草地生態(tài)系統(tǒng)是我國(guó)面積最大的陸地生態(tài)系統(tǒng),過(guò)度放牧造成草地荒漠化加劇。土壤微生物群落多樣性指標(biāo)是評(píng)價(jià)土壤肥力的重要依據(jù),該依據(jù)已成為生態(tài)學(xué)的重點(diǎn)研究對(duì)象。本研究以內(nèi)蒙古典型草原為研究對(duì)象,分別設(shè)置5個(gè)放牧強(qiáng)度:CK、GI170、GI340、GI510、GI680,在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了以下工作:（1）利用16S r DNA、ITS基因文庫(kù)技術(shù)和Illumina Mi Seq測(cè)序技術(shù),分析土壤微生物的群落多樣性;（2）通過(guò)R軟件計(jì)算微生物的Faith’s PD指數(shù);（3）采用結(jié)構(gòu)方程模型分析放牧強(qiáng)度、土壤理化性質(zhì)與微生物群落多樣性之間的因果關(guān)系。結(jié)論如下:1.對(duì)照處理下,細(xì)菌的物種豐富度最高、數(shù)量最少;隨著放牧強(qiáng)度增大,細(xì)菌的數(shù)量逐漸增多,其物種豐富度隨之降低;CK中細(xì)菌的Faith’s PD指數(shù)最小,其最大值出現(xiàn)在GI170和GI510。2.隨放牧強(qiáng)度增大,土壤真菌的物種多度、數(shù)量和Shannon指數(shù)呈現(xiàn)單峰趨勢(shì),在GI340時(shí)出現(xiàn)最大值,符合中度干擾理論,即適度放牧有助于真菌的增殖。3.隨著放牧強(qiáng)度的增大,土壤速效氮、含水量逐漸降低;土壤總有機(jī)碳、全氮、全磷含量、p H值隨放牧強(qiáng)度增強(qiáng)呈現(xiàn)... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

均海拔約 1100m，屬溫帶半干旱草原氣候，年平均降水 ~ 1.0℃，土壤主要為栗鈣土[40]。2.2 實(shí)驗(yàn)樣地設(shè)置07 年設(shè)置圍欄禁牧，經(jīng)過(guò)七年植被恢復(fù)狀況良好，于 2014壤狀況相同的區(qū)域，設(shè)置 5 個(gè)放牧強(qiáng)度試驗(yàn)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)，其分布狀況如圖 2.1 所示（圖片引自叢日慧等的短期研究）[40]。放牧?xí)r間安排在每年 6 月 10 日到 9 月 10 日按體重 45kg、日消耗 1.8kg 標(biāo)準(zhǔn)干草的成年綿羊?yàn)?1 個(gè)羊區(qū)的放牧強(qiáng)度等級(jí)為 0、170 SU·d·y-1·hm-2（標(biāo)準(zhǔn)羊單hm-2、510 SU·d·y-1·hm-2、680 SU·d·y-1·hm-2，記intensity，簡(jiǎn)寫為 GI）、GI340、GI510、GI680[40]。

(7) 觀察：將電泳好的凝膠放置在操作箱中，注意操作過(guò)程要佩戴手套，嚴(yán)格按照要求操作，并拍照記錄。細(xì)菌的電泳檢測(cè)結(jié)果如圖3.1所示，真菌的電泳檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖3.2。圖 3.1 細(xì)菌的電泳檢測(cè)結(jié)果Fig.3.1 Bacterial Electrophoresis Test Results圖 3.2 真菌的電泳檢測(cè)結(jié)果Fig.3.2 Fungal Electrophoresis Test Results3.1.6 Illumina 測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建及測(cè)序(1) 文庫(kù)構(gòu)建由于單次上機(jī)的樣本較多，在一輪PCR后需要在正反方向的引物兩端加入不同的barcode，用來(lái)區(qū)分樣本。PCR產(chǎn)物用beads純化，然后上機(jī)測(cè)序。(2) PCR產(chǎn)物用AxyPrepTMMag PCR Normalizer，做歸一化處理。(3) 上機(jī)測(cè)序?qū)⑽膸?kù)構(gòu)建好后上樣到簇生成系統(tǒng)，用作簇生成和MiSeq測(cè)序。(4) 測(cè)序流程

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]短期放牧下典型草原草畜生產(chǎn)和轉(zhuǎn)化效率研究[J]. 叢日慧,劉思齊,朱羚,燕亞媛,金一蘭,張慶,丁勇.  中國(guó)草地學(xué)報(bào). 2017(06)
[2]放牧對(duì)冷蒿根際土壤微生物量碳、氮和土壤呼吸的影響[J]. 王鑫朝,韓一林,李美,王小東,汪俊宇,馬元丹,寶音陶格濤,高巖,張汝民.  浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(05)
[3]不同放牧強(qiáng)度下荒漠草原土壤養(yǎng)分和植被特征變化研究[J]. 王天樂(lè),衛(wèi)智軍,劉文亭,白玉婷,張爽,丁莉君,肖嘉圃,呂世杰.  草地學(xué)報(bào). 2017(04)
[4]沙化草地恢復(fù)過(guò)程中土壤有機(jī)碳物理組分和全氮含量的變化[J]. 閻欣,安慧.  西北植物學(xué)報(bào). 2017(06)
[5]放牧強(qiáng)度對(duì)大針茅根際和非根際土壤中細(xì)菌數(shù)量和群落特征的影響[J]. 李婷婷,海麗麗,韓冰,趙萌莉,趙鴻彬.  草地學(xué)報(bào). 2016(05)
[6]天然草地管理措施對(duì)植物病害的影響研究進(jìn)展[J]. 劉勇,張雅雯,南志標(biāo),段廷玉.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2016(14)
[7]放牧對(duì)克氏針茅（Stipa krylovii）草原土壤物理、化學(xué)及微生物性狀的影響[J]. 王曉朦,烏云娜,宋彥濤,霍光偉,徐志超,道日娜.  中國(guó)沙漠. 2015(05)
[8]土壤–根系–微生物系統(tǒng)中影響氮磷利用的一些關(guān)鍵協(xié)同機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 孫波,廖紅,蘇彥華,許衛(wèi)鋒,蔣瑀霽.  土壤. 2015(02)
[9]毛烏素沙地人工固沙灌木林凋落物分解及改良土壤的研究[J]. 郭鑫,盧立娜,賀曉輝,李維向,葛晶.  林業(yè)資源管理. 2014(05)
[10]刈割次數(shù)對(duì)不同混播組合草地產(chǎn)量及營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響[J]. 張鮮花,穆肖蕓,董乙強(qiáng),朱進(jìn)忠.  新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(05)

碩士論文
[1]不同放牧強(qiáng)度對(duì)短花針茅荒漠草原植物群落及土壤的影響[D]. 王合云.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]放牧、增雨和增食對(duì)內(nèi)蒙古草原植被群落結(jié)構(gòu)及部分土壤理化性質(zhì)的影響[D]. 楊飛.揚(yáng)州大學(xué) 2016
[3]不同放牧強(qiáng)度對(duì)典型草原植被、土壤及家畜增重的影響[D]. 薩仁高娃.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]施肥對(duì)黃土高原水蝕風(fēng)蝕交錯(cuò)區(qū)植物產(chǎn)量及土壤礦質(zhì)氮、水溶性有機(jī)碳/氮的影響[D]. 陶武輝.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
[5]珍稀瀕危植物白皮松土壤微生物多樣性研究[D]. 賈麗.西北師范大學(xué) 2007



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