禽呼腸孤病毒σC蛋白是病毒外殼蛋白的主要成分，位于病毒表面，是病毒型特異性抗原，能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性中和抗體，與病毒及病毒的吸附、增殖和合胞體的形成有關(guān)，能夠產(chǎn)生CPE，引起細(xì)胞凋亡。因此，σC蛋白是建立抗體檢測(cè)方法的重要目標(biāo)蛋白。新型番鴨呼腸孤病毒從2001年開始出現(xiàn)，主要分布在在浙江、江蘇、福建、廣東和廣西等地，鴨鵝主要發(fā)生以肝、脾出現(xiàn)大量出血性壞死灶為特征，又被稱為“出血性壞死性肝炎”，發(fā)病日齡以5¹0齡為主，死亡率在2%¹5%，各品種鴨（如番鴨、麻鴨、北京鴨等）和鵝均可感染。新型番鴨呼腸孤病毒與經(jīng)典番鴨呼腸孤病毒同屬于呼腸孤病毒科，正呼腸孤病毒屬，禽呼腸孤病毒群。本研究利用新型番鴨呼腸孤病毒基因組模板，采用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增σC基因，將擴(kuò)增產(chǎn)物克隆到pET-28a（+）載體中，得到pET-28a-σC重組載體，通過E. coli原核表達(dá)系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行表達(dá)，得到大小為36kDa的σC蛋白，并且通過蛋白免疫印跡分析與間接免疫熒光對(duì)σC蛋白的抗原特性進(jìn)行初步分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明新型番鴨呼腸孤病毒σC蛋白具有良好的反應(yīng)原性。將純化后的新型番鴨... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-MDRV病毒粒子電鏡照片

815-12 85.8 97.4 87.9 98.0 79.7 93.0 95.6 96.9 67.3 75.6 85.9 J18 97.1 99.6 88.0 99.0 98.4 99.3 97.5 98.5 97.9 99.0 99.403G 86.8 98.0 98.2 97.5 96.8 98.6 96.4 97.0 87.9 96.1 94.8毒 σA σB σC/σ1 P10 P18/NSP nt aa nt aa nt aa nt aa nt aa S1133 77.1 90.4 59.8 68.9 38.3 29.4 48.3 38.0 31.6 14.1 78.815-12 87.5 98.1 61.1 68.7 52.9 41.6 35.9 7.9 NE NE 84.J18 99.6 100 97.7 97.5 97.4 97.2 98.0 100 97.3 96.9 93.03G 88.8 97.6 94.7 94.6 97.4 97.5 98.3 100 96.7 95.7 94.活 48~51 周，在 4℃可存活 3 年以上，在-20℃可存活 4 年以上，在-80℃可存上；70%乙醇、0.5%有機(jī)碘和 5%過氧化氫溶液可滅活病毒（陳華美，2006）

-MDRV 病毒培養(yǎng)N-MDRV能夠在DF-1細(xì)胞生長(zhǎng)，病毒的效價(jià)可以通過DF-1細(xì)胞的rahi et al., 1981; Okuno et al., 1984）。將病毒接種于培養(yǎng)在六孔板的24h開始出現(xiàn)細(xì)胞病變，表現(xiàn)為單層細(xì)胞凝聚成團(tuán)，產(chǎn)生大量的合非常明顯，可見大量細(xì)胞脫落，漂浮在上清中，細(xì)胞變形（見13）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[9]一種新的鴨病(暫名鴨出血性壞死性肝炎)病原學(xué)研究初報(bào)[J]. 陳少鶯,陳仕龍,林鋒強(qiáng),江斌,王劭,程曉霞,朱小麗,張世忠,李兆龍,程由銓.  中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào). 2009(16)
[10]禽呼腸孤病毒血清學(xué)相關(guān)性及S3基因序列同源性分析[J]. 吳異健,梁英,王劭,李文跡,李江森,吳寶成.  福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2008(06)

碩士論文
[1]番鴨呼腸孤病毒σC基因真核表達(dá)及其間接ELISA方法的建立[D]. 鄒光盛.福建農(nóng)林大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3279284