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利用RNA-Seq技術(shù)篩選藏雞與白羽肉雞垂體組織差異表達(dá)基因

發(fā)布時(shí)間:2021-07-20 23:08
  為發(fā)掘影響禽類早期快速生長(zhǎng)的關(guān)鍵基因,本研究通過對(duì)緩慢生長(zhǎng)的藏雞和快速生長(zhǎng)的白羽肉雞垂體組織RNA表達(dá)譜進(jìn)行測(cè)序及比較分析,篩選與生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的候選基因,并對(duì)篩選到的候選基因做進(jìn)一步研究。以42日齡雌性藏雞與白羽肉雞為研究對(duì)象,每個(gè)品種的雞選取3個(gè)重復(fù)樣本,采用RNA-seq技術(shù)和生物信息學(xué)方法測(cè)定藏雞和白羽肉雞垂體組織RNA表達(dá)譜,對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行GO(Gene Ontology)分析、KEGG分析,篩選影響早期生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的候選基因,之后利用Western blot對(duì)候選基因?qū)?yīng)蛋白進(jìn)行亞細(xì)胞定位,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)構(gòu)建相關(guān)候選基因的組織表達(dá)譜和時(shí)序表達(dá)譜。結(jié)果顯示:1.42日齡雌性藏雞和白羽肉雞垂體組織RNA表達(dá)譜測(cè)序結(jié)果各轉(zhuǎn)錄本Q30均在90%以上,轉(zhuǎn)錄本文庫質(zhì)量好。各轉(zhuǎn)錄本中預(yù)測(cè)到的新轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度均在700 bp以上,其中最長(zhǎng)的含有30個(gè)外顯子,最短的僅含有1個(gè)外顯子。兩個(gè)品種雞的可變剪切體均以IR(內(nèi)含子保留)剪切體模型所占比列高(≈50%)。各轉(zhuǎn)錄本SNP中轉(zhuǎn)換型(A-G/C-T)SNP位點(diǎn)分布占76%,顛換型(A-C/A-T/C-G/G-T)SNP位點(diǎn)占24%。... 

【文章來源】:西南民族大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

利用RNA-Seq技術(shù)篩選藏雞與白羽肉雞垂體組織差異表達(dá)基因


EGR家族4名成員示意圖(Roseline,2008)

火山,差異表達(dá)基因


dot: Genes without differential expression (Same in MA). The X-axis represents the fold change(FC) and the Y-axis represents significant.圖2-1 差異表達(dá)基因火山圖Fig.2-1 Volcano plot of differentially expressed genes

差異表達(dá)基因


橫坐標(biāo)代表表達(dá)強(qiáng)度,縱坐標(biāo)代差異倍數(shù)。The Y-axis represents the expression level and the X-axis represents the fold change (FC)圖2-2 差異表達(dá)基因MA圖Fig.2-2 MA plot of differentially expressed genes2.6 GO 功能顯著性富集分析GO 富集分析發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞組分中 22 個(gè)基因得到了注釋結(jié)果,對(duì)應(yīng)了 48 個(gè)功能亞分類;分子功能中 20 個(gè)基因得到了注釋結(jié)果,對(duì)應(yīng)了 48 個(gè)功能亞分類;生物過程中 23 個(gè)基因得到了注釋,對(duì)應(yīng)了 242 個(gè)功能亞分類。圖 2-3 列出了部分顯著富集的 GO 條目:可以發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞組分中,22 個(gè)差異基因主要富集于細(xì)胞(cell)、細(xì)胞部分(cell part)、膜(membrane)以及細(xì)胞器(organelle)條目上;在分子功能中,20 個(gè)差異基因主要富集在結(jié)合(binding)、催化活性(catalyticactivity)以及轉(zhuǎn)運(yùn)活性(transporteractivity)條目上;在生物過程中,23 個(gè)差異基因主要富集于單一生物過程(single-organism process)、生物調(diào)節(jié)(biologicalregulation)以及細(xì)胞過程(cellular process)上。


本文編號(hào):3293786

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