黃曲霉毒素B1（AFB1）是毒性最強(qiáng)的霉菌毒素之一，引起了全球在飼料和食品安全領(lǐng)域的關(guān)注。為了阻止污染的飼料和食品帶來(lái)的食品安全恐慌和經(jīng)濟(jì)損失，開發(fā)AFB1快速，靈敏和特異性的檢測(cè)方法顯得極其重要。本文開發(fā)了一種簡(jiǎn)單，超靈敏和可靠的適配體傳感器檢測(cè)AFB1。該方法利用AFB1的適配體作為分子識(shí)別探針，與適配體互補(bǔ)的DNA作為實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR）的模板產(chǎn)生信號(hào)。優(yōu)化條件下，該方法的檢測(cè)范圍為5.0×10-5⁵.0ng·mL-1，極高的靈敏度為25fg·mL-1。本研究選擇其他的八種霉菌毒素作為干擾物檢測(cè)后Ct值沒有明顯的改變，表明適配體傳感器對(duì)AFB1極好的特異性。同時(shí)該傳感器也可以應(yīng)用于實(shí)際樣品羊草和嬰幼兒米粉中AFB1的檢測(cè)，獲得滿意的回收率分別為88%¹27%和94%¹19%。該方法在定量和高通量檢測(cè)飼料和食品中的霉菌毒素方面有很大的潛在應(yīng)用，并且檢測(cè)的目標(biāo)物還可以擴(kuò)大到更大的范圍。AFB1可以直接污染食品，或者間接污染飼料，動(dòng)物采食AFB1后，在奶中產(chǎn)生代謝物黃曲霉毒素M1（AFM1）[1,2]... 

【文章來(lái)源】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

生物傳感器結(jié)構(gòu)

引起熒光信號(hào)的變化，最終達(dá)到定量檢測(cè) OTA 的目的。該方法檢測(cè)性范圍為 2.0×10-8–1.0×10-5g·L-1，檢出限 1.0×10-8g·L-1。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 2.6 組平行檢測(cè) 1×10-6g·L-1OTA）。同時(shí)，這個(gè)方法對(duì)于 OTA 有高度的選擇性且操作。已經(jīng)成功應(yīng)用于實(shí)際樣品中 OTA 的檢測(cè)[36]。在應(yīng)用適配體對(duì)目標(biāo)物性的基礎(chǔ)上，Ma 等（2012）用一種適配體傳感器達(dá)到了對(duì) OTA 的超靈敏檢該方法利用適配體作為分子識(shí)別探針，與適配體互補(bǔ) DNA 作為實(shí)時(shí)定量RT-qPCR)擴(kuò)增的模板。結(jié)果表明檢測(cè)范圍從 5×10-6-5ng·mL-1，檢出L-1。同時(shí)具有特異性好，操作簡(jiǎn)單，低成本的優(yōu)點(diǎn)。圖二展示了用這種生物傳感器定量檢測(cè) OTA 的原理。利用目標(biāo)物與適配體的結(jié)合引起適配體的變化，互補(bǔ) DNA 的釋放，通過(guò) RT-PCR 檢測(cè)熒光信號(hào)的變化間接反映出 的含量[13]。

圖 1-3：相互競(jìng)爭(zhēng)模式下檢測(cè)赭曲霉毒素 A 的原理圖[40]Wu 等（2012）開發(fā)了可折疊的電化學(xué)傳感器識(shí)別超靈敏的一步檢測(cè)赭曲 A。使用巰基和亞甲基藍(lán)雙重標(biāo)記的適配體修飾金電極的一步電化學(xué)傳感赭曲霉毒素 A（OTA）。對(duì) OTA 特異的適配體共價(jià)結(jié)合在電極的表面，作 檢測(cè)的識(shí)別探針，與 OTA 結(jié)合之后誘導(dǎo)適配體的折疊。在最佳條件下，到很大的線性檢測(cè)范圍從 0.1pg·mL-1到 1000pg·mL-1，檢出限 LOD 為pg·mL-1，和通常的 OTA 檢測(cè)方法相比，表現(xiàn)出高度的靈敏性。研究表明開電化學(xué)傳感器可以作為一種有效的現(xiàn)場(chǎng) OTA 檢測(cè)方法應(yīng)用于各種復(fù)雜的實(shí)品中[41]。 基于熒光信號(hào)的生物傳感器基于熒光信號(hào)的生物傳感器是應(yīng)用各種傳感器類型，依據(jù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中熒光


本文編號(hào)：3285646