牛奶中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離鑒定和帶菌量測定
發(fā)布時間:2021-08-07 20:35
調(diào)查陜西關中地區(qū)牛奶中產(chǎn)氣莢膜梭菌的污染情況及其優(yōu)勢血清型和攜帶的毒素基因。通過對3個奶牛場采集的86份牛奶樣品進行細菌分離純化,應用多重PCR鑒定分離菌株的血清型,進行cpb2、cpe毒素基因檢測,并對場3的乳樣按照GB 4789.13-2012規(guī)定的方法進行產(chǎn)氣莢膜梭菌帶菌量的測定。結果顯示,個體乳樣產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離率為11.3%(7/62),且全部為A型菌,57.1%(4/7)的分離菌株攜帶atyp.cpb2基因,但所有分離菌株均未檢測到cons.cpb2和cpe基因。而混合乳樣(24份)中未分離出目的菌。場3的28份乳樣中3份產(chǎn)氣莢膜梭菌陽性乳的帶菌量為1 CFU/mL~15.3 CFU/mL。初步了解了陜西關中地區(qū)生鮮牛奶中產(chǎn)氣莢膜梭菌的污染情況、血清型及其攜帶的毒素基因,為關中地區(qū)牛奶中該菌污染的防控提供科學依據(jù),為該菌引起食物中毒的流行病學研究提供參考資料。
【文章來源】:動物醫(yī)學進展. 2020,41(07)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
疑似樣品的單項PCR檢測結果
圖2 分離菌株特征
按照GB 4789.13-2012規(guī)定的方法[7]對第3奶牛場采集的22份個體奶和6份混合奶樣進行產(chǎn)氣莢膜梭菌計數(shù),其中僅有3個奶樣在TSC平板上有典型菌落生長(表2),而其余的樣品均沒有典型菌落生長,結果與細菌分離純化一致。從平板上挑取5個典型菌落接種于FTG中(不夠5個的全選),37 ℃厭氧培養(yǎng)24 h后通過單項PCR對其進行確認。樣品1的2個平板上確認是產(chǎn)氣莢膜梭菌的菌落數(shù)為1和1(菌落小于5個全選),樣品2的3個平板上確認菌落數(shù)分別為3和4和1(原濃度各選5個典型菌落,10-1稀釋度平板全選),樣品3的2個平板確認菌落數(shù)分別為4和2(各選5個典型菌落)。圖4 atyp.cpb2基因的PCR檢測結果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]一起產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒事件現(xiàn)場流行病學調(diào)查[J]. 麻美芬,崔艷,黃抱抱,何麗波. 預防醫(yī)學. 2018(06)
[2]2015年-2016年廣州口岸進口乳制品攜帶的幾種厭氧菌檢驗及分析[J]. 魯志超,吳思超,宋思園,庾梓君,陳詠琳. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2017(19)
[3]牛產(chǎn)氣莢膜梭菌黑龍江分離株的分型鑒定[J]. 王華欣,劉宇,趙靜虎,劉通,周金玲,岳山,何泊寧,劉珊珊,張世勛,王天,劉增祿,朱戰(zhàn)波. 黑龍江八一農(nóng)墾大學學報. 2016(06)
[4]產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落多重PCR方法的建立及初步應用[J]. 董潔,楊曉靜,苗承霞,沈晶,楊柳,姜艷芬,許信剛. 中國獸醫(yī)學報. 2013(12)
[5]產(chǎn)氣莢膜梭菌次要毒力因子的研究進展[J]. 田冬青,蔣玉文,楊京嵐,陳小云,孫曄. 畜牧與飼料科學. 2010(10)
[6]牛乳中產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素和金黃色葡萄球菌腸毒素A的雙重PCR檢測法[J]. 張曼,王晶鈺. 西北農(nóng)業(yè)學報. 2010(09)
本文編號:3328500
【文章來源】:動物醫(yī)學進展. 2020,41(07)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
疑似樣品的單項PCR檢測結果
圖2 分離菌株特征
按照GB 4789.13-2012規(guī)定的方法[7]對第3奶牛場采集的22份個體奶和6份混合奶樣進行產(chǎn)氣莢膜梭菌計數(shù),其中僅有3個奶樣在TSC平板上有典型菌落生長(表2),而其余的樣品均沒有典型菌落生長,結果與細菌分離純化一致。從平板上挑取5個典型菌落接種于FTG中(不夠5個的全選),37 ℃厭氧培養(yǎng)24 h后通過單項PCR對其進行確認。樣品1的2個平板上確認是產(chǎn)氣莢膜梭菌的菌落數(shù)為1和1(菌落小于5個全選),樣品2的3個平板上確認菌落數(shù)分別為3和4和1(原濃度各選5個典型菌落,10-1稀釋度平板全選),樣品3的2個平板確認菌落數(shù)分別為4和2(各選5個典型菌落)。圖4 atyp.cpb2基因的PCR檢測結果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]一起產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒事件現(xiàn)場流行病學調(diào)查[J]. 麻美芬,崔艷,黃抱抱,何麗波. 預防醫(yī)學. 2018(06)
[2]2015年-2016年廣州口岸進口乳制品攜帶的幾種厭氧菌檢驗及分析[J]. 魯志超,吳思超,宋思園,庾梓君,陳詠琳. 中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2017(19)
[3]牛產(chǎn)氣莢膜梭菌黑龍江分離株的分型鑒定[J]. 王華欣,劉宇,趙靜虎,劉通,周金玲,岳山,何泊寧,劉珊珊,張世勛,王天,劉增祿,朱戰(zhàn)波. 黑龍江八一農(nóng)墾大學學報. 2016(06)
[4]產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落多重PCR方法的建立及初步應用[J]. 董潔,楊曉靜,苗承霞,沈晶,楊柳,姜艷芬,許信剛. 中國獸醫(yī)學報. 2013(12)
[5]產(chǎn)氣莢膜梭菌次要毒力因子的研究進展[J]. 田冬青,蔣玉文,楊京嵐,陳小云,孫曄. 畜牧與飼料科學. 2010(10)
[6]牛乳中產(chǎn)氣莢膜梭菌α毒素和金黃色葡萄球菌腸毒素A的雙重PCR檢測法[J]. 張曼,王晶鈺. 西北農(nóng)業(yè)學報. 2010(09)
本文編號:3328500
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