黃曲霉毒素B1（AFB1）是毒性最強的霉菌毒素之一，引起了全球在飼料和食品安全領(lǐng)域的關(guān)注。為了阻止污染的飼料和食品帶來的食品安全恐慌和經(jīng)濟損失，開發(fā)AFB1快速，靈敏和特異性的檢測方法顯得極其重要。本文開發(fā)了一種簡單，超靈敏和可靠的適配體傳感器檢測AFB1。該方法利用AFB1的適配體作為分子識別探針，與適配體互補的DNA作為實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR）的模板產(chǎn)生信號。優(yōu)化條件下，該方法的檢測范圍為5.0×10-5⁵.0ng·mL-1，極高的靈敏度為25fg·mL-1。本研究選擇其他的八種霉菌毒素作為干擾物檢測后Ct值沒有明顯的改變，表明適配體傳感器對AFB1極好的特異性。同時該傳感器也可以應(yīng)用于實際樣品羊草和嬰幼兒米粉中AFB1的檢測，獲得滿意的回收率分別為88%¹27%和94%¹19%。該方法在定量和高通量檢測飼料和食品中的霉菌毒素方面有很大的潛在應(yīng)用，并且檢測的目標(biāo)物還可以擴大到更大的范圍。AFB1可以直接污染食品，或者間接污染飼料，動物采食AFB1后，在奶中產(chǎn)生代謝物黃曲霉毒素M1（AFM1）[1,2]... 

【文章來源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

生物傳感器結(jié)構(gòu)

引起熒光信號的變化，最終達(dá)到定量檢測 OTA 的目的。該方法檢測性范圍為 2.0×10-8–1.0×10-5g·L-1，檢出限 1.0×10-8g·L-1。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為 2.6 組平行檢測 1×10-6g·L-1OTA）。同時，這個方法對于 OTA 有高度的選擇性且操作。已經(jīng)成功應(yīng)用于實際樣品中 OTA 的檢測[36]。在應(yīng)用適配體對目標(biāo)物性的基礎(chǔ)上，Ma 等（2012）用一種適配體傳感器達(dá)到了對 OTA 的超靈敏檢該方法利用適配體作為分子識別探針，與適配體互補 DNA 作為實時定量RT-qPCR)擴增的模板。結(jié)果表明檢測范圍從 5×10-6-5ng·mL-1，檢出L-1。同時具有特異性好，操作簡單，低成本的優(yōu)點。圖二展示了用這種生物傳感器定量檢測 OTA 的原理。利用目標(biāo)物與適配體的結(jié)合引起適配體的變化，互補 DNA 的釋放，通過 RT-PCR 檢測熒光信號的變化間接反映出 的含量[13]。

圖 1-3：相互競爭模式下檢測赭曲霉毒素 A 的原理圖[40]Wu 等（2012）開發(fā)了可折疊的電化學(xué)傳感器識別超靈敏的一步檢測赭曲 A。使用巰基和亞甲基藍(lán)雙重標(biāo)記的適配體修飾金電極的一步電化學(xué)傳感赭曲霉毒素 A（OTA）。對 OTA 特異的適配體共價結(jié)合在電極的表面，作 檢測的識別探針，與 OTA 結(jié)合之后誘導(dǎo)適配體的折疊。在最佳條件下，到很大的線性檢測范圍從 0.1pg·mL-1到 1000pg·mL-1，檢出限 LOD 為pg·mL-1，和通常的 OTA 檢測方法相比，表現(xiàn)出高度的靈敏性。研究表明開電化學(xué)傳感器可以作為一種有效的現(xiàn)場 OTA 檢測方法應(yīng)用于各種復(fù)雜的實品中[41]。 基于熒光信號的生物傳感器基于熒光信號的生物傳感器是應(yīng)用各種傳感器類型，依據(jù)實驗過程中熒光


本文編號：3285646