體外培養(yǎng)145-170gm牛腔前卵泡能夠形成卵泡腔已有人報道,但體外培養(yǎng)50-70μm的牛初級卵泡能否發(fā)育成腔仍沒有報道。為了建立適合牛初級卵泡體外生長發(fā)育的培養(yǎng)體系,同時進一步揭示牛腔前卵泡體外發(fā)育的相關機制,本實驗以屠宰場獲取的牛卵巢為材料,以機械分離法獲取直徑50-70μm的牛初級卵泡,以α-MEM為基礎培養(yǎng)基,調整不同濃度促卵泡素（FSH）、促黃體素（LH）和雌二醇（E2）激素配比以及優(yōu)化堿性成纖維生長因子（bFGF）和表皮生長因子（EGF）添加量等試驗,使用膠原包被的三維培養(yǎng)方法對牛初級卵泡進行體外培養(yǎng)13或21天（d）,觀察卵泡直徑以及成腔的變化,并用Real-Time PCR檢測卵泡發(fā)育及成熟相關基因：芳香化酶（CYP19A1）、抗繆勒激素（AMH）、生長分化因子9（GDF-9）、骨形成蛋白15（BMP-15）以及m型轉化生長因子p受體（TGFβR3）的表達。結果發(fā)現,以α-MEM為基礎培養(yǎng)基,0.25μg/mL FSH+5IU/mL LH+0.1μg/mL E2+50ng/mL bFGF組以及FSH+LH+E2+bFGF和25ng/mL EGF聯合處理組卵泡直徑在體外培... 

【文章來源】：中國農業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：104 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
縮略詞表
第一篇 文獻綜述
    前言
    第一章 哺乳動物腔前卵泡體外培養(yǎng)研究進展
        1 卵泡和卵母細胞體內發(fā)育概述
        2 卵泡和卵母細胞的體外培養(yǎng)研究進展
    第二章 miRNA在卵巢中的研究進展
        1 miRNA概述
        2 miRNA在卵巢中的功能
第二篇 研究論文
    第一章 牛初級卵泡體外培養(yǎng)體系的建立
        1 引言
        2 材料與方法
        3 實驗結果
        4 討論
    第二章 miR-27a在小鼠顆粒細胞中的功能的研究
        1 引言
        2 材料和方法
        3 實驗結果
        4 討論
結論與展望
參考文獻
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]卵巢早衰microRNA的差異表達及其作用[J]. 周瑩,朱英哲,張素華,王紅梅,王樹玉,楊曉葵.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2011(05)



本文編號：3287345