(cè)方法的建立
        3.1 材料
        3.2 主要儀器與試劑
        3.3 方法
        3.4 結(jié)果
        3.5 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗（LG株）的研制與應(yīng)用[J]. 劉長(zhǎng)明,危艷武,陸月華,黃立平,吳洪麗,張朝霞,溫士剛,姜鳳娟.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2010(09)
[2]豬圓環(huán)病毒2型免疫過(guò)氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)抗體檢測(cè)試劑盒的研制及應(yīng)用[J]. 劉長(zhǎng)明,張超范,危艷武,張朝霞,袁婧.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(08)
[3]杭州地區(qū)豬Ⅱ型圓環(huán)病毒抗體的血清學(xué)調(diào)查[J]. 陳慶新,商紹彬,葉菊秀,母安雄,王毅峰,陸國(guó)林,周繼勇.  中國(guó)獸醫(yī)科技. 2003(07)
[4]江西省斷奶仔豬圓環(huán)病毒感染的初步診斷[J]. 花象柏.  中國(guó)獸醫(yī)科技. 2003(05)
[5]廣西斷奶仔豬豬圓環(huán)病毒2型的檢測(cè)[J]. 黃偉堅(jiān),蘆銀華,覃廣勝,藍(lán)可耀,阮強(qiáng),莫榮燕,溫傳新,張美,余克倫.  中國(guó)獸醫(yī)科技. 2003(01)
[6]規(guī)模化豬場(chǎng)豬圓環(huán)病毒2型感染的流行病學(xué)調(diào)查[J]. 王忠田,楊漢春,郭鑫.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2002(10)
[7]斷奶豬多系統(tǒng)衰弱綜合征血清抗體檢測(cè)[J]. 郎洪武,張廣川,吳發(fā)權(quán),張創(chuàng)貴.  中國(guó)獸醫(yī)科技. 2000(03)



本文編號(hào)：3333571