牛腸道病毒（Bovine enterovirus,BEV）與柯薩奇病毒（Coxsackievirus,CA）、腸道病毒71型（Enterovirus,EV）、脊髓灰質炎病毒（Poliovirus,PV）等同屬于小RNA病毒科（Picornaviridae）腸道病毒屬（Enterovirus）中的成員。BEV感染主要引起牛的消化道和呼吸道癥狀,嚴重威脅養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展。2012年本實驗室從吉林省某牛場伴有咳嗽、腹瀉等臨床癥狀的病牛體內分離到國內首株E種腸道病毒,命名為HY12。由于BEV感染是國內新發(fā)傳染病,有關其致病機理及宿主抗病毒反應的免疫機制等眾多問題仍不清楚。本研究以HY12病毒感染RAW264.7細胞和ICR小鼠為研究模型,通過免疫學、分子生物學、組織病理學、免疫組織化學等方法對HY12病毒感染后IFNs、IRF3、IRF7、主要TLRs的表達情況進行了檢測。體內和體外實驗結果表明,HY12病毒感染可以誘導IFN-I（IFN-α和IFN-β）的產生,且IFN-I的表達呈時間依賴性。進一步探究IFN-I產生的分子機制,發(fā)現(xiàn)HY12病毒感染后TLR3和TLR7的表達與IFN-α和I... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Toll樣受體介導的信號轉導

2.1 HY12 病毒感染 RAW264.7 細胞 IFN-I mRNA 表達** P＜0.01。圖 2.2 Western blot 檢測 IFNs 表達情況與 HY12 病毒感染 8 h 的細胞 IFNs 蛋白表達結果; B: I與 -tubulin 蛋白的比值（** P＜0.01）。素的產生呈時間依賴性

圖 2.2 Western blot 檢測 IFNs 表達情況常細胞與 HY12 病毒感染 8 h 的細胞 IFNs 蛋白表達結果; B: IFNs 蛋白與 -tubulin 蛋白的比值（** P＜0.01）。 I 型干擾素的產生呈時間依賴性為了進一步確定 HY12 病毒感染后，IFNs 產生的規(guī)律。我們分別提取2 病毒不同時間點（2、4、8、12 和 24 hpi）細胞的 RNA 及蛋白用于檢測達。qRT-PCR 結果可見（如圖 2.3），與未感染細胞（0 h）相比，IFβ 的表達在感染后 2 h 顯著增加，8 h 達到高峰，12 h 降至正常水平，2零（低于正常水平）。而 IFN-II 在 HY12 病毒感染不同時間點后，細胞無顯著變化。此外，我們通過 Western blot 方法進一步驗證了上述結果4 所示，在 HY12 病毒感染后，細胞內不同時間點 IFNs 的蛋白表達與 趨勢一致。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]山東省某地區(qū)牛、羊腸道病毒感染的流行病學調查[J]. 李欣,胡俊英,林倩,王旭,鄭博偉,張澤財,胡莉萍,王新平.  中國獸醫(yī)學報. 2019(02)
[2]The Scorpion Venom Peptide Smp76 Inhibits Viral Infection by Regulating Type-Ⅰ Interferon Response[J]. Zhenglin Ji,Fangfang Li,Zhiqiang Xia,Xingchen Guo,Minjun Gao,Fang Sun,Yuting Cheng,Yingliang Wu,Wenxin Li,Syed Abid Ali,Zhijian Cao.  Virologica Sinica. 2018(06)
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[4]一株牛腸道病毒的分離與鑒定[J]. 宋文鳳,向文杰,林俊,李德棟,陳瑞紅,朱遠茂,薛飛.  中國動物傳染病學報. 2018(03)
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[10]從吉林省肉牛場新發(fā)疫病分離出E種腸道病毒[J]. 邢澤黎,朱利塞,王新平,李蘇靖,郭昌明,楊麗.  中國獸醫(yī)學報. 2014(03)

博士論文
[1]E種腸道病毒HY12準種與進化及VP1基因突變對病毒復制的影響[D]. 朱利塞.吉林大學 2017

碩士論文
[1]吉林省牛腸道病毒遺傳多樣性及與羊腸道病毒抗原性比較分析研究[D]. 劉亞靜.吉林大學 2018
[2]牛腸道病毒2A和3C蛋白酶通過負調控MAVS抑制牛β干擾素表達的研究[D]. 安東.東北農業(yè)大學 2017
[3]E種腸道病毒HY12的分離鑒定與雙抗體夾心ELISA檢測病毒抗原方法的建立及其應用[D]. 邢澤黎.吉林大學 2016
[4]BEV-3D-ELISA的建立及其在牛腸道病毒陽性個體篩選中的應用[D]. 周萍萍.東北農業(yè)大學 2016
[5]褐牙鲆干擾素調節(jié)因子3（IRF-3）和干擾素調節(jié)因子7（IRF-7）的全長cDNA克隆與表達分析[D]. 尹湘艷.中國海洋大學 2010



本文編號：3277883