為了解廣東某七彩山雞種禽場禽白血病流行情況,通過接種DF-1細胞、ELISA抗原檢測、聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）、囊膜基因克隆測序等方法分離并鑒定出兩株ALV-F,分別命名為FGD1801和FGD1802。為進一步了解分離株遺傳進化特點,利用PCR方法擴增出env基因并測序,同時與各亞群參考毒株的gp85核苷酸序列進行對比。結(jié)果顯示:這兩個分離株env基因gp85片段長度都為1 080 bp,預(yù)計編碼360個氨基酸,FGD1801和FGD1802分離株gp85基因核苷酸序列的相似性為92.8%,與A、B、E、J和K亞群共26株ALV參考毒株相似性在47.0%～64.5%之間,而與F亞群參考株的相似性在92.0%～92.5%,顯著高于其他亞群,且位于同一進化分支上。研究表明,從七彩山雞分離的FGD1801和FGD1802屬于ALV-F,是我國華南地區(qū)新發(fā)現(xiàn)的ALV亞群。 

【文章來源】：中國家禽. 2020,42(04)北大核心

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【部分圖文】：

圖2 兩個分離株ALV env基因擴增結(jié)果

圖1 兩個分離株ALV-F鑒定結(jié)果

雞的AL主要以誘導(dǎo)出現(xiàn)腫瘤，致免疫抑制和生長抑制等為臨床表現(xiàn)，給養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的損失[17]。目前還沒有藥物可以治療AL，也沒有疫苗可以預(yù)防AL，其防控策略主要是淘汰陽性雞群，從而達到凈化疫病的效果。我國將AL列為二類動物疫病，同時將其納入《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》優(yōu)先防治動物疫病名錄中，引導(dǎo)種禽場進行AL的凈化。近十年來我國積極推進雞AL的凈化工作，并取得了顯著進展[18]，建立了一批AL凈化示范場和動物疫病凈化創(chuàng)建場。但是之前AL凈化的對象主要是雞，對于其他禽類（尤其是珍禽）的AL感染情況報道相對很少。七彩山雞是一種具有較高經(jīng)濟價值的珍禽品種，近年來養(yǎng)殖七彩山雞的規(guī)模不斷擴大。廣東省作為七彩山雞重要的養(yǎng)殖基地，同時向全國多個省份提供七彩山雞種苗。眾所周知，AL可通過胚蛋垂直傳播給子代，這為ALV廣泛傳播提供了有利條件。鑒于上述情況，本研究展開了原種七彩山雞場ALV流行情況調(diào)查，結(jié)果表明所調(diào)查的七彩山雞核心育種群中至少有ALV-F存在，這為該場蛋傳性疾病的防控與凈化提供了科學(xué)依據(jù)。近幾年來，從野生鳥類中檢測到ALV-A、ALV-B和ALV-J[19,20]，野鴨中檢測到ALV-J[21]，而在其他鳥類中很少有相關(guān)報道。對于ALV亞群的鑒定，原來可根據(jù)宿主細胞的特異性、血清交叉中和試驗等，但是隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展，還可通過病毒囊膜蛋白gp85基因序列進行分類。ALV-F最初是從野雞發(fā)現(xiàn)的，通過基于DF-1細胞的病毒分離方法，本試驗從七彩山雞種群中分離到兩個F亞群ALV分離株（FGD1801和FGD1802毒株）。分離株gp85基因核苷酸序列與各亞群參考毒株核苷酸序列進行相似性比較及遺傳進化樹分析，結(jié)果顯示FGD1801、FGD1802與ALV-F參考毒株基因核苷酸序列的相似性為92.0%～92.5%，并且與ALV-F在同一進化分支上，而與其他參考毒株的相似性為47.0%～64.5%。雖然ALV的gp85基因容易突變，但是認為同一亞群的核苷酸序列相似性在90%左右，因此可以確定這兩個分離株應(yīng)屬于ALV-F，同時ALV-F gp85基因核苷酸序列遺傳進化樹也佐證這一結(jié)果。這是華南地區(qū)新發(fā)現(xiàn)的ALV亞群。該毒株對七彩山雞的致病性還需進一步研究。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3274229