目的：檢測(cè)丹參酮ⅡA磺酸鈉（Sodium Tanshinone ⅡA Sulfonate, STS）對(duì)雞馬立克氏病病毒（Marek’s disease virus, MDV） UL27 （gB）基因的合成和gB糖蛋白表達(dá)的影響,以及對(duì)病毒Meq基因表達(dá)量的影響,初步探討STS抗病毒作用的機(jī)制,為抗病毒作用機(jī)制的深入研究奠定理論基礎(chǔ)。方法：本試驗(yàn)建立MDV感染體外模型,以MDV-1中具有高度保守序列的UL27基因和Meq基因?yàn)檠芯繉?duì)象,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)（Real-time PCR）分別在MDV感染細(xì)胞內(nèi)加藥后24 h、48 h、72 h、96h檢測(cè)DNA水平和mRNA水平上0.25 mg/ml STS對(duì)MDVUL27基因和Meq基因的表達(dá)量差異變化。同時(shí)以廣譜抗病毒藥物阿昔洛韋（acyclovir,ACV）作為陽(yáng)性對(duì)照,進(jìn)一步評(píng)估STS的抗病毒效果。此外,通過Western blot試驗(yàn)研究STS在不同時(shí)間點(diǎn)作用后MDV gB蛋白表達(dá)量的變化。結(jié)果：1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示STS可有效抑制MDV UL27基因的合成。DNA水平上,STS加入細(xì)胞后體系后的24 h、48 h... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Ivt}臨床癥狀的變化趨勢(shì)f}1Fig.lThetendencyofclinicalmofMareksdisease

瘤；在過去的２５年中，ＭＤ的癥狀進(jìn)一步加重，并伴有廣泛性的內(nèi)臟型腫瘤、神經(jīng)癥狀、??重癥腦水腫和急性死亡，這些癥狀即便是在完全免疫的禽類中也時(shí)有發(fā)生Ｗ。與此同時(shí)，??ＭＤＶ奉株也在不斷進(jìn)化，毒株的不斷變異致使病毒毒力越來越強(qiáng)，見圖２?（Ｆｉｇ．２）。屯??十年代末，美國(guó)ＭＤ疫苗免疫失敗，Ｗｉｔｔｅｒ等從免疫ＨＶＴ疫苗的雞群中分離出多株毒力增??強(qiáng)的＂變異型＂毒株Ｗ。此后，美國(guó)開始引進(jìn)ＭＤＶ２－ＨＶＴ二價(jià)苗來控制ＭＤ的流化直??至九十年代時(shí)ＭＤ的發(fā)病率升高，并伴隨著分離出具有更強(qiáng)毒力的毒株ｗＭＤＶ和??Ｗ＋ＭＤＶ，這說明ＭＤＶ的毒力在進(jìn)一步増強(qiáng)。而自２０化紀(jì)巧，ＣＶ巧８８／Ｒｉ巧ｅｎｓ株和８１４??株疫苗被引入后，雖能給免疫雞群提供較好的保護(hù)，但ＭＤ野毒株毒力的增強(qiáng)及免疫方??法不當(dāng)?shù)纫鸬模停拿庖呤矣邪l(fā)生。送些結(jié)果均證實(shí)了?ＭＤＶ毒力在不斷增強(qiáng)的事??實(shí)。??－３?－??

圖３?ＭＤＶ在體內(nèi)的致病過程ＰＳＩ??Ｆｉｇ．３?Ｎａｔｕｒａｌ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｗｉ化?ＭＤＶ?ｉｎ?ｖｉｖｏ??１．２．１?早期溶細(xì)胞感染??機(jī)體感染ＭＤＶ?３？７ｄ后，進(jìn)入第一階段，即早期溶細(xì)胞感染期（生產(chǎn)限制性感染），??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3306506