核酸制劑作為一種新興的生物制品,在感染性疾病、遺傳病和腫瘤等疾病的預(yù)防和治療以及促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)繁殖方面具有很大潛力。根據(jù)國(guó)際規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn),核酸制劑大規(guī)模生產(chǎn)使用以前首先需要對(duì)其進(jìn)行嚴(yán)格的安全性評(píng)價(jià)。其中制劑與宿主染色體DNA是否會(huì)發(fā)生整合成為一個(gè)公眾和研究者最為關(guān)注的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)室在早期的研究工作中開(kāi)發(fā)了一種可以有效改善絲毛烏骨雞產(chǎn)蛋性能的核酸制劑，我們應(yīng)用Qiagen公司生產(chǎn)的質(zhì)粒中提試劑盒大量制備注射用核酸制劑，通過(guò)建立一整套安全性評(píng)價(jià)方案，并按照方案設(shè)計(jì)的周期采樣，通過(guò)試劑盒提取注射過(guò)該核酸制劑的洛島紅雞的各個(gè)相關(guān)組織的基因組，包括肌肉（注射組織）、腸道、卵巢、肝臟、胃、心臟、輸卵管、脾臟、腎臟等九個(gè)組織，每次采樣三只雞即三個(gè)重復(fù)，采樣時(shí)間分別為0天、3天、7天，以后每隔一周定期采樣。并設(shè)計(jì)相應(yīng)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測(cè)核酸制劑在不同組織中持續(xù)存在的時(shí)間。對(duì)該制劑的安全性進(jìn)行的初步分析表明該制劑在洛島紅蛋雞體內(nèi)最長(zhǎng)有效發(fā)揮作用的時(shí)間大約為21天。顯然時(shí)間較短,為此,本研究在原制劑的基礎(chǔ)上對(duì)其進(jìn)行改造，添加了SV40大T抗原表達(dá)結(jié)構(gòu)和SV40復(fù)制起始位點(diǎn)，通過(guò)這一改造使其有效發(fā)揮作用的時(shí)... 

【文章來(lái)源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

JG5-SV40質(zhì)粒的酶切鑒定注：1.JG5-SV40質(zhì)�？寺�1；2.JG5-SV40質(zhì)�？寺�2

圖 7 各組織基因組電泳圖注：1-21 電泳道樣品順序是： 1 肌肉、2 肌肉、3 肌肉、1 腸、2 腸、3 腸、1 卵巢、2 卵巢、3 卵巢、1 肝臟、2 肝臟、3 肝臟、1 胃、2 胃、3 胃、1 心臟、2 心臟、3 心臟、1 輸卵管、2 輸卵管、3 輸卵管Figure 7The organisations electrophoregram of the genomeNote : Sample order of lanes1-21: 1Muscle, 2 Muscle, 3 Muscle,1 Intestines, 2 Intestines,3Intestines,1 Ovaries,2Ovaries, 3Ovaries, 1Liver, 2Liver,3Liver,1Stomach, 2Stomach,3Stomach, 1Heart,2Heart,3Heart, 1Fallopian tube, 2Fallopian tube, 3Fallopian tube,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 D1 D2 D3

圖 7 各組織基因組電泳圖注：1-21 電泳道樣品順序是： 1 肌肉、2 肌肉、3 肌肉、1 腸、2 腸、3 腸、1 卵3 卵巢、1 肝臟、2 肝臟、3 肝臟、1 胃、2 胃、3 胃、1 心臟、2 心臟、3 心臟、1 輸卵管、2 輸卵管、3 輸卵管Figure 7The organisations electrophoregram of the genomeNote : Sample order of lanes1-21: 1Muscle, 2 Muscle, 3 Muscle,1 Intestines, 2 Intestines,3Intestines,1 Ovaries,2Ovaries, 3Ovaries, 13Liver,1Stomach, 2Stomach,3Stomach, 1Heart,2Heart,3Heart, 1Fallopian tube, 2Fallopian tube, 3Fallopian tube,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 D1 D2 D3

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3330989