天然免疫系統(tǒng)通過表達不同的模式識別受體（pattern recognition receptors, PRRs）特異性地識別入侵的病原相關分子模式（pathogen-associated molecular patterns, PAMPs）,發(fā)揮級聯(lián)信號轉導作用,從而達到抗病毒免疫防御作用。MDA5和NALP3分別為模式識別受體維甲酸誘導基因I樣受體家族（Retinoic acid-inducible gene I-like receptors, RLRs）家族和核苷酸結合寡聚化結構域樣受體家族（Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors, NLRs）亞家族中的重要成員。它們能夠識別RNA病毒,并調節(jié)細胞因子,發(fā)揮非特異抗病毒作用。J亞群禽白血�。ˋvian leucosis virus subgroup J, ALV-J）是近年來受到廣泛關注的禽白血病的一種,感染該病毒的雞往往會發(fā)生免疫抑制,導致機體的免疫應答受阻。本研究為了解雞模式識別受體NALP3和MDA5在ALV-J感染細胞中的作用,本研究通過在對一株ALV... 

【文章來源】：安徽農業(yè)大學安徽省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＡＬＶ－Ｊ基因組的結構??Ｆｉｇ．?１?ＳｔｒｕｃＵｉｒｅ?ｏｆ?也ｅ?ＡＬＶ－Ｊ?ｐｒｏｖｉｒａｌ?ｇｅｎｏｍｅ??

２．１疑似患雞的主要組織病變??對疑似病雞進行剖檢，可見肝臟、脾臟、卵巢明顯腫大，巧臟表面有彌漫性白色??結節(jié)狀的腫瘤。脾臟和也臟表面有點狀出血斑（見圖２－１）。骨髓質地脆弱，顏色灰白。??胸腺和法氏囊萎縮。??圓國瞧??肝臟?脾臟?卵巢??圖２－１臨床感染ＡＬＶ－Ｊ病巧剖檢病變??巧ｇ．２－１?Ｐａ化ｏｌｏｇｉｃａｌ?ｌｅｓｉｏｎｓ?ｏｆ?ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ＡＬＶ－Ｊ?ｓｉｃｋ?ｃｈｉｃｋｅｎ??２．２雞巧成纖維細胞分離ＡＬＶ－Ｊ??取病雞的肝臟組織研磨后無菌過濾分別接種于制備好的雞巧成纖維細胞和ＤＦ－１??細胞，放置Ｃ〇２培養(yǎng)箱培養(yǎng)ｌ￣２ｄ后，傳代一次，再接種病料液，同時設接ＤＭＥＭ??不接病料液做陰性對照，維持７ｄ后觀察細胞狀態(tài)，結果表明，細胞未產(chǎn)生明顯病變。??２．３?ｐ２７群特異性抗原的檢測結果??收集上述培養(yǎng)７ｄ后ＤＦ－１細胞上清，繼續(xù)盲傳３代后，�。捣菁毎囵B(yǎng)物上清，??經(jīng)ＥＬＩＳＡ試劑盒檢測，結果呈陽性（見表２－１）。??表２－１?ＡＬＶ的ＥＬＩＳＡ抗原檢測ＤＦ－１上清結果???Ｔａｂｌｅ．２－１?民ｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＥＬＩＳＡ?ａｎｔｉｇｅｎ?ｄｅ化ｃｔ?ＡＬＶ?ｉｎ?出ｅ?ＤＦ－１???試劑盒名稱?上清１號上清２號?上清３號?上清４號?上清５號??ｐ２７?抗原?ＥＬＩＳＡ?檢?￣?￣?￣?￣?￣??測試劑盒?????????十??２．４?ＡＬＶ－Ｊ的民Ｔ－ＰＣ民檢測與鑒定結果??分別提取疑似病雞肝組織和肝組織研磨病料液接種的ＤＦ－１細胞的Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ，??通過反轉錄試劑盒合成第一鏈ｃＤＮＡ

提�。粒剩郑龋疲玻保狈蛛x株感染ＤＦ－１細胞的ＤＮＡ，通過Ｐｒｉｍｅｒ?Ｐｒｅｍｉｅｒ?５軟件自行??設計了一對特異性擴增ｅｎｖ基因的ＰＣ民引物（見１．６．３．１）擴增，結果獲得大小為２１００ｂｐ??左右的條帶（圖２－３），與預期大小相符。??ｉ＿．’??ｂｐ?Ｍ?１??�！�??ｉｏｏ〇ＢｈＢ｜＾＾＾９??７５０??５００??２５０??－｝ＱＱ??圖２－３巧！Ｖ基因ＰＣ民擴增??？?Ｍ－?．ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ?２０００；?１．如Ｖ?基因??巧ｇ．２－３?ＰＣ民?ａｍｐＨｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?饑Ｖ?ｇｅｎｅ??Ｍ．ＤＮＡ?Ｍｗｋ巧?２０００；?１?■飢Ｖ?ｇｅｎｅ??將純化的ｅ？ｖ基因片段與ｐＭＤ１８－Ｔ載體連接、轉化ＤＨ５ａ感受態(tài)細胞，挑取陽??性克隆送生物公司測序，經(jīng)ＮＣＢＩＢＩａｓｔ比對分析，結果對實驗室分離的ＡＪＶ－ＨＦ２１１?．??毒株抓Ｖ氨基酸的序列進行分化結果顯示（圖２－４）?ＡＪＶ－ＨＦ２１１分離毒株ｅｎｖ基因??２３??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3301663