傳統(tǒng)飼料中富含抗消化粘性甘露聚糖和木聚糖，而畜禽的消化酶系中不含甘露聚糖酶，動物自身木聚糖酶很難將木聚糖完全降解，因此對這類物質(zhì)的轉(zhuǎn)化利用需要添加外源酶，但直接添加酶制劑又存在成本較高的問題，采用添加產(chǎn)酶益生菌劑的方式簡便易行，可以達(dá)到提高飼料的利用率和降低養(yǎng)殖成本的目的。本研究采用剛果紅平板變色圈法進(jìn)行產(chǎn)木聚糖酶芽孢桿菌和產(chǎn)甘露糖酶芽孢桿菌的篩選，通過液體發(fā)酵測定酶活力進(jìn)行復(fù)篩，并進(jìn)行動物胃腸道耐受性和安全性試驗，篩選出能夠耐受動物胃腸道環(huán)境并且具有較高酶活力的安全性芽孢菌株。最終篩選到產(chǎn)木聚糖酶B-5菌株和產(chǎn)甘露聚糖酶NB-5菌株。其中B-5菌株和NB-5菌株在pH為2時仍保持較好的耐受性，存活率達(dá)到了90%左右，在人工腸液模擬環(huán)境中也都有很好的耐受性。通過形態(tài)特征、生理生化實驗和16Sr DNA全序列分析，鑒定B-5菌株和NB-5菌株均為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis），是國家農(nóng)業(yè)部允許的飼喂動物安全菌株，對兩菌株展開拮抗和共存性試驗，證實菌株間不存在拮抗性，可以制成復(fù)合菌劑同時飼喂。對菌劑的生產(chǎn)工藝進(jìn)行了研究。以菌株的芽孢形成率和芽孢數(shù)量為測定指標(biāo)，分別對兩菌... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

菌株剛果紅初篩照片

圖2.1富集菌株的單菌落照片F(xiàn)ig2.1 Single colony photos of enriched strains芽孢桿菌篩選酶芽孢桿菌的初篩板初篩，有透明圈的 100 株。（見下圖 2.2）共篩到產(chǎn)木聚糖酶芽數(shù)菌株形態(tài)是表面光滑，呈乳白色，邊緣不規(guī)則，少數(shù)表面褶皺鋸齒狀，表面與中心顏色不一致。

桿菌的復(fù)篩子液培養(yǎng) 12h，用無菌培養(yǎng)基調(diào)至 OD600養(yǎng)基培養(yǎng)，37℃200rpm 培養(yǎng) 72h，然后將上清液進(jìn)行酶活力測定酶活力較高 20 株酶活力大小如下，其中 表2.4 甘露糖濃度吸光度測定結(jié)果4 concentration of xylose absorbency measurement re0.2 0.4 0.6 0.80.166 0.339 0.461 0.61圖2.4菌株剛果紅初篩照片ig.2.4 The congo red photo of screening strains

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]地衣芽孢桿菌M109高密度發(fā)酵條件的優(yōu)化[J]. 付維來,杜建濤,劉鵬,王安如.  中國畜牧獸醫(yī). 2012(11)
[2]含木聚糖酶復(fù)合益生菌飼料添加劑的研制及應(yīng)用[J]. 成珍,易卿,劉曉東,趙躍進(jìn),崔臘梅,陳靜.  飼料與畜牧. 2012(07)
[3]益生菌B. animalis V9凍干粉安全性毒理學(xué)研究[J]. 梁春梅,高鵬飛,陳震,王記成,王秋實,高杰,張和平.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2010(06)
[4]凝結(jié)芽孢桿菌T50產(chǎn)芽孢條件優(yōu)化的研究[J]. 路程,周長海,于紅梅,劉婷,烏日汗.  中國釀造. 2009(07)
[5]飼用益生菌產(chǎn)品評價研究進(jìn)展[J]. 張璐,張敏紅.  中國畜牧獸醫(yī). 2008(03)
[6]木聚糖酶的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 徐君飛,張居作.  農(nóng)產(chǎn)品加工. 2007(08)
[7]細(xì)菌芽孢形成機(jī)制在微生態(tài)制劑生產(chǎn)中的應(yīng)用[J]. 徐世榮,陳驤,吳云鵬.  食品與生物技術(shù)學(xué)報. 2007(04)
[8]新型飼料添加劑——β-甘露聚糖酶[J]. 陳權(quán)軍,鄧岳松,羅永發(fā),曾瑞秋.  中國家禽. 2007(03)
[9]微生物β-甘露聚糖酶的制備與應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 許牡丹,楊偉東,許寶紅,柯蕾.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2006(09)
[10]β-甘露聚糖酶在飼料中的應(yīng)用研究[J]. 周響艷,譚會澤,馮定遠(yuǎn),李富偉.  養(yǎng)殖與飼料. 2006(04)

碩士論文
[1]產(chǎn)適冷木聚糖酶菌株的篩選，酶的分離純化、基因克隆和表達(dá)以及酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 郭兵.山東大學(xué) 2009
[2]大麗輪枝菌拮抗細(xì)菌RS-25菌株的分離鑒定、發(fā)酵及抗菌多肽的純化[D]. 武翠紅.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[3]β-甘露聚糖酶高產(chǎn)菌株篩選及酶的純化與性質(zhì)研究[D]. 成莉鳳.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
[4]木聚糖酶制劑在雞胃腸道作用模式研究[D]. 王永花.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號：3302596