苦馬豆素（Swainsonine, SW）是瘋草類有毒植物的主要毒性成分,因其引起動物中毒、死亡,每年給牧區(qū)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失,而受到國內(nèi)外毒理學(xué)者的普遍重視。SW可以競爭性抑制溶酶體僅-甘露糖苷酶（Lysosomal a-mannosidase, LAM）和高爾基體Β-甘露糖苷酶Ⅱ（Golgi a-mannosidase Ⅱ, GM Ⅱ）的活性,從而導(dǎo)致低聚糖在細(xì)胞質(zhì)中蓄積及糖蛋白合成異常,引發(fā)動物中毒。目前尚未研制出苦馬豆素的特效解毒劑。為探討SW致肝細(xì)胞的毒性作用及毒性機(jī)理,并尋求SW毒性作用的保護(hù)劑,本研究以大鼠正常肝細(xì)胞BRL-3A為研究對象,進(jìn)行以下試驗(yàn)。1、SW對BRL-3A細(xì)胞存活率的影響：用100、300、500、700、900、1100μg/mLSW處理細(xì)胞12、24、48、72 h后檢測細(xì)胞存活率,結(jié)果顯示,SW可以顯著降低細(xì)胞存活率,呈時間-劑量效應(yīng),攻毒48 h時,IC5o為907 μg/mL。2、SW對細(xì)胞損傷作用研究：用700、900、1100μg/mLSW處理細(xì)胞24、48、72h后觀察細(xì)胞形態(tài),取細(xì)胞上清檢測LDH、ALT和AST活性,結(jié)果顯示,SW可... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２哺乳動物細(xì)胞內(nèi)糖蛋白的合成和降解（粗箭頭表示糖蛋白成熟和代謝的過程，細(xì)箭頭代表糖??音酶抑制劑阻斷的反應(yīng)，實(shí)線方框代表內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和溶酶體膜，虛線方框代表細(xì)賄膜）??（Ｍｏｒｅｍ?州?２００２）??Ｆｉ２－２?Ｔｈｅ?ｂｉｏｓｎ?化巧?ｉｓ?ａｎｄ?Ｃ?扣?ａｂｏｌｉｓｍ?ｏｆｌｃｏｒｏｔｅｉｎｓ?ｉｎ?ｍａｍｍａｌｉａｎ?ｃｅｌｌｓ?

?９５?１２Ｇ?１４４?１６８??巧巧訪）??圖３－１?ＢＲＬ－３Ａ細(xì)胞生長曲線??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｂ民Ｌ－３Ａ?ｃｅｌｌｓ??３．?３．２?ＳＷ對ＢＲＩ＾－３Ａ細(xì)胞存活率的影響??由ＣＣＫ－８測定結(jié)果（圖３－２）可知，ＳＷ對ＢＲＬ－３Ａ細(xì)施有明顯的抑制作用，并且隨著??劑量增加、攻毒時間延長，抑制作用更加明顯，攻毒２４、４８、７２?ｈ，劑量７００－?１１００?｜Ｌｉｇ／ｍ＾??ＢＲＬ３Ａ細(xì)胞對ＳＷ的敏感性最高，７００、９００、ｎＯＯ峭／ｍＬＳＷ作用細(xì)胞２４、４８、７２ｈ后，??細(xì)胞存活率分別為：７８．２〇／〇、５７．１〇／〇、３３〇／〇；?７０．４％、４１〇／〇、１７．５％；?４４．７〇／〇、１９．２〇／〇、９〇／〇。??４８ＨＳＷ對ＢＲＬ３Ａ細(xì)胞ＩＣ５０為９０７鵬ＭｉＬ。后續(xù)試驗(yàn)選擇７００、９００、１１００鵬／ｍＬＳＷ為攻??毒劑量

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小花棘豆苦馬豆素對小白鼠肝臟α-甘露糖苷酶基因相對表達(dá)的影響[J]. 張建軍,韓敏,王宇,白穎.  中國畜牧獸醫(yī). 2014(02)
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[5]“瘋草”中苦馬豆素解毒制劑及抗腫瘤應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 郝寶成,梁劍平,楊賢鵬,劉宇,王保海,王學(xué)紅,劉建枝,趙美榮,張鐸.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(05)
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碩士論文
[1]苦馬豆素誘導(dǎo)新生SD大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡機(jī)制研究[D]. 張樑.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]甘肅棘豆致大鼠腦組織細(xì)胞凋亡與a-甘露糖苷酶變化研究[D]. 宋巖巖.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[3]苦馬豆素體外誘導(dǎo)SD大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡研究[D]. 龐龍.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[4]甘肅棘豆對大鼠亞急性毒性及α-甘露糖苷酶分布與表達(dá)的影響[D]. 榮杰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011



本文編號：3285378