體外培養(yǎng)145-170gm牛腔前卵泡能夠形成卵泡腔已有人報(bào)道,但體外培養(yǎng)50-70μm的牛初級(jí)卵泡能否發(fā)育成腔仍沒有報(bào)道。為了建立適合牛初級(jí)卵泡體外生長(zhǎng)發(fā)育的培養(yǎng)體系,同時(shí)進(jìn)一步揭示牛腔前卵泡體外發(fā)育的相關(guān)機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)以屠宰場(chǎng)獲取的牛卵巢為材料,以機(jī)械分離法獲取直徑50-70μm的牛初級(jí)卵泡,以α-MEM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,調(diào)整不同濃度促卵泡素（FSH）、促黃體素（LH）和雌二醇（E2）激素配比以及優(yōu)化堿性成纖維生長(zhǎng)因子（bFGF）和表皮生長(zhǎng)因子（EGF）添加量等試驗(yàn),使用膠原包被的三維培養(yǎng)方法對(duì)牛初級(jí)卵泡進(jìn)行體外培養(yǎng)13或21天（d）,觀察卵泡直徑以及成腔的變化,并用Real-Time PCR檢測(cè)卵泡發(fā)育及成熟相關(guān)基因：芳香化酶（CYP19A1）、抗繆勒激素（AMH）、生長(zhǎng)分化因子9（GDF-9）、骨形成蛋白15（BMP-15）以及m型轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子p受體（TGFβR3）的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),以α-MEM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,0.25μg/mL FSH+5IU/mL LH+0.1μg/mL E2+50ng/mL bFGF組以及FSH+LH+E2+bFGF和25ng/mL EGF聯(lián)合處理組卵泡直徑在體外培... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    前言
    第一章 哺乳動(dòng)物腔前卵泡體外培養(yǎng)研究進(jìn)展
        1 卵泡和卵母細(xì)胞體內(nèi)發(fā)育概述
        2 卵泡和卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)研究進(jìn)展
    第二章 miRNA在卵巢中的研究進(jìn)展
        1 miRNA概述
        2 miRNA在卵巢中的功能
第二篇 研究論文
    第一章 牛初級(jí)卵泡體外培養(yǎng)體系的建立
        1 引言
        2 材料與方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
    第二章 miR-27a在小鼠顆粒細(xì)胞中的功能的研究
        1 引言
        2 材料和方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]卵巢早衰microRNA的差異表達(dá)及其作用[J]. 周瑩,朱英哲,張素華,王紅梅,王樹玉,楊曉葵.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2011(05)



本文編號(hào)：3287345