為了分離、鑒定來源于犢牛創(chuàng)口的分離菌,并對其抑菌作用進(jìn)行檢測和評估,試驗(yàn)采用細(xì)菌分離培養(yǎng)、染色鏡檢、動(dòng)物試驗(yàn)、藥敏試驗(yàn)、生化鑒定等方法對所分離的菌株進(jìn)行綜合性鑒定,同時(shí)對分離菌株進(jìn)行16S rRNA測序,并建立系統(tǒng)進(jìn)化樹,分析分離菌株親緣關(guān)系。通過瓊脂擴(kuò)散法,以大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏桿菌為指示菌種,檢測所分離菌株對它們的抑菌作用。結(jié)果表明:分離培養(yǎng)得到1株革蘭氏陽性桿菌并有芽孢,命名為LG-1。LG-1致病性較弱;僅對頭孢噻肟耐藥,對其余藥物敏感或中度敏感;LG-1 16S rRNA基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物序列與GenBank已經(jīng)上傳的短小芽孢桿菌相似性達(dá)100%;對大腸桿菌、沙門氏桿菌、金黃色葡萄球菌均有抑制作用,且上清液的抑菌作用相對較好。說明犢牛創(chuàng)口感染的菌株LG-1為短小芽孢桿菌,其有望成為抑制大腸桿菌、沙門氏桿菌、金黃色葡萄球菌的抗菌物質(zhì)。 

【文章來源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020,(22)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

16S rRNA基因PCR擴(kuò)增結(jié)果

目前隨著抗生素的濫用,耐藥細(xì)菌逐漸增多,微生態(tài)制劑和天然植物成為抑菌藥物的研究熱點(diǎn)[9-11]。芽孢桿菌是目前發(fā)現(xiàn)的具有開發(fā)應(yīng)用前景的菌種之一,其中短小芽孢桿菌可以產(chǎn)生抗菌素及抗菌蛋白等頡頏性物質(zhì),抑菌范圍廣,對多種病原菌都有抑制作用[12-13]。本研究通過分離培養(yǎng)、染色鏡檢、16S rRNA基因測序、遺傳進(jìn)化樹的建立與分析,確定所分離菌株LG-1為短小芽孢桿菌。抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明,LG-1對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏桿菌均具有不同程度的抑制作用,這與文獻(xiàn)報(bào)道中分離于驢[6]、藏綿羊[7]及雞[14]的短小芽孢桿菌菌株對致病菌的抑制作用相符合。本研究分離的短小芽孢桿菌LG-1屬于牛源芽孢桿菌,后續(xù)將對該菌株抑菌機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步研究。表3 LG-1對指示菌抑菌效果 菌種 菌液 上清液 菌體沉淀 抑菌圈直徑/mm 判定結(jié)果 抑菌圈直徑/mm 判定結(jié)果 抑菌圈直徑/mm 判定結(jié)果 大腸桿菌 6.55 低度敏感 10.11 中度敏感 5.37 低度敏感 金黃色葡萄球菌 21.05 高度敏感 23.22 高度敏感 15.43 高度敏感 沙門氏桿菌 11.87 中度敏感 13.50 中度敏感 9.97 中度敏感

此外,一些研究發(fā)現(xiàn),短小芽孢桿菌在免疫調(diào)節(jié)、胃腸道微生物平衡、動(dòng)物營養(yǎng)等方面有良好的效果,LG-1菌株的發(fā)現(xiàn)將為這些方面的研究提供新的候選菌株。圖2 分離菌革蘭氏染色鏡檢結(jié)果(100×)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3302013