發(fā)布時間：2021-07-14 22:45

　　隨著高通量測序技術的廣泛應用,肌肉組織中大量環(huán)狀RNA（circRNAs）被發(fā)現(xiàn)。已有報道circRNA-FC/T10、circRNA-WDR77、circ-ZNF09與肌肉的生長發(fā)育密切相關。作為目前研究最為深入的環(huán)狀RNA,CDR1as可競爭性結合miR-7調(diào)控靶基因IGF1R和Sp1的表達。同時發(fā)現(xiàn)CDR1as促進山羊骨骼肌衛(wèi)星細胞的分化。此外,生肌決定因子MyoD是肌衛(wèi)星細胞活化的標志物,可以調(diào)控肌肉特異性基因的表達促進成肌分化,并且在全基因組范圍內(nèi)具有廣泛的調(diào)控作用。故推測,在肌細胞分化過程中,MyoD可能直接或間接地調(diào)控肌肉相關的circRNAs表達,但迄今為止尚未見報道。因此,本研究旨在探討MyoD對CDR1as基因表達的調(diào)控作用及其機制。具體結果如下:1.利用RT-qPCR分析了 CDR1as及MyoD基因在胎兒期120 d母山羊的不同肌肉組織及SMSCs分化過程中的表達模式;發(fā)現(xiàn)CDR1as在腓腸肌中表達最高,其次為背最長肌,半腱肌中最低。而與MyoD、MyH 和MyoGmRNA的表達變化趨于一致。此外,CDR1as與MyoD基因在SMSCs分化過程中均呈先上升后下降... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１環(huán)狀ＲＮＡ的生物起源網(wǎng)??

２．１試驗材料??２．１．１樣品采集??試驗動物來源于四川南江黃羊原種場。在胎兒期１２０日齡各采集３只母山羊的不同??肌肉組織，包括同上�。ǎ樱鳎穑恚螅穑鳎幔簦澹�，背最長肌、半膜肌??（＆腿？騰、半腱肌、腰大�。ǎ遥幔幔恚瘢铮颍┖碗枘c肌??（Ｇｆｌ對ｒａｃｗｅｍ／ｗ＊ｓＯ，樣品置液氮中速凍，隨后保存于＿８０°Ｃ。??２．１．２試驗細胞??本試驗所用山羊骨骼肌衛(wèi)星細胞，小鼠Ｃ２Ｃ１２及人ＨｅＬａ細胞均來自實驗室凍存。??２．１．３試驗載體??（１）?ＰＭＤ１９－Ｔ載體購于北京擎科（ＴＳＩＮＧＫＥ）。??（２）構建過表達的載體為ｐＥＧＦＰ－Ｎｌ，購于Ｐｒｏｍｅｇａ公司產(chǎn)品。其結構圖如下??

Ｆｉｇ．?２－２?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐＧＬ３－Ｂａｓｉｃ?ｖｅｃｔｏｒ??２２２３?ＢａｍＨ?Ｉ．?ｏｒｉ?＼??ＳＶ４０?ｌａｔｅ?＼??Ｐ〇＿?Ｖ??１９７１?Ｉ－Ｗ?＾?■＂ｅ３／ＩＭ??＼?＼?（４〇４５ｂｐ）?ｍ??＾＾ＶｈＳＶＴＫ??＼＼?＼?ｊ７?Ｐｒｏｍｏｔｅｒ??＼＾Ｓ＾＼＾ｏｍｃｉｔｅｉｒ?Ｋ??Ｉ?６４９??＾－Ｈｉｎｄ?Ｈｉ?７６０??（１０４０）?Ｃｓｐ４５?Ｉ?＾Ｎｈｅ?＼?１０２４??圖２－３ｐＲＬ－ＴＫ載體結構圖??Ｆｉ．?２－３?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆＲＬ－ＴＫ?ｖｅｃｔｏｒ??


本文編號：3285036